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无锡云萃生物
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7254-19-5
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100g/500g/1kg/5kg
| 规格: | 100g | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500g | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 1kg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 5kg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验[原理] DNA是通过异羟基洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)配基标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(dUTP)随机插入结合而被标记。dUTP通过间臂连结类固醇半抗原异羟基洋地黄毒苷酸基,形成Dig-dUTP,杂交反应后,杂交的靶DNA通过酶联免疫法与一个抗体复合物[抗异羟基洋地黄毒苷配基碱性磷酸酶复合物(Dig)Ap]结合,接着在5-溴-4氯-3-吲哚磷酸盐(X-磷酸盐)和硝基四氮唑蓝(NBT)存在下,由酶催化反应,在杂交部位形成蓝紫色带或颗粒。 [操作] 1.转移 通过打点吸渍
菌落。该产品筛选效果同蓝白斑筛选,且价格低廉。但需及时挑取白色菌落,当培养时间延长,白色菌落会逐渐变成微红色,影响挑选。 7、X-gal是5-溴-4-氯-3-吲哚-b-D-半乳糖(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D-galactoside)以半乳糖苷酶(b-galactosidase)水解后生成的吲哚衍生物显蓝色。IPTG是异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylthiogalactoside),为非生理性的诱导物,它可以诱导lacZ的表达。 8、在含有
。 (23)0.05mol/l PBS冲洗3×5min。 (24)TSM,冲洗2×5min(TSM1:0.1mol/l Tris – HCl pH8.0,0.1mol/L NaCl,0.01mol/L MgCl2). (25)硝基四氮唑蓝(400μg/ml)和5-溴-4-3-吲哚磷酸(200μg/ml)混合液(TSM2配显色混合液)显色1~3h,避光。 (26)20mmol/l EDTA终止显色。 (27)将切片贴于涂有铬矾明胶的载片上,空气
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