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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
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- 保质期：
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- 英文名：
N
- 库存：
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- 供应商：
无锡云萃生物
- CAS号：
7464-93-9
- 规格：
10mg/50mg/100mg
| 规格： | 10mg | 产品价格： | ￥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50mg | 产品价格： | ￥100.0 |
| 规格： | 100mg | 产品价格： | ￥100.0 |
云萃
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文献和实验一、实验概要 PCR 扩增目标 DNA 片段。 二、实验原理 多聚酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）基本原理类似于 DNA 的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR 由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。 1. 模板 DNA 的变性：模板 DNA 经加热至 93℃ 左右一定时间后，使模板 DNA 双链或经 PCR 扩增形成的双链 DNA 解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备； 2. 模板 DNA 与引物
--延伸三个基本反应步骤构成： 模板DNA的变性：模板DNA经加热至93 ℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备； 模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55 ℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合； 引物的延伸：DNA模板--引物结合物在聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链，重复循环变性
PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置：基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在TaqDNA聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100～300bp时)可采用二温度点法，除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一，一般采用94℃
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