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无锡云萃生物
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1226804-17-6
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10mg/50mg/100mg
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
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| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验C34 H32 O4 N4 FeCl,为高铁( Fe111 )卟啉的氯化物。狭义地说是原卟啉的三价铁络盐,亦称为氯血红素( protohemin)。通常将可使白血球溶血的物质注入加有少量食盐的热水醋酸中,使血红蛋白分解,加适量水放热,使色素部分以氯化物形式结晶。溶解于弱碱,如果是强碱则 Cl被 OH置换,生成羟高铁血红素。如果把羟高铁血红素和血红素与珠蛋白混合,可以分别再合成高铁血红蛋白和血红蛋白。如用强酸处理血红素,则铁被氢离子置换
上的嘌呤,再将样品与氯乙醛共同孵育,这样5mC就转变为带有强荧光的乙烯胞嘧啶,荧光的强度与原5mC的水平成正比。这种方法可以直接测定基因组整体5mC水平。其优点是所用试剂价格低廉且稳定性好,避免了放射性污染,但缺点是费时费力,而且氯乙醛是一种有毒的物质。 2.2 特异性位点的DNA甲基化的检测 2.2.1 甲基化敏感性限制性内切酶(methylation-sensitive restriction Endonuclease,MS-RE)-PCR/Southern法 这种方法利用甲基化敏感性限制性内切
DNA 样品,将未甲基化的胞嘧啶(C)转化为尿嘧啶(U)。重亚硫酸盐处理不会影响甲基化的胞嘧啶(m5C) 。为了检测甲基化位点,一对引物经设计带有鸟嘌呤(G),可与目标序列中的 m5C 配对;为了检测未甲基化位点,另一对引物带有腺嘌呤(A),可与重亚硫酸盐转化分子中的U配对(随后,与后续 PCR 循环中的胸腺嘧啶(T)配对)。通过引物配对得到的阳性 PCR 扩增结果可用于确定位点的甲基化状态(图 7)。 图 7.甲基化特异性 PCR 第一步,使用重亚硫酸盐处理 DNA 样品,将未甲基化的胞嘧啶转化
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