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- 详细信息
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-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pET23b
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pET-23b大肠表达质粒
别称: pET23b
质粒属性
质粒简介
pET-23b质粒是一种原核表达载体，N端含有一个T7标签、C端的6×His标签。该质粒含有多个常用的酶切位点，便于不同基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。
pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能最强大的系统，也是现今原核表达方面使用最广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下，可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。
The pET-23a-d(+) vectors carry an N-terminal T7•Tag® sequence plus an optional C-terminal His•Tag® sequence. These vectors differ from pET-21a-d(+) by the “plain” T7 promoter instead of the T7lac promoter and by the absence of the lacI gene. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circular map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using the T7 terminator primer.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3665 bp ds-DNA circular SYN 14-JUN-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS pET-23b
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 3665)
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Wednesday, June 14, 2017 from miaoling plasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3665
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin 12..467
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 494..598
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 599..1459
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 1630..2218
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number colE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2648..2839)
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein"
/note="rop"
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
promoter 3348..3366
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
CDS 3428..3460
/codon_start=1
/product="leader peptide from bacteriophage T7 gene 10"
/note="T7 tag (gene 10 leader)"
/note="promotes efficient translation in E. coli"
/translation="MASMTGGQQMG"
CDS 3509..3526
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
terminator 3593..3640
/note="T7 terminator"
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
ORIGIN
1 tggcgaatgg gacgcgccct gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg tggttacgcg
61 cagcgtgacc gctacacttg ccagcgccct agcgcccgct cctttcgctt tcttcccttc
121 ctttctcgcc acgttcgccg gctttccccg tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg
181 gttccgattt agtgctttac ggcacctcga ccccaaaaaa cttgattagg gtgatggttc
241 acgtagtggg ccatcgccct gatagacggt ttttcgccct ttgacgttgg agtccacgtt
301 ctttaatagt ggactcttgt tccaaactgg aacaacactc aaccctatct cggtctattc
361 ttttgattta taagggattt tgccgatttc ggcctattgg ttaaaaaatg agctgattta
421 acaaaaattt aacgcgaatt ttaacaaaat attaacgttt acaatttcag gtggcacttt
481 tcggggaaat gtgcgcggaa cccctatttg tttatttttc taaatacatt caaatatgta
541 tccgctcatg agacaataac cctgataaat gcttcaataa tattgaaaaa ggaagagtat
601 gagtattcaa catttccgtg tcgcccttat tccctttttt gcggcatttt gccttcctgt
661 ttttgctcac ccagaaacgc tggtgaaagt aaaagatgct gaagatcagt tgggtgcacg
721 agtgggttac atcgaactgg atctcaacag cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga
781 agaacgtttt ccaatgatga gcacttttaa agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg
841 tattgacgcc gggcaagagc aactcggtcg ccgcatacac tattctcaga atgacttggt
901 tgagtactca ccagtcacag aaaagcatct tacggatggc atgacagtaa gagaattatg
961 cagtgctgcc ataaccatga gtgataacac tgcggccaac ttacttctga caacgatcgg
1021 aggaccgaag gagctaaccg cttttttgca caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga
1081 tcgttgggaa ccggagctga atgaagccat accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc
1141 tgcagcaatg gcaacaacgt tgcgcaaact attaactggc gaactactta ctctagcttc
1201 ccggcaacaa ttaatagact ggatggaggc ggataaagtt gcaggaccac ttctgcgctc
1261 ggcccttccg gctggctggt ttattgctga taaatctgga gccggtgagc gtgggtctcg
1321 cggtatcatt gcagcactgg ggccagatgg taagccctcc cgtatcgtag ttatctacac
1381 gacggggagt caggcaacta tggatgaacg aaatagacag atcgctgaga taggtgcctc
1441 actgattaag cattggtaac tgtcagacca agtttactca tatatacttt agattgattt
1501 aaaacttcat ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac
1561 caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa
1621 aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc
1681 accgctacca gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt
1741 aactggcttc agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt ctagtgtagc cgtagttagg
1801 ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc
1861 agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt
1921 accggataag gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga
1981 gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag ctatgagaaa gcgccacgct
2041 tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg
2101 cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca
2161 cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa
2221 cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc tggccttttg ctcacatgtt
2281 ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga
2341 taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga
2401 gcgcctgatg cggtattttc tccttacgca tctgtgcggt atttcacacc gcatatatgg
2461 tgcactctca gtacaatctg ctctgatgcc gcatagttaa gccagtatac actccgctat
2521 cgctacgtga ctgggtcatg gctgcgcccc gacacccgcc aacacccgct gacgcgccct
2581 gacgggcttg tctgctcccg gcatccgctt acagacaagc tgtgaccgtc tccgggagct
2641 gcatgtgtca gaggttttca ccgtcatcac cgaaacgcgc gaggcagctg cggtaaagct
2701 catcagcgtg gtcgtgaagc gattcacaga tgtctgcctg ttcatccgcg tccagctcgt
2761 tgagtttctc cagaagcgtt aatgtctggc ttctgataaa gcgggccatg ttaagggcgg
2821 ttttttcctg tttggtcact gatgcctccg tgtaaggggg atttctgttc atgggggtaa
2881 tgataccgat gaaacgagag aggatgctca cgatacgggt tactgatgat gaacatgccc
2941 ggttactgga acgttgtgag ggtaaacaac tggcggtatg gatgcggcgg gaccagagaa
3001 aaatcactca gggtcaatgc cagcgcttcg ttaatacaga tgtaggtgtt ccacagggta
3061 gccagcagca tcctgcgatg cagatccgga acataatggt gcagggcgct gacttccgcg
3121 tttccagact ttacgaaaca cggaaaccga agaccattca tgttgttgct caggtcgcag
3181 acgttttgca gcagcagtcg cttcacgttc gctcgcgtat cggtgattca ttctgctaac
3241 cagtaaggca accccgccag cctagccggg tcctcaacga caggagcacg atcatgcgca
3301 cccgtggcca ggacccaacg ctgcccgaga tctcgatccc gcgaaattaa tacgactcac
3361 tatagggaga ccacaacggt ttccctctag aaataatttt gtttaacttt aagaaggaga
3421 tatacatatg gctagcatga ctggtggaca gcaaatgggt cgggatccga attcgagctc
3481 cgtcgacaag cttgcggccg cactcgagca ccaccaccac caccactgag atccggctgc
3541 taacaaagcc cgaaaggaag ctgagttggc tgctgccacc gctgagcaat aactagcata
3601 accccttggg gcctctaaac gggtcttgag gggttttttg ctgaaaggag gaactatatc
3661 cggat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pET-23b大肠表达质粒
别称: pET23b
| 启动子: | T7 |
|---|---|
| 复制子: | pBR322 |
| 终止子: | T7 terminator |
| 质粒分类: | 大肠系列质粒；大肠表达质粒；pET系列质粒 |
| 质粒大小: | 3665bp |
| 质粒标签: | N-T7,C-6×His |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | BL21(DE3)等大肠杆菌 |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 诱导方式: | 无需诱导 |
| 5'测序引物: | T7（TAATACGACTCACTATAGGG） |
| 3'测序引物: | T7-ter（TGCTAGTTATTGCTCAGCGG） |
| 备注: | 组成型表达 |
质粒属性
| 载体宿主： | 大肠杆菌 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达,分泌表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pET-23b质粒是一种原核表达载体，N端含有一个T7标签、C端的6×His标签。该质粒含有多个常用的酶切位点，便于不同基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。
pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能最强大的系统，也是现今原核表达方面使用最广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下，可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。
The pET-23a-d(+) vectors carry an N-terminal T7•Tag® sequence plus an optional C-terminal His•Tag® sequence. These vectors differ from pET-21a-d(+) by the “plain” T7 promoter instead of the T7lac promoter and by the absence of the lacI gene. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circular map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using the T7 terminator primer.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3665 bp ds-DNA circular SYN 14-JUN-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS pET-23b
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 3665)
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Wednesday, June 14, 2017 from miaoling plasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3665
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin 12..467
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 494..598
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 599..1459
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
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/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
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/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number colE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2648..2839)
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/gene="rop"
/product="Rop protein"
/note="rop"
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
promoter 3348..3366
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
CDS 3428..3460
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/product="leader peptide from bacteriophage T7 gene 10"
