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- 上海
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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pGEX6P1;pGEX6P-1
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pGEX-6P-1大肠表达质粒
别称: pGEX6P1;pGEX6P-1
质粒属性
质粒简介
There are a range of Gluthatione Sepharose™ prepacked column and bulk media products available to purify GST Fusion proteins. For manual purification of sample volumes up to 600 μl use GST SpinTrap™ microspin columns or GST MultiTrap™ 4B 96-well plates. For sample volumes between 600 μl and 10 ml use GST GraviTrap™ gravity flow column. Where sample volumes are above 10 ml, use LabMate™ reservoir together with GST GraviTrap. All formats described can be used for preparation of samples in parallel. In addition GST HiTrap™ 1 and 5 ml columns and GST HiPrep™ FF 16/10 column are available for purification in a chromatography system such as the ÄKTA™ design system. Alternatively, Gluthatione Sepharose bulk media are available from 10 ml up to 500 ml. A GST Bulk Kit is also available combining 10 ml Gluthatione Sepharose 4B bulk medium and 5 empty gravity flow columns with required buffers. For simplified buffer preparation use the GST Buffer Kit. Ordering information for all associated products is listed below.
其余类似载体：
pGEX-2T大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0649.html
pGEX-4T-1大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0001.html
pGEX-4T-2大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0002.html
pGEX-4T-3大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0003.html
pGEX-5X-1大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0692.html
pGEX-5X-3大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0004.html
pGEX-6P-1大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0005.html
pGEX-6P-2大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0006.html
pGEX-6P-3大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P1317.html
pGEX-KG大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0007.html
质粒图谱
质粒序列
LOCUS pGEX-6P-1 4984 bp DNA circular SYN
DEFINITION pGEX-6P-1
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4984
/organism="pGEX-6P-1"
/mol_type="other DNA"
promoter 184..212
/label="tac_promoter"
misc_feature 224..246
/label="M13_pUC_rev_primer"
gene 258..992
/label="GST"
/gene="GST"
CDS 258..992
/label="ORF frame 3"
misc_feature 918..938
/label="precision"
misc_feature complement(1034..1056)
/label="pGEX_3_primer"
promoter 1322..1350
/label="AmpR_promoter"
gene 1392..2252
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
CDS 1392..2252
/label="ORF frame 3"
rep_origin 2407..3026
