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无锡云萃生物
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3066-75-9
- 规格:
10mg/50mg/100mg
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验片段单酶切后,在 DNA 片段两端是互补的粘端。DNA 片段插入载体时具有正反两个方向。③平齐末端连接需要在 DNA5'-端去磷酸化,否则线性载体 DNA 分子将发生自身环化连接。(一)5'-端去磷酸化反应通常只对载体 DNA 分子进行 5'-端去磷酸化反应就基本可以避免自身环化连接。【实验试剂与器材】1. 小牛肠磷酸酶 (Calf intestine phosphatase ,CIP)2. 10×CIP 缓冲液【实验方法与步骤】1. 酶切 DNA 反应,在 75 ℃ 加热 15 min 灭活
水+磷酸二氢钾0.25g+硫酸镁0.25g+硝酸钙1.00g+硝酸钾0.25g+微量磷酸铁。 2.处理液:EMS(甲基磺酸乙酯),由培养液配成,50mmol/L,75mmol/L,100mmol/L,150mmol/L等各种处理浓度。NaN3(叠氮钠),由培养液配成,0.2mmol/L0.4mmol/L,0.8mmol/L等各种浓度。 DES(硫酸二乙酯)由培养液配成50mmol/L,100mmol/L,150mmol/L等各种浓度。
(焦碳酸二乙酯)水浸泡。3、常用的RNA抑制剂:(1)焦磷酸二乙酯(DEPC):一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂,通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环反应从而抑制酶的活性。(2)异硫氰酸胍:最有效的RNA酶抑制剂。在裂解组织细胞的同时,也使RNA酶失活。它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中分离出来,又对RNA酶有强烈的变性作用。(3)氧钒糖核苷复合物:由氧化钒离子和核苷形成的复合物,与RNA酶结合后几乎能完全抑制RNA酶的活性。(4)RNA酶的蛋白抑制剂(RNasin):从人胎
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