/note="T7 tag (gene 10 leader)"
/note="promotes efficient translation in E. coli"
/translation="MASMTGGQQMG"
CDS 3509..3526
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/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
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/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
ORIGIN
1 tggcgaatgg gacgcgccct gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg tggttacgcg
61 cagcgtgacc gctacacttg ccagcgccct agcgcccgct cctttcgctt tcttcccttc
121 ctttctcgcc acgttcgccg gctttccccg tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg
181 gttccgattt agtgctttac ggcacctcga ccccaaaaaa cttgattagg gtgatggttc
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781 agaacgtttt ccaatgatga gcacttttaa agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg
841 tattgacgcc gggcaagagc aactcggtcg ccgcatacac tattctcaga atgacttggt
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1381 gacggggagt caggcaacta tggatgaacg aaatagacag atcgctgaga taggtgcctc
1441 actgattaag cattggtaac tgtcagacca agtttactca tatatacttt agattgattt
1501 aaaacttcat ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac
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1621 aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc
1681 accgctacca gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt
1741 aactggcttc agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt ctagtgtagc cgtagttagg
1801 ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc
1861 agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt
1921 accggataag gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga
1981 gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag ctatgagaaa gcgccacgct
2041 tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg
2101 cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca
2161 cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa
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2341 taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga
2401 gcgcctgatg cggtattttc tccttacgca tctgtgcggt atttcacacc gcatatatgg
2461 tgcactctca gtacaatctg ctctgatgcc gcatagttaa gccagtatac actccgctat
2521 cgctacgtga ctgggtcatg gctgcgcccc gacacccgcc aacacccgct gacgcgccct
2581 gacgggcttg tctgctcccg gcatccgctt acagacaagc tgtgaccgtc tccgggagct
2641 gcatgtgtca gaggttttca ccgtcatcac cgaaacgcgc gaggcagctg cggtaaagct
2701 catcagcgtg gtcgtgaagc gattcacaga tgtctgcctg ttcatccgcg tccagctcgt
2761 tgagtttctc cagaagcgtt aatgtctggc ttctgataaa gcgggccatg ttaagggcgg
2821 ttttttcctg tttggtcact gatgcctccg tgtaaggggg atttctgttc atgggggtaa
2881 tgataccgat gaaacgagag aggatgctca cgatacgggt tactgatgat gaacatgccc
2941 ggttactgga acgttgtgag ggtaaacaac tggcggtatg gatgcggcgg gaccagagaa
3001 aaatcactca gggtcaatgc cagcgcttcg ttaatacaga tgtaggtgtt ccacagggta
3061 gccagcagca tcctgcgatg cagatccgga acataatggt gcagggcgct gacttccgcg
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3181 acgttttgca gcagcagtcg cttcacgttc gctcgcgtat cggtgattca ttctgctaac
3241 cagtaaggca accccgccag cctagccggg tcctcaacga caggagcacg atcatgcgca
3301 cccgtggcca ggacccaacg ctgcccgaga tctcgatccc gcgaaattaa tacgactcac
3361 tatagggaga ccacaacggt ttccctctag aaataatttt gtttaacttt aagaaggaga
3421 tatacatatg gctagcatga ctggtggaca gcaaatgggt cgggatccga attcgagctc
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3541 taacaaagcc cgaaaggaag ctgagttggc tgctgccacc gctgagcaat aactagcata
3601 accccttggg gcctctaaac gggtcttgag gggttttttg ctgaaaggag gaactatatc
3661 cggat
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2675/pENTR223-HK1人源基因质粒 |
| P2676/pENTR223-MKX-G31T-G32C-C852T人源基因质粒 |
| P2677/pENTR223-MBOAT2-C674A人源基因质粒 |
| P2678/pENTR223-MTUS2-A26G-C1039G人源基因质粒 |
| P2679/pENTR223-EIF3H-G6A-A1047人源基因质粒 |
| P2680/pENTR223-SETMAR（N端有缺失）人源基因质粒 |
| P2681/pENTR223-GMPPB人源基因质粒 |
| P2682/pENTR223-TRUB1人源基因质粒 |
| P2683/pENTR223-CHST11-C1045T-A1055C人源基因质粒 |
| P2684/pENTR223-UROD-G908T人源基因质粒 |
| P2685/pENTR223-RAD51AP1人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
晚上每天都有人做报告，我觉得让我收获最大的是Bill Studier的报告。本来这个报告是后来才听到的，但是由于Burgess的模块是唯一的涉及大肠杆菌中表达蛋白的，我把这一段提前来说说。Studier这老哥是Brookhaven National Laboratory的，一生研究T7噬菌体，也是T7 RNA polymerase induction system（pET系列质粒）的发明者。 T7系统在大肠杆菌表达蛋白的应用实在太广泛了，但凡表达蛋白的兄弟姐妹们的不可能不知道这个系统
-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
其分子间作用力呈显著下降趋势。 在计算机模拟和蛋白质分子设计的基础上，以野生型TFPI基因为模板，用PCR方法引入突变，构建表达质粒pET―28a(+)―TFPI―Mutl和pET―28a(+)―TFPI―Mut4。然后参照野生型TFPI的基因表达、蛋白质复性及纯化方式，用大肠杆菌制备重组的TFPI―Mutl和TFPI―Mut4。试验证实TFPI―Mutl和TFPI―Mut4保持了与TFPI基本相当的抗凝活性，而且半衰期较TFPl分别延长1．62和4．22倍。
pET-23b大肠表达质粒
￥100 - 1000