/label="pBR322_origin"
misc_feature 3324..4415
/label="lacI"
CDS 3456..4415
/label="ORF frame 3"
promoter 4464..4493
/label="lac_promoter"
misc_feature 4507..4529
/label="M13_pUC_rev_primer"
promoter 4528..4546
/label="M13_reverse_primer"
CDS 4538..81
/label="ORF frame 2"
misc_feature 4555..4710
/label="lacZ_a"
promoter complement(4558..4574)
/label="M13_forward20_primer"
misc_feature complement(4567..4589)
/label="M13_pUC_fwd_primer"
ORIGIN
1 ACGTTATCGA CTGCACGGTG CACCAATGCT TCTGGCGTCA GGCAGCCATC GGAAGCTGTG
61 GTATGGCTGT GCAGGTCGTA AATCACTGCA TAATTCGTGT CGCTCAAGGC GCACTCCCGT
121 TCTGGATAAT GTTTTTTGCG CCGACATCAT AACGGTTCTG GCAAATATTC TGAAATGAGC
181 TGTTGACAAT TAATCATCGG CTCGTATAAT GTGTGGAATT GTGAGCGGAT AACAATTTCA
241 CACAGGAAAC AGTATTCATG TCCCCTATAC TAGGTTATTG GAAAATTAAG GGCCTTGTGC
301 AACCCACTCG ACTTCTTTTG GAATATCTTG AAGAAAAATA TGAAGAGCAT TTGTATGAGC
361 GCGATGAAGG TGATAAATGG CGAAACAAAA AGTTTGAATT GGGTTTGGAG TTTCCCAATC
421 TTCCTTATTA TATTGATGGT GATGTTAAAT TAACACAGTC TATGGCCATC ATACGTTATA
481 TAGCTGACAA GCACAACATG TTGGGTGGTT GTCCAAAAGA GCGTGCAGAG ATTTCAATGC
541 TTGAAGGAGC GGTTTTGGAT ATTAGATACG GTGTTTCGAG AATTGCATAT AGTAAAGACT
601 TTGAAACTCT CAAAGTTGAT TTTCTTAGCA AGCTACCTGA AATGCTGAAA ATGTTCGAAG
661 ATCGTTTATG TCATAAAACA TATTTAAATG GTGATCATGT AACCCATCCT GACTTCATGT
721 TGTATGACGC TCTTGATGTT GTTTTATACA TGGACCCAAT GTGCCTGGAT GCGTTCCCAA
781 AATTAGTTTG TTTTAAAAAA CGTATTGAAG CTATCCCACA AATTGATAAG TACTTGAAAT
841 CCAGCAAGTA TATAGCATGG CCTTTGCAGG GCTGGCAAGC CACGTTTGGT GGTGGCGACC
901 ATCCTCCAAA ATCGGATCTG GAAGTTCTGT TCCAGGGGCC CCTGGGATCC CCGGAATTCC
961 CGGGTCGACT CGAGCGGCCG CATCGTGACT GACTGACGAT CTGCCTCGCG CGTTTCGGTG
1021 ATGACGGTGA AAACCTCTGA CACATGCAGC TCCCGGAGAC GGTCACAGCT TGTCTGTAAG
1081 CGGATGCCGG GAGCAGACAA GCCCGTCAGG GCGCGTCAGC GGGTGTTGGC GGGTGTCGGG
1141 GCGCAGCCAT GACCCAGTCA CGTAGCGATA GCGGAGTGTA TAATTCTTGA AGACGAAAGG
1201 GCCTCGTGAT ACGCCTATTT TTATAGGTTA ATGTCATGAT AATAATGGTT TCTTAGACGT
1261 CAGGTGGCAC TTTTCGGGGA AATGTGCGCG GAACCCCTAT TTGTTTATTT TTCTAAATAC
1321 ATTCAAATAT GTATCCGCTC ATGAGACAAT AACCCTGATA AATGCTTCAA TAATATTGAA
1381 AAAGGAAGAG TATGAGTATT CAACATTTCC GTGTCGCCCT TATTCCCTTT TTTGCGGCAT
1441 TTTGCCTTCC TGTTTTTGCT CACCCAGAAA CGCTGGTGAA AGTAAAAGAT GCTGAAGATC
1501 AGTTGGGTGC ACGAGTGGGT TACATCGAAC TGGATCTCAA CAGCGGTAAG ATCCTTGAGA
1561 GTTTTCGCCC CGAAGAACGT TTTCCAATGA TGAGCACTTT TAAAGTTCTG CTATGTGGCG
1621 CGGTATTATC CCGTGTTGAC GCCGGGCAAG AGCAACTCGG TCGCCGCATA CACTATTCTC
1681 AGAATGACTT GGTTGAGTAC TCACCAGTCA CAGAAAAGCA TCTTACGGAT GGCATGACAG
1741 TAAGAGAATT ATGCAGTGCT GCCATAACCA TGAGTGATAA CACTGCGGCC AACTTACTTC
1801 TGACAACGAT CGGAGGACCG AAGGAGCTAA CCGCTTTTTT GCACAACATG GGGGATCATG
