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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
pP53-TA-Luc
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:pP53-TA-luc哺乳报告质粒
别称: pP53-TA-Luc
| 启动子: | SV40 |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞,信号通路报告载体 |
| 质粒大小: | 5659bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导,瞬时表达 |
| 5'测序引物: | 根据序列设计引物 |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 载体宿主: | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途: | 信号报告 |
| 基因种属: | |
| 基因类型: | |
| 原核抗性: | Amp |
| 真核抗性: | |
| 荧光蛋白: | fLuc |
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5659 bp ds-DNA circular SYN 04-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 2
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5659)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sunday, September 4, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5659
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 96..127
/note="minP"
/note="minimal TATA-box promoter with low basal activity"
CDS 160..1812
/codon_start=1
/product="firefly luciferase"
/note="luciferase"
/note="synthetic luc2 version of the luciferase gene"
/translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
HIEVDITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
ANDIYNERELLNSMGISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
MYTFVTSHLPPGFNEYDFVPESFDRDKTIALIMNSSGSTGLPKGVALPHRTACVRFSHA
RDPIFGNQIIPDTAILSVVPFHHGFGMFTTLGYLICGFRVVLMYRFEEELFLRSLQDYK
IQSALLVPTLFSFFAKSTLIDKYDLSNLHEIASGGAPLSKEVGEAVAKRFHLPGIRQGY
GLTETTSAILITPEGDDKPGAVGKVVPFFEAKVVDLDTGKTLGVNQRGELCVRGPMIMS
GYVNNPEATNALIDKDGWLHSGDIAYWDEDEHFFIVDRLKSLIKYKGYQVAPAELESIL
LQHPNIFDAGVAGLPDDDAGELPAAVVVLEHGKTMTEKEIVDYVASQVTTAKKLRGGVV
FVDEVPKGLTGKLDARKIREILIKAKKGGKIAV"
polyA_signal 1856..1977
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
promoter 2171..2528
/note="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 2379..2514
/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
CDS 2559..3353
/codon_start=1
/product="aminoglycoside phosphotransferase"
/note="NeoR/KanR"
/note="confers resistance to neomycin, kanamycin, and G418
(Geneticin(R))"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPAT-CPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKARMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"
polyA_signal 3378..3426
/note="synthetic polyadenylation signal"
rep_origin complement(3753..4341)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(4541..5401)
/codon_start=1
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
polyA_signal 5506..5554
/note="synthetic polyadenylation signal"
misc_feature 5568..5659
/note="pause site"
