pECMV-LONP1(human)-K145Q-3×FLA

别称: NM_004793.4;CODASS; hLON; LON; LonHS
启动子: CMV
复制子: pUC
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
5'测序引物: CMV-F
3'测序引物: BGH
备注: 2880bp

 智立中特（武汉）生物科技有限公司主要致力于质粒微生物资源的保护、共享和持续利用，围绕我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展等重大需求，探索、发现、收集国内外的微生物资源，妥善长期保存管理；在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供质粒载体物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。旗下质粒载体网zlzt.com是一款提供质粒载体展示及定制的专业型网站，由智立中特（武汉）生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造！主要展示了各种基因类型下的质粒载体！

我们的工作主要包括：广泛分离、收集、保藏、交换和供应各类微生物质粒菌种；保存用于专利程序的各种可培养生物材料；质粒载体类保藏技术研究；微生物分离、培养技术研究；微生物鉴定和复核技术研究；保藏菌种的资料情报收集和提供及编辑微生物菌种目录。
    目前保存各类载体资源超过20000余种 ，质粒微生物约5000株，另外我们还代理国外微生物菌种资源，如addgene，安捷伦，thermo，atcc等。
质粒载体网http://www.zlzt.com是一款提供质粒载体展示及定制的专业型网站，由智立中特（武汉）生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造！主要展示了各种基因类型下的质粒载体！网站域名zlzt.com，为质粒载体的拼音首字母，大大方便了广大新老客户对网站的收藏！质粒载体网的LOGO展现的是基因的形状，与网站所体现的质粒载体内容思想高度贴合！网站首页主要展示了企业文化的banner、关注度较高的质粒或载体产品、企业风采及相关新闻、网站信息的二维码、实验室风采以及合作单位等信息！并在网页顶端配备有搜索框及菜单导航，方便了客户对质粒载体的搜索以及对其它页面的查看！
　　质粒菌株产品操作说明书

　　扩增流程

　　收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。

　　1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必先转化提质粒后使用）

　　①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μlddH2O去离子水溶解质粒；

　　②取1支100μl感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）

　　③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；

　　④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）

　　⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；

　　（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另外不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）

　　⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

　　2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）

　　四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。

　　3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）

　　穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。

　　4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）

　　直接挑取单菌落至液体培养基中。

　　5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）

　　单独提取的液体质粒收到后可直接使用。

　　6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，保质期90天，请务必先转化提质粒后使用）

　　收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。