1861 TAACTCGCCT TGATCGTTGG GAACCGGAGC TGAATGAAGC CATACCAAAC GACGAGCGTG
1921 ACACCACGAT GCCTGCAGCA ATGGCAACAA CGTTGCGCAA ACTATTAACT GGCGAACTAC
1981 TTACTCTAGC TTCCCGGCAA CAATTAATAG ACTGGATGGA GGCGGATAAA GTTGCAGGAC
2041 CACTTCTGCG CTCGGCCCTT CCGGCTGGCT GGTTTATTGC TGATAAATCT GGAGCCGGTG
2101 AGCGTGGGTC TCGCGGTATC ATTGCAGCAC TGGGGCCAGA TGGTAAGCCC TCCCGTATCG
2161 TAGTTATCTA CACGACGGGG AGTCAGGCAA CTATGGATGA ACGAAATAGA CAGATCGCTG
2221 AGATAGGTGC CTCACTGATT AAGCATTGGT AACTGTCAGA CCAAGTTTAC TCATATATAC
2281 TTTAGATTGA TTTAAAACTT CATTTTTAAT TTAAAAGGAT CTAGGTGAAG ATCCTTTTTG
2341 ATAATCTCAT GACCAAAATC CCTTAACGTG AGTTTTCGTT CCACTGAGCG TCAGACCCCG
2401 TAGAAAAGAT CAAAGGATCT TCTTGAGATC CTTTTTTTCT GCGCGTAATC TGCTGCTTGC
2461 AAACAAAAAA ACCACCGCTA CCAGCGGTGG TTTGTTTGCC GGATCAAGAG CTACCAACTC
2521 TTTTTCCGAA GGTAACTGGC TTCAGCAGAG CGCAGATACC AAATACTGTC CTTCTAGTGT
2581 AGCCGTAGTT AGGCCACCAC TTCAAGAACT CTGTAGCACC GCCTACATAC CTCGCTCTGC
2641 TAATCCTGTT ACCAGTGGCT GCTGCCAGTG GCGATAAGTC GTGTCTTACC GGGTTGGACT
2701 CAAGACGATA GTTACCGGAT AAGGCGCAGC GGTCGGGCTG AACGGGGGGT TCGTGCACAC
2761 AGCCCAGCTT GGAGCGAACG ACCTACACCG AACTGAGATA CCTACAGCGT GAGCTATGAG
2821 AAAGCGCCAC GCTTCCCGAA GGGAGAAAGG CGGACAGGTA TCCGGTAAGC GGCAGGGTCG
2881 GAACAGGAGA GCGCACGAGG GAGCTTCCAG GGGGAAACGC CTGGTATCTT TATAGTCCTG
2941 TCGGGTTTCG CCACCTCTGA CTTGAGCGTC GATTTTTGTG ATGCTCGTCA GGGGGGCGGA
3001 GCCTATGGAA AAACGCCAGC AACGCGGCCT TTTTACGGTT CCTGGCCTTT TGCTGGCCTT
3061 TTGCTCACAT GTTCTTTCCT GCGTTATCCC CTGATTCTGT GGATAACCGT ATTACCGCCT
3121 TTGAGTGAGC TGATACCGCT CGCCGCAGCC GAACGACCGA GCGCAGCGAG TCAGTGAGCG
3181 AGGAAGCGGA AGAGCGCCTG ATGCGGTATT TTCTCCTTAC GCATCTGTGC GGTATTTCAC
3241 ACCGCATAAA TTCCGACACC ATCGAATGGT GCAAAACCTT TCGCGGTATG GCATGATAGC
3301 GCCCGGAAGA GAGTCAATTC AGGGTGGTGA ATGTGAAACC AGTAACGTTA TACGATGTCG
3361 CAGAGTATGC CGGTGTCTCT TATCAGACCG TTTCCCGCGT GGTGAACCAG GCCAGCCACG
3421 TTTCTGCGAA AACGCGGGAA AAAGTGGAAG CGGCGATGGC GGAGCTGAAT TACATTCCCA
3481 ACCGCGTGGC ACAACAACTG GCGGGCAAAC AGTCGTTGCT GATTGGCGTT GCCACCTCCA
3541 GTCTGGCCCT GCACGCGCCG TCGCAAATTG TCGCGGCGAT TAAATCTCGC GCCGATCAAC
3601 TGGGTGCCAG CGTGGTGGTG TCGATGGTAG AACGAAGCGG CGTCGAAGCC TGTAAAGCGG
3661 CGGTGCACAA TCTTCTCGCG CAACGCGTCA GTGGGCTGAT CATTAACTAT CCGCTGGATG
3721 ACCAGGATGC CATTGCTGTG GAAGCTGCCT GCACTAATGT TCCGGCGTTA TTTCTTGATG
3781 TCTCTGACCA GACACCCATC AACAGTATTA TTTTCTCCCA TGAAGACGGT ACGCGACTGG
3841 GCGTGGAGCA TCTGGTCGCA TTGGGTCACC AGCAAATCGC GCTGTTAGCG GGCCCATTAA
3901 GTTCTGTCTC GGCGCGTCTG CGTCTGGCTG GCTGGCATAA ATATCTCACT CGCAATCAAA
3961 TTCAGCCGAT AGCGGAACGG GAAGGCGACT GGAGTGCCAT GTCCGGTTTT CAACAAACCA
4021 TGCAAATGCT GAATGAGGGC ATCGTTCCCA CTGCGATGCT GGTTGCCAAC GATCAGATGG
4081 CGCTGGGCGC AATGCGCGCC ATTACCGAGT CCGGGCTGCG CGTTGGTGCG GATATCTCGG
