N-烯丙基苄胺；4383-22-6

应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性的方法

酶 A [19 ]、RNA 酶 HI[ 20 ] 、金黄色葡萄球菌核酸酶 R(staphylococcal  nuclease  R)[17] 、硫氛酸酶 [21，22]、Tag DNA 聚合酶的 Stoffel 片段 [23] 以及氯霉素乙酰转移酶 [18] 中得到证实。尽管部分蛋白质不能缺失其末端的甚至一个氨基酸，对于绝大多数蛋白质来说，其末端氨基酸的缺失会显著影响其表达水平、原始构 象和稳定性，然而在一定范围内仍然有功能（如较低的反应温度）。不过，一旦超越这一范围，末端截切便会导致不可

环肽的合成方法

多肽，可选择这两个酸性氨基酸残基的侧链羧基为C端，与PAC（烷氧基苄醇）或PAL（烷氧基苄胺）或其他类型树脂缩合，将线性多肽挂在树脂上。主链羧基用烯丙基保护。逐步接肽完成之后脱去N端和C端保护基，加入缩合剂得到连在树脂上的环合产物。最后用三氟醋酸：茴香硫醚：b-巯基乙醇：苯甲醚混合试剂从树脂上切下环肽，同时脱去其它侧链保护基。采用这种策略完成了Cyclo（Ala-Ala-Arg-D-Phe-Pro-Glu-asp-Asn-Tyr-glu）的合成，收率为71%。这种方法的局限性在于线性多肽前体中必需

人造锌指蛋白的设计和合成

。 ( 21 ) 三氟乙酸：乙醇（95 : 5 ) 溶液。 ( 22 ) 高效液相色谱设备。 ( 23 ) μBonedespliere5C4-300 (19 mm X 150 mm) 柱 。 ( 24 ) 飞行时间质谱设备。 ( 25 ) 圆二色（CD) 谱设备。 ( 26 ) 紫外-可见（UV-VIS ) 光谱仪。 ( 27 ) 核磁共振（NMR) 设备。4. 注 1. Kriippel 型连接子（Thr-Gly-Glu-Lys-Pro，TGEKP) 在许多锌