pCAP01

别称:    Plasmid#59981
启动子:    
复制子:    pUC
感受态:    DH5a
培养温度:    37度
质粒宿主：    酵母菌
质粒用途：    蛋白表达
片段类型：    
片段物种：    
原核抗性：    Kan
筛选标记：    TRP1, URA3
荧光标记：

智立中特（武汉）生物科技有限公司是一家集生物研发，生产，销售，售后为一体的高新技术产业公司。拥有载体质粒，载体，国内外微生物菌种资源，感受态细胞，培养基，细胞株等广泛的生产销售线。
质粒菌株产品操作说明书

扩增流程

收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。

1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必先转化提质粒后使用）

①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μlddH2O去离子水溶解质粒；

②取1支100μl感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）

③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；

④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）

⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；

（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另外不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）

⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）

四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。

3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）

穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。

4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）

直接挑取单菌落至液体培养基中。

5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）

单独提取的液体质粒收到后可直接使用。

6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，保质期90天，请务必先转化提质粒后使用）

收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。

欢迎访问质粒载体网，本站隶属于智立中特（武汉）生物科技有限公司，官方网址www.zlzt.com


公司具备超净工作台、生物安全柜、-86℃超低温冰箱、高压灭菌锅，高速大型离心机，超低温离心机，生化培养箱等专业仪器设备，同时拥有多名长期从事分子生物研究的工作人员，可以快速有效的帮助全球生物科研工作者分享和获取相关产品。公司成立至今服务大量包括广大生命科研客户，包括北大清华中国农业大学等高校，中日友好医院，解放军总医院等医院，中科院，军科院，农科院等科研机构和一些部队单位。

通过产品研发的不断创新，服务质量不断提高，赢得了广大生命科研用户的信赖。并为工业农业等领域提高微生物产品和技术解决方案从而成为可信赖合作伙伴。

质粒载体产品：

提供各种类型载体宿主，基因种属类型，抗性，设计并构建质粒：大肠杆菌表达载体；哺乳动物表达载体；酵母表达载体；昆虫表达载体；植物表达载体；广;腺病毒载体...常用有pACYC184；pACYCDuet-1；pASK-IBA5plus+FUS(人基因）；pAX01；pBABE-Puro；pBAD24

pBI121；pBIFC-bFosVC155；pBIFC-VC15；pCDFDuet-1；pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro；pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puro；pBIFC-VN155(I152L)addgene27097；pCDH-MSCV-MCS-EF1-copGFP-T2A-Puro；pCAGGS；pBiFC-VN173(Plasmid#22010)；pBlueScriptSK(+)；pBlueScriptIISK(+)；pBV220；pCas；pCas9

pBR322；pBT3-STE；pBudCE4.1以及结合转移质粒RP4；pGL4.25[luc2CP/minP];pGR106;pIRES2-AcGFP1-Nuc;psfGFP;pHEN1;pNL1.1[Nluc];pBBR1-GFP；pBMTB-5;pBMTB-4;pBMTB-3;pBMTB-2;pCAMBIA0305.1;pCX-DR;;pGreenII0800-miRNA;pK7GWIWG2(I);pRARE;pDG1663