4141 TAGTGGGATA CGACGATACC GAAGACAGCT CATGTTATAT CCCGCCGTCA ACCACCATCA
4201 AACAGGATTT TCGCCTGCTG GGGCAAACCA GCGTGGACCG CTTGCTGCAA CTCTCTCAGG
4261 GCCAGGCGGT GAAGGGCAAT CAGCTGTTGC CCGTCTCACT GGTGAAAAGA AAAACCACCC
4321 TGGCGCCCAA TACGCAAACC GCCTCTCCCC GCGCGTTGGC CGATTCATTA ATGCAGCTGG
4381 CACGACAGGT TTCCCGACTG GAAAGCGGGC AGTGAGCGCA ACGCAATTAA TGTGAGTTAG
4441 CTCACTCATT AGGCACCCCA GGCTTTACAC TTTATGCTTC CGGCTCGTAT GTTGTGTGGA
4501 ATTGTGAGCG GATAACAATT TCACACAGGA AACAGCTATG ACCATGATTA CGGATTCACT
4561 GGCCGTCGTT TTACAACGTC GTGACTGGGA AAACCCTGGC GTTACCCAAC TTAATCGCCT
4621 TGCAGCACAT CCCCCTTTCG CCAGCTGGCG TAATAGCGAA GAGGCCCGCA CCGATCGCCC
4681 TTCCCAACAG TTGCGCAGCC TGAATGGCGA ATGGCGCTTT GCCTGGTTTC CGGCACCAGA
4741 AGCGGTGCCG GAAAGCTGGC TGGAGTGCGA TCTTCCTGAG GCCGATACTG TCGTCGTCCC
4801 CTCAAACTGG CAGATGCACG GTTACGATGC GCCCATCTAC ACCAACGTAA CCTATCCCAT
4861 TACGGTCAAT CCGCCGTTTG TTCCCACGGA GAATCCGACG GGTTGTTACT CGCTCACATT
4921 TAATGTTGAT GAAAGCTGGC TACAGGAAGG CCAGACGCGA ATTATTTTTG ATGGCGTTGG
4981 AATT
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pGEX-6P-1大肠表达质粒
别称: pGEX6P1;pGEX6P-1
| 启动子: | Tac |
|---|---|
| 复制子: | pBR322 |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体；PGEX系列表达质粒 |
| 质粒大小: | 4984bp |
| 质粒标签: | N-GST，N-PP/3C |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 大肠杆菌 |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | pGEX5: GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG |
| 3'测序引物: | pGEX3: CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG |
| 备注: | 可用GST亲和柱纯化重组蛋白 |
质粒属性
| 载体宿主： | 大肠杆菌 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
There are a range of Gluthatione Sepharose™ prepacked column and bulk media products available to purify GST Fusion proteins. For manual purification of sample volumes up to 600 μl use GST SpinTrap™ microspin columns or GST MultiTrap™ 4B 96-well plates. For sample volumes between 600 μl and 10 ml use GST GraviTrap™ gravity flow column. Where sample volumes are above 10 ml, use LabMate™ reservoir together with GST GraviTrap. All formats described can be used for preparation of samples in parallel. In addition GST HiTrap™ 1 and 5 ml columns and GST HiPrep™ FF 16/10 column are available for purification in a chromatography system such as the ÄKTA™ design system. Alternatively, Gluthatione Sepharose bulk media are available from 10 ml up to 500 ml. A GST Bulk Kit is also available combining 10 ml Gluthatione Sepharose 4B bulk medium and 5 empty gravity flow columns with required buffers. For simplified buffer preparation use the GST Buffer Kit. Ordering information for all associated products is listed below.
