甲脒硫/酸盐；1821033-48-0

DNA甲基化研究方法的回顾与评价（下）

]。 MSO要求预先设计一对含有2个不相邻的GC（或AC）的探针，用于识别甲基化和非甲基化的序列，其中含GC的探针（5[42]'---GC---GC---3'）识别甲基化序列，含AC的探针（5'---AC---AC---3'）识别非甲基化序列，探针的5'端通过Linker固定于玻璃板上。首先对待研究片段用重亚硫酸盐处理，将非甲基化的胞嘧啶变为尿嘧啶，甲基化的不变，再行PCR扩增，产物的3'端用荧光素标记，移至连有探针的玻璃板上进行杂交，通过检测杂交后产生的荧光强度判断待测序列中甲基化的水平。此方法一定

酵母分批培养实验操作方法

，以每两秒一滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。 4、 样品溶液测定：吸取5.0ml碱性酒石酸甲液及5.0ml乙液，置于150ml锥形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠两粒，从滴定管加比预测体积少1ml的样品溶液，使在2min内加热至沸，趁沸继续以每两秒一滴，直到蓝色刚好褪去终点，记录样液消耗体积，同法平行操作三分，得出平均消耗体积。 四、 计算 X(以葡萄糖计)=(m/V)*200(mg/100ml) 式中X——100ml样品中

DNA甲基化研究方法的回顾与评价

所用处理方法不同可以分为：基于PCR的甲基化分析方法；基于限制性内切酶的甲基化分析方法；基于重亚硫酸盐的甲基化分析方法和柱层法等。Christina Dahl和Per Guldberg[3]归纳总结了主要的甲基化分析方法及相关特性，在此基础上我们略加以补充。2 甲基化研究方法学回顾 2.1 基因组整体水平甲基化分析 2.1.1 高效液相色谱柱（HPLC）及相关方法 HPLC是一种比较传统的方法，能够定量测定基因组整体水平DNA甲基化水平。它由Kuo等1980年[18]首次报道。过程是将DNA样品先经盐