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无锡云萃生物
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65344-26-5
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10mg/50mg/100mg
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验箱(37℃)。材料:小鼠c26结肠癌和lewis肺癌组织块。试剂:1640培养基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank's液,碘酒。二、操作步骤:(一)胰酶消化法:1、器材:将小鼠c26结肠癌和lewis肺癌组织块置75%酒精泡2-3秒钟。2、用Hank's液洗涤三次。3、用手术剪将组织剪成小块(1mm2),再用Hank's液洗三次,转移至小青霉素瓶中。4、视组织块量加入5-6倍的0.25%胰酶液,37℃中消化20-40分钟,每隔5分钟振荡一次,或用吸管吹打一次,使细胞分离。5、加入3-5ml
% EDTA)消化-->镜下观察细胞突起回缩(2-5分钟左右)-->以完全培液(DMEM+10% NBS)终止反应(若不用EDTA,可以不需离心)-->吹打,1:2-1:3接种,然后继续培养(5% CO2,37度)。 结果 次日,光镜下可见细胞呈星芒状,胞质内有脂滴,荧光镜下328 nm处见自发荧光。 讨论 进一步鉴别需要做免疫组化:Desmin和alpha-SMA;后者在细胞激活后才表达。也采用过无须原位消化的方案,完全可行,只不过消化时间更难控制! 参考文献 袁桃霞,张锦生,张月娥
0.1mol/L的PB于1000ml,充分混匀。 该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究,最好是动物经灌注固定取材后,继续浸泡固定2~24h。另外,该固定剂较为温和,适于组织标本的较长期保存。 2.4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠 试剂:A液:多聚甲醛 40g 蒸馏水 400ml B液:Na2HPO4·2H2O 16.88g 蒸馏水 300ml C液:NaOH 3.86g
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