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无锡云萃生物
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1330-20-⑦
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10mg/50mg/100mg
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验我做NF-kB的EMSA实验方法和结果,条带不好,请大家指点!
核蛋白提取: (1)5 millions个离心收集 (2)弃上清,细胞沉淀重悬于1.5ml冰预冷的PBS缓冲液,4℃下2000 rpm离心5min。 (3)弃上清,沉淀重悬于500μl冰预冷的Buffer A离心收集,再悬于0.5 ml Buffer A。 (4)冰上放置10分钟,加入NP40使终浓度为0.5%,混匀后,轻摇20秒。 (5)4℃下1330×g离心15分钟得到细胞核。 (6)重悬于50µl Buffer B,于冰上强烈振荡15分钟,4℃下16300×g离心10分钟
酒精透化(如材料脱水不净,进入此步,将出现浑浊),每隔2-3小时更换1次,至纯二甲苯,重复换1次,使酒精完全脱除。⑤浸蜡:将指管(连同材料及二甲苯)放入60℃温箱中,取熔点52-56℃的纯净石蜡小块片(或熔融的石蜡)逐步加入指管中,使熔蜡达到饱和,并让二甲苯徐徐挥散,换蜡3-4次,至口尝无异味,如同嚼蜡为止。⑥包埋:将熔蜡及材料趁热倒入预制小纸盒中,调整材料位置,使之疏散均匀,让蜡渐渐冷凝,移浮于水面,至完全凝固。⑦切片:剥离纸盒,切取材料蜡块,于旋转切片机上切成连续蜡带8-15μm厚。⑧粘片:被片
索氏提取器(一套)。 ④分析天平。 ⑤恒温水浴锅 ⑥干燥器。 ⑦铁架台。 ⑧橡皮管。 ⑨万能夹。 ⑩干燥箱。 电吹风。 2. 试剂 : 无水乙醚:市售无水乙醚往往仍有水分,需处理后使用,处理方法如下: ①含水较多的乙醚,可先于乙醚中投入无水氯化钙(约为总体积1/3),1—2天后,过滤, 水浴 蒸馏,收集36℃馏出液。于此馏出液中加适量金属
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