无菌去离子水；7732-18-5

ELISPOT标准操作程序（protocol）

h。 注意： 碰撞会引起细胞移位，造成斑点模糊、拖尾。在整个培养过程中应避免移动、碰撞培养板，并尽量减少开关培养箱的次数。第三天：培养后操作（不再需要无菌操作） 1、裂解细胞 倾倒孔内的细胞及培养基，200μL/孔加入冰冷的去离子水，4C冰浴10min（低渗法裂解细胞）。 2、洗涤 每孔加入200μLPBST，浸泡3-5mins后扣出洗涤液，重复5次。最后一次，在吸水纸上扣干。 3、加入检测抗体 每孔加入100μL稀释好的生物素标记检测抗体，37°C孵育1h。 4、 洗涤 每孔加入

类器官培养与应用——肺类器官

祖细胞类器官培养基进行培养。 16B、每 2-3天 按照步骤 12B-15B 进行传代。   培养芽尖祖细胞类器官 17B、在芽尖祖细胞培养约 2 周后，会形成一个几乎均质的芽尖祖细胞群体。向各孔中加入 0.5ml 人芽尖祖细胞类器官培养基，确保完全覆盖 Matrigel 液滴。每 3-5 天换液一次。 18B、如果类器官出现腔中积攒了细胞碎片，或下沉到 Matrigel 的底部，则用移液管轻轻刮培养孔底部，以解离含有类器官的 Matrigel。 19B、用移液器将 Matrigel 液滴和周围

ELISPOT标准操作步骤

相关专题 酶联免疫斑点法（ELISpot） 第一天：ELISPOT 包被程序，提供两种方案供选择(严格注意无菌操作) 一、传统酒精预湿包被程序 该方案中，需经过：70%乙醇预湿PVDF膜、无菌去离子水 洗涤去除乙醇、拍干，最后，加入已稀释好的包被抗体到各实验孔完成包被操作。 具体操作如下： 1、实验卡片填写：设计好试验，把每个孔要加入的内容做成卡片，到时候就会从容很多。