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- 供应商:
无锡云萃生物
- CAS号:
172418-32-5
- 规格:
10mg/50mg/100mg
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥100.0 |
云萃
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文献和实验,使用0.3μg),用H2 O调整体积至15μl, 70℃处理5分钟,冷却至室温,离心使溶液集中在管底,再依次加入 5×第一链缓冲液 5μl rRNasin RNA 酶抑制剂 25U M-MLV(H- )反转录酶 200U H2O 调至总体积25μl (2) 用手指轻弹管壁,吸取5μl至另一eppendorf管,加入2-5μCi [α-32 P] dCTP (>400Ci/mmol),用以第一链同位素掺入放射性活性测定。 (3) 37℃(随机引物)或42℃(其它引物)温浴
不同,一般为0.5~5.0 μg/ml(0.5~5.0 ng/μl)。最适宜的探针浓度要通过实验才能确定。 探针的长度: 一般应在50-300个碱基之间,最长不宜超过400个碱基。探针短易进入细胞,杂交率高,杂交时间短。 二、试剂准备 1. 0.1 M PBS (pH7.2):Na2HPO4•12 H2O 61.6 g、NaH2PO4•2 H2O 5.6 g、NaCl 9 g,加ddH2O至2000 ml,高压灭菌。 2. 0.2 M PB ((pH7.2):Na2HPO4•12 H2O 61
酶抑制剂 25U M-MLV(H- )反转录酶 200U H2 O 调至总体积25μl (2) 用手指轻弹管壁,吸取5μl至另一eppendorf管,加入2-5μCi [α-32 P] dCTP (>400Ci/mmol),用以第一链同位素掺入放射性活性测定。 (3) 37℃(随机引物)或42℃(其它引物)温浴1小时 (4) 取出置于冰上 (5) 掺入测定的eppendorf管加入95μl 50mM EDTA终止反应,并使总体积为100μl。可取90μl
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