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无锡云萃生物
- CAS号:
1350325-05-1
- 规格:
10mg/50mg/100mg
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体 HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基,再与抗体蛋白的氨基形成Schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联,在标记前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的a-和e-氨基。酶与抗体的结合反应后,再加入硼氢化钠还原成稳定的结合物。 (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸盐缓冲液1ml中,加入1%DNFB无水乙醇溶液0.1ml,室温下轻微搅拌1h
。 (7) 以0.05mol/L pH 7.4 PBS 透析过夜。 (8) 过Sephadex G100柱(100cm×2cm),以0.5mol/L pH7.4 PBS 液洗脱,流速10ml/h。 (9) 测OD403nm,集SPA-HRP活性部分。 (10) 将高活性组分合并,加入甘油(含30%)置低温保存。也可以采用过碘酸钠法,制法如下:①5mg HRP溶于1ml新配制的0.3mol/L pH 8.1的NaHCO3液中;②加入无水乙醇配制1%1-荧光-
测定法 β内酰胺酶破坏β内酰胺环,碘与被打开β内酰胺环结合,使蓝色的淀粉-碘复合物转变成无色。 方法:用pH6.0磷酸缓冲液配制青霉素悬液 6000μg/ml,取该液0.1 ml置于微量稀释板凹孔中,挑选检测菌株数个菌落混悬于其中,摇动30min,静置室温中1h,加淀粉液2滴,再加碘液1滴,混合,立即观察颜色变化,阳性者当加入碘液后,首先立即出现蓝色、如在10min内消失蓝色,提示该菌产生β-内酰胺酶。 (三)酸测量法 青霉素被β-内酶胺酶水解后成青霉素酸,pH值下降6.8以下,用酚红
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