其余类似载体：
pGEX-2T大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0649.html
pGEX-4T-1大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0001.html
pGEX-4T-2大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0002.html
pGEX-4T-3大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0003.html
pGEX-5X-1大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0692.html
pGEX-5X-3大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0004.html
pGEX-6P-1大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0005.html
pGEX-6P-2大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0006.html
pGEX-6P-3大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P1317.html
pGEX-KG大肠表达质粒： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0007.html
质粒图谱
质粒序列
LOCUS pGEX-6P-1 4984 bp DNA circular SYN
DEFINITION pGEX-6P-1
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4984
/organism="pGEX-6P-1"
/mol_type="other DNA"
promoter 184..212
/label="tac_promoter"
misc_feature 224..246
/label="M13_pUC_rev_primer"
gene 258..992
/label="GST"
/gene="GST"
CDS 258..992
/label="ORF frame 3"
misc_feature 918..938
/label="precision"
misc_feature complement(1034..1056)
/label="pGEX_3_primer"
promoter 1322..1350
/label="AmpR_promoter"
gene 1392..2252
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
CDS 1392..2252
/label="ORF frame 3"
rep_origin 2407..3026
/label="pBR322_origin"
misc_feature 3324..4415
/label="lacI"
CDS 3456..4415
/label="ORF frame 3"
promoter 4464..4493
/label="lac_promoter"
misc_feature 4507..4529
/label="M13_pUC_rev_primer"
promoter 4528..4546
/label="M13_reverse_primer"
CDS 4538..81
/label="ORF frame 2"
misc_feature 4555..4710
/label="lacZ_a"
promoter complement(4558..4574)
/label="M13_forward20_primer"
misc_feature complement(4567..4589)
/label="M13_pUC_fwd_primer"
ORIGIN
1 ACGTTATCGA CTGCACGGTG CACCAATGCT TCTGGCGTCA GGCAGCCATC GGAAGCTGTG
61 GTATGGCTGT GCAGGTCGTA AATCACTGCA TAATTCGTGT CGCTCAAGGC GCACTCCCGT
121 TCTGGATAAT GTTTTTTGCG CCGACATCAT AACGGTTCTG GCAAATATTC TGAAATGAGC
181 TGTTGACAAT TAATCATCGG CTCGTATAAT GTGTGGAATT GTGAGCGGAT AACAATTTCA
241 CACAGGAAAC AGTATTCATG TCCCCTATAC TAGGTTATTG GAAAATTAAG GGCCTTGTGC
301 AACCCACTCG ACTTCTTTTG GAATATCTTG AAGAAAAATA TGAAGAGCAT TTGTATGAGC
361 GCGATGAAGG TGATAAATGG CGAAACAAAA AGTTTGAATT GGGTTTGGAG TTTCCCAATC
