2-羟基嘧啶-5-甲酰胺；1233198-67-8

分子杂交技术（四）

（0.015mol/l Na+ ）,55℃。代入公式（4）可得： Tm =81.5 (-30.3) +17.22 �1-0 =67℃ 67℃-55℃=12℃ 　　因此，较Tm低12℃的漂洗条件比Tm 低25℃的杂交相比条件更严格了。 　　对寡核苷核探针而言，杂交温度往往低于Tm5℃，因此，对一个G+C为50%的30nt寡核苷酸探针来说，Tm 值为： T杂交=55℃-5℃=50℃ 　　下面一个经典的公式适用于14-20

【心得】谈谈PCR引物设计

特殊的共溶剂如二甲基亚砜、甲酰胺和甘油。 计算机辅助引物设计比人工设计或随机选取更有效。一些影响PCR反应中引物作用的因素诸如溶解温度、引物间可能的同源性等，易于在计算机软件中被编码和限定。计算机的高速度可完成对引物位置、长度以及适应用户特殊条件的其他有关引物的变换可能性的大量计算。通过对成千种组合的检测，调整各项参数，可提出适合用户特殊实验的引物。因此通过计算机软件选择的引物的总体“质量”（由用户在程序参数中设定）保证优于通过人工导出的引物。 需要指出的是，引物不必与模板完全同源，因此可包

生化实验室常用技术参数资料

缓冲液 　　测序凝胶加样缓冲液 　　98%去离子甲酰胺 　　10mol/L EDTA(pH8.0) 　　0.025%二甲苯青FF 　　0.025%溴酚蓝 　　甲酰胺：许多批号的试剂级甲酰胺，其纯度符合使用要求，无须再进行处理。不过，一旦略呈黄色，则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与Dowex XG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理，并用Whatman 1号滤纸过滤2次，去离子甲酰胺分装成小份，充氮存于-70℃。 常用的电泳缓冲液 缓冲液 使用液 浓贮存