/note="RNA polymerase II transcriptional pause signal from
the human alpha-2 globin gene"
ORIGIN
1 ggcctaactg gccggtacca cgtttgcctt gcctggactt gcctggcctt gccttggaca
61 tgcccgggct gtcagatctg cagaagctta gacactagag ggtatataat ggaagctcga
121 cttccagctt ggcaatccgg tactgttggt aaagccacca tggaagatgc caaaaacatt
181 aagaagggcc cagcgccatt ctacccactc gaagacggga ccgccggcga gcagctgcac
241 aaagccatga agcgctacgc cctggtgccc ggcaccatcg cctttaccga cgcacatatc
301 gaggtggaca ttacctacgc cgagtacttc gagatgagcg ttcggctggc agaagctatg
361 aagcgctatg ggctgaatac aaaccatcgg atcgtggtgt gcagcgagaa tagcttgcag
421 ttcttcatgc ccgtgttggg tgccctgttc atcggtgtgg ctgtggcccc agctaacgac
481 atctacaacg agcgcgagct gctgaacagc atgggcatca gccagcccac cgtcgtattc
541 gtgagcaaga aagggctgca aaagatcctc aacgtgcaaa agaagctacc gatcatacaa
601 aagatcatca tcatggatag caagaccgac taccagggct tccaaagcat gtacaccttc
661 gtgacttccc atttgccacc cggcttcaac gagtacgact tcgtgcccga gagcttcgac
721 cgggacaaaa ccatcgccct gatcatgaac agtagtggca gtaccggatt gcccaagggc
781 gtagccctac cgcaccgcac cgcttgtgtc cgattcagtc atgcccgcga ccccatcttc
841 ggcaaccaga tcatccccga caccgctatc ctcagcgtgg tgccatttca ccacggcttc
901 ggcatgttca ccacgctggg ctacttgatc tgcggctttc gggtcgtgct catgtaccgc
961 ttcgaggagg agctattctt gcgcagcttg caagactata agattcaatc tgccctgctg
1021 gtgcccacac tatttagctt cttcgctaag agcactctca tcgacaagta cgacctaagc
1081 aacttgcacg agatcgccag cggcggggcg ccgctcagca aggaggtagg tgaggccgtg
1141 gccaaacgct tccacctacc aggcatccgc cagggctacg gcctgacaga aacaaccagc
1201 gccattctga tcacccccga aggggacgac aagcctggcg cagtaggcaa ggtggtgccc
1261 ttcttcgagg ctaaggtggt ggacttggac accggtaaga cactgggtgt gaaccagcgc
1321 ggcgagctgt gcgtccgtgg ccccatgatc atgagcggct acgttaacaa ccccgaggct
1381 acaaacgctc tcatcgacaa ggacggctgg ctgcacagcg gcgacatcgc ctactgggac
1441 gaggacgagc acttcttcat cgtggaccgg ctgaagagcc tgatcaaata caagggctac
1501 caggtagccc cagccgaact ggagagcatc ctgctgcaac accccaacat cttcgacgcc
1561 ggggtcgccg gcctgcccga cgacgatgcc ggcgagctgc ccgccgcagt cgtcgtgctg
1621 gaacacggta aaaccatgac cgagaaggag atcgtggact atgtggccag ccaggttaca
1681 accgccaaga agctgcgcgg tggtgttgtg ttcgtggacg aggtgcctaa aggactgacc
1741 ggcaagttgg acgcccgcaa gatccgcgag attctcatta aggccaagaa gggcggcaag
1801 atcgccgtgt aataattcta gagtcggggc ggccggccgc ttcgagcaga catgataaga
1861 tacattgatg agtttggaca aaccacaact agaatgcagt gaaaaaaatg ctttatttgt
1921 gaaatttgtg atgctattgc tttatttgta accattataa gctgcaataa acaagttaac
1981 aacaacaatt gcattcattt tatgtttcag gttcaggggg aggtgtggga ggttttttaa
2041 agcaagtaaa acctctacaa atgtggtaaa atcgataagg atccgtttgc gtattgggcg
2101 ctcttccgct gatctgcgca gcaccatggc ctgaaataac ctctgaaaga ggaacttggt
2161 tagctacctt ctgaggcgga aagaaccagc tgtggaatgt gtgtcagtta gggtgtggaa