421 TTCCTTATTA TATTGATGGT GATGTTAAAT TAACACAGTC TATGGCCATC ATACGTTATA
481 TAGCTGACAA GCACAACATG TTGGGTGGTT GTCCAAAAGA GCGTGCAGAG ATTTCAATGC
541 TTGAAGGAGC GGTTTTGGAT ATTAGATACG GTGTTTCGAG AATTGCATAT AGTAAAGACT
601 TTGAAACTCT CAAAGTTGAT TTTCTTAGCA AGCTACCTGA AATGCTGAAA ATGTTCGAAG
661 ATCGTTTATG TCATAAAACA TATTTAAATG GTGATCATGT AACCCATCCT GACTTCATGT
721 TGTATGACGC TCTTGATGTT GTTTTATACA TGGACCCAAT GTGCCTGGAT GCGTTCCCAA
781 AATTAGTTTG TTTTAAAAAA CGTATTGAAG CTATCCCACA AATTGATAAG TACTTGAAAT
841 CCAGCAAGTA TATAGCATGG CCTTTGCAGG GCTGGCAAGC CACGTTTGGT GGTGGCGACC
901 ATCCTCCAAA ATCGGATCTG GAAGTTCTGT TCCAGGGGCC CCTGGGATCC CCGGAATTCC
961 CGGGTCGACT CGAGCGGCCG CATCGTGACT GACTGACGAT CTGCCTCGCG CGTTTCGGTG
1021 ATGACGGTGA AAACCTCTGA CACATGCAGC TCCCGGAGAC GGTCACAGCT TGTCTGTAAG
1081 CGGATGCCGG GAGCAGACAA GCCCGTCAGG GCGCGTCAGC GGGTGTTGGC GGGTGTCGGG
1141 GCGCAGCCAT GACCCAGTCA CGTAGCGATA GCGGAGTGTA TAATTCTTGA AGACGAAAGG
1201 GCCTCGTGAT ACGCCTATTT TTATAGGTTA ATGTCATGAT AATAATGGTT TCTTAGACGT
1261 CAGGTGGCAC TTTTCGGGGA AATGTGCGCG GAACCCCTAT TTGTTTATTT TTCTAAATAC
1321 ATTCAAATAT GTATCCGCTC ATGAGACAAT AACCCTGATA AATGCTTCAA TAATATTGAA
1381 AAAGGAAGAG TATGAGTATT CAACATTTCC GTGTCGCCCT TATTCCCTTT TTTGCGGCAT
1441 TTTGCCTTCC TGTTTTTGCT CACCCAGAAA CGCTGGTGAA AGTAAAAGAT GCTGAAGATC
1501 AGTTGGGTGC ACGAGTGGGT TACATCGAAC TGGATCTCAA CAGCGGTAAG ATCCTTGAGA
1561 GTTTTCGCCC CGAAGAACGT TTTCCAATGA TGAGCACTTT TAAAGTTCTG CTATGTGGCG
1621 CGGTATTATC CCGTGTTGAC GCCGGGCAAG AGCAACTCGG TCGCCGCATA CACTATTCTC
1681 AGAATGACTT GGTTGAGTAC TCACCAGTCA CAGAAAAGCA TCTTACGGAT GGCATGACAG
1741 TAAGAGAATT ATGCAGTGCT GCCATAACCA TGAGTGATAA CACTGCGGCC AACTTACTTC
1801 TGACAACGAT CGGAGGACCG AAGGAGCTAA CCGCTTTTTT GCACAACATG GGGGATCATG
1861 TAACTCGCCT TGATCGTTGG GAACCGGAGC TGAATGAAGC CATACCAAAC GACGAGCGTG
1921 ACACCACGAT GCCTGCAGCA ATGGCAACAA CGTTGCGCAA ACTATTAACT GGCGAACTAC
1981 TTACTCTAGC TTCCCGGCAA CAATTAATAG ACTGGATGGA GGCGGATAAA GTTGCAGGAC
2041 CACTTCTGCG CTCGGCCCTT CCGGCTGGCT GGTTTATTGC TGATAAATCT GGAGCCGGTG
2101 AGCGTGGGTC TCGCGGTATC ATTGCAGCAC TGGGGCCAGA TGGTAAGCCC TCCCGTATCG
2161 TAGTTATCTA CACGACGGGG AGTCAGGCAA CTATGGATGA ACGAAATAGA CAGATCGCTG
2221 AGATAGGTGC CTCACTGATT AAGCATTGGT AACTGTCAGA CCAAGTTTAC TCATATATAC