2221 agtccccagg ctccccagca ggcagaagta tgcaaagcat gcatctcaat tagtcagcaa
2281 ccaggtgtgg aaagtcccca ggctccccag caggcagaag tatgcaaagc atgcatctca
2341 attagtcagc aaccatagtc ccgcccctaa ctccgcccat cccgccccta actccgccca
2401 gttccgccca ttctccgccc catggctgac taattttttt tatttatgca gaggccgagg
2461 ccgcctctgc ctctgagcta ttccagaagt agtgaggagg cttttttgga ggcctaggct
2521 tttgcaaaaa gctcgattct tctgacacta gcgccaccat gatcgaacaa gacggcctcc
2581 atgctggcag tcccgcagct tgggtcgaac gcttgttcgg gtacgactgg gcccagcaga
2641 ccatcggatg tagcgatgcg gccgtgttcc gtctaagcgc tcaaggccgg cccgtgctgt
2701 tcgtgaagac cgacctgagc ggcgccctga acgagcttca agacgaggct gcccgcctga
2761 gctggctggc caccaccggc gtaccctgcg ccgctgtgtt ggatgttgtg accgaagccg
2821 gccgggactg gctgctgctg ggcgaggtcc ctggccagga tctgctgagc agccaccttg
2881 cccccgctga gaaggtttct atcatggccg atgcaatgcg gcgcctgcac accctggacc
2941 ccgctacctg ccccttcgac caccaggcta agcatcggat cgagcgtgct cggacccgca
3001 tggaggccgg cctggtggac caggacgacc tggacgagga gcatcagggc ctggcccccg
3061 ctgaactgtt cgcccgactg aaagcccgca tgccggacgg tgaggacctg gttgtcacac
3121 acggagatgc ctgcctccct aacatcatgg tcgagaatgg ccgcttctcc ggcttcatcg
3181 actgcggtcg cctaggagtt gccgaccgct accaggacat cgccctggcc acccgcgaca
3241 tcgctgagga gcttggcggc gagtgggccg accgcttctt agtcttgtac ggcatcgcag
3301 ctcccgacag ccagcgcatc gccttctacc gcttgctcga cgagttcttt taatgatcta
3361 gaaccggtca tggccgcaat aaaatatctt tattttcatt acatctgtgt gttggttttt
3421 tgtgtgttcg aactagatgc tgtcgaccga tgcccttgag agccttcaac ccagtcagct
3481 ccttccggtg ggcgcggggc atgactatcg tcgccgcact tatgactgtc ttctttatca
3541 tgcaactcgt aggacaggtg ccggcagcgc tcttccgctt cctcgctcac tgactcgctg
3601 cgctcggtcg ttcggctgcg gcgagcggta tcagctcact caaaggcggt aatacggtta
3661 tccacagaat caggggataa cgcaggaaag aacatgtgag caaaaggcca gcaaaaggcc
3721 aggaaccgta aaaaggccgc gttgctggcg tttttccata ggctccgccc ccctgacgag
3781 catcacaaaa atcgacgctc aagtcagagg tggcgaaacc cgacaggact ataaagatac
3841 caggcgtttc cccctggaag ctccctcgtg cgctctcctg ttccgaccct gccgcttacc
3901 ggatacctgt ccgcctttct cccttcggga agcgtggcgc tttctcatag ctcacgctgt
3961 aggtatctca gttcggtgta ggtcgttcgc tccaagctgg gctgtgtgca cgaacccccc
4021 gttcagcccg accgctgcgc cttatccggt aactatcgtc ttgagtccaa cccggtaaga
4081 cacgacttat cgccactggc agcagccact ggtaacagga ttagcagagc gaggtatgta
4141 ggcggtgcta cagagttctt gaagtggtgg cctaactacg gctacactag aagaacagta
4201 tttggtatct gcgctctgct gaagccagtt accttcggaa aaagagttgg tagctcttga
4261 tccggcaaac aaaccaccgc tggtagcggt ggtttttttg tttgcaagca gcagattacg
4321 cgcagaaaaa aaggatctca agaagatcct ttgatctttt ctacggggtc tgacgctcag
4381 tggaacgaaa actcacgtta agggattttg gtcatgagat tatcaaaaag gatcttcacc
4441 tagatccttt taaattaaaa atgaagtttt aaatcaatct aaagtatata tgagtaaact
4501 tggtctgaca gcggccgcaa atgctaaacc actgcagtgg ttaccagtgc ttgatcagtg
4561 aggcaccgat ctcagcgatc tgcctatttc gttcgtccat agtggcctga ctccccgtcg
4621 tgtagatcac tacgattcgt gagggcttac catcaggccc cagcgcagca atgatgccgc
4681 gagagccgcg ttcaccggcc cccgatttgt cagcaatgaa ccagccagca gggagggccg
4741 agcgaagaag tggtcctgct actttgtccg cctccatcca gtctatgagc tgctgtcgtg
4801 atgctagagt aagaagttcg ccagtgagta gtttccgaag agttgtggcc attgctactg
4861 gcatcgtggt atcacgctcg tcgttcggta tggcttcgtt caactctggt tcccagcggt
4921 caagccgggt cacatgatca cccatattat gaagaaatgc agtcagctcc ttagggcctc
4981 cgatcgttgt cagaagtaag ttggccgcgg tgttgtcgct catggtaatg gcagcactac
5041 acaattctct taccgtcatg ccatccgtaa gatgcttttc cgtgaccggc gagtactcaa
5101 ccaagtcgtt ttgtgagtag tgtatacggc gaccaagctg ctcttgcccg gcgtctatac
5161 gggacaacac cgcgccacat agcagtactt tgaaagtgct catcatcggg aatcgttctt
5221 cggggcggaa agactcaagg atcttgccgc tattgagatc cagttcgata tagcccactc
5281 ttgcacccag ttgatcttca gcatctttta ctttcaccag cgtttcgggg tgtgcaaaaa
5341 caggcaagca aaatgccgca aagaagggaa tgagtgcgac acgaaaatgt tggatgctca
5401 tactcgtcct ttttcaatat tattgaagca tttatcaggg ttactagtac gtctctcaag
5461 gataagtaag taatattaag gtacgggagg tattggacag gccgcaataa aatatcttta
5521 ttttcattac atctgtgtgt tggttttttg tgtgaatcga tagtactaac atacgctctc
5581 catcaaaaca aaacgaaaca aaacaaacta gcaaaatagg ctgtccccag tgcaagtgca
5641 ggtgccagaa catttctct
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P3385/pCMV-SPORT6-NCAPH2(多了一小段)人源基因质粒 |
| P3386/pCMV-SPORT6-SNX2人源基因质粒 |
| P3387/pCMV-SPORT6-PPP1R7人源基因质粒 |
| P3388/pCMV-SPORT6-ACTB人源基因质粒 |
| P3389/pCMV-SPORT6-GATA3人源基因质粒 |
| P3390/pCMV-SPORT6-TIMP1(1同义突变)人源基因质粒 |
| P3391/pCMV-SPORT6-BRAF(2同义突变)人源基因质粒 |
| P3392/pCMV-SPORT6-MAGEA12人源基因质粒 |
| P3393/pCMV-SPORT6-ODR4人源基因质粒 |
| P3394/pCMV-SPORT6-FNDC11人源基因质粒 |
| P3395/pCMV-SPORT6-AURKA(1点突变)人源基因质粒 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验为负,所以只有韧皮部汁液可以从这种切口中获得。 ( 6 ) 要牢记从切断的茎的有茎叶一侧取得韧皮部汁液,从另一侧(有根一侧)取得木质部汁液。 ( 7 ) 因为韧皮部汁液通常含有髙浓度蛋白酶抑制剂,所以不需要加入化学蛋白酶抑制药剂。 ( 8 ) 完成沉淀步骤后,检查蛋白质组成(如通过用 1- DE 分析蛋白质沉淀的组成)是很重要的。因为不单是 PP1 和 PP2,其他的蛋白质也会在这个过程中被沉淀。 ( 9 ) 不要延长沉淀的时间,延长时间会使蛋白质变成不溶
,Ag,BCAP,Syk,Lyn,GPCR,TSC1,TSC2,Gβγ,GαGTP,PP2A,PHLPP,CTMP,PDCD4,4E-BP1,ATG13,mTORC1,TSC1,TSC2,PRAS40,XIAP,FoxO1,Bim,Bcl-2,Bax,MDM2,p53,Bax,Bad,14-3-3,Wee1,Myt1,p27Kip1,p21Waf1/Cip1,CyclinD1,GSK-3,GS,Bcl-2,mTORC2,LaminA,Tpl2,IKKα,eNOS,GABAAR,Huntingtin
4 月 11 日 丁香实验资讯早报①《Neuron》摆脱坏情绪!科学家发现了一个关键的新神经通路加州大学欧文分校的研究人员首次发现导致创伤后应激障碍(PTSD)的关键神经通路不平衡,该通路可以解释一些人是如何重新激活消极情绪记忆的。这项研究发表于《Neuron》杂志。几十年来,科学家们一直把情感记忆视作一把双刃剑:有些事整体令人难忘,但事件的细节往往是模糊的。缺乏详细的记忆可能导致负面情绪的错误重激活。例如,有人被狗咬了,Ta可能会对各种品种,无论大小的狗都感到焦虑。理解情绪记忆的本质对治疗