2281 TTTAGATTGA TTTAAAACTT CATTTTTAAT TTAAAAGGAT CTAGGTGAAG ATCCTTTTTG
2341 ATAATCTCAT GACCAAAATC CCTTAACGTG AGTTTTCGTT CCACTGAGCG TCAGACCCCG
2401 TAGAAAAGAT CAAAGGATCT TCTTGAGATC CTTTTTTTCT GCGCGTAATC TGCTGCTTGC
2461 AAACAAAAAA ACCACCGCTA CCAGCGGTGG TTTGTTTGCC GGATCAAGAG CTACCAACTC
2521 TTTTTCCGAA GGTAACTGGC TTCAGCAGAG CGCAGATACC AAATACTGTC CTTCTAGTGT
2581 AGCCGTAGTT AGGCCACCAC TTCAAGAACT CTGTAGCACC GCCTACATAC CTCGCTCTGC
2641 TAATCCTGTT ACCAGTGGCT GCTGCCAGTG GCGATAAGTC GTGTCTTACC GGGTTGGACT
2701 CAAGACGATA GTTACCGGAT AAGGCGCAGC GGTCGGGCTG AACGGGGGGT TCGTGCACAC
2761 AGCCCAGCTT GGAGCGAACG ACCTACACCG AACTGAGATA CCTACAGCGT GAGCTATGAG
2821 AAAGCGCCAC GCTTCCCGAA GGGAGAAAGG CGGACAGGTA TCCGGTAAGC GGCAGGGTCG
2881 GAACAGGAGA GCGCACGAGG GAGCTTCCAG GGGGAAACGC CTGGTATCTT TATAGTCCTG
2941 TCGGGTTTCG CCACCTCTGA CTTGAGCGTC GATTTTTGTG ATGCTCGTCA GGGGGGCGGA
3001 GCCTATGGAA AAACGCCAGC AACGCGGCCT TTTTACGGTT CCTGGCCTTT TGCTGGCCTT
3061 TTGCTCACAT GTTCTTTCCT GCGTTATCCC CTGATTCTGT GGATAACCGT ATTACCGCCT
3121 TTGAGTGAGC TGATACCGCT CGCCGCAGCC GAACGACCGA GCGCAGCGAG TCAGTGAGCG
3181 AGGAAGCGGA AGAGCGCCTG ATGCGGTATT TTCTCCTTAC GCATCTGTGC GGTATTTCAC
3241 ACCGCATAAA TTCCGACACC ATCGAATGGT GCAAAACCTT TCGCGGTATG GCATGATAGC
3301 GCCCGGAAGA GAGTCAATTC AGGGTGGTGA ATGTGAAACC AGTAACGTTA TACGATGTCG
3361 CAGAGTATGC CGGTGTCTCT TATCAGACCG TTTCCCGCGT GGTGAACCAG GCCAGCCACG
3421 TTTCTGCGAA AACGCGGGAA AAAGTGGAAG CGGCGATGGC GGAGCTGAAT TACATTCCCA
3481 ACCGCGTGGC ACAACAACTG GCGGGCAAAC AGTCGTTGCT GATTGGCGTT GCCACCTCCA
3541 GTCTGGCCCT GCACGCGCCG TCGCAAATTG TCGCGGCGAT TAAATCTCGC GCCGATCAAC
3601 TGGGTGCCAG CGTGGTGGTG TCGATGGTAG AACGAAGCGG CGTCGAAGCC TGTAAAGCGG
3661 CGGTGCACAA TCTTCTCGCG CAACGCGTCA GTGGGCTGAT CATTAACTAT CCGCTGGATG
3721 ACCAGGATGC CATTGCTGTG GAAGCTGCCT GCACTAATGT TCCGGCGTTA TTTCTTGATG
3781 TCTCTGACCA GACACCCATC AACAGTATTA TTTTCTCCCA TGAAGACGGT ACGCGACTGG
3841 GCGTGGAGCA TCTGGTCGCA TTGGGTCACC AGCAAATCGC GCTGTTAGCG GGCCCATTAA
3901 GTTCTGTCTC GGCGCGTCTG CGTCTGGCTG GCTGGCATAA ATATCTCACT CGCAATCAAA
3961 TTCAGCCGAT AGCGGAACGG GAAGGCGACT GGAGTGCCAT GTCCGGTTTT CAACAAACCA
4021 TGCAAATGCT GAATGAGGGC ATCGTTCCCA CTGCGATGCT GGTTGCCAAC GATCAGATGG
4081 CGCTGGGCGC AATGCGCGCC ATTACCGAGT CCGGGCTGCG CGTTGGTGCG GATATCTCGG
4141 TAGTGGGATA CGACGATACC GAAGACAGCT CATGTTATAT CCCGCCGTCA ACCACCATCA
4201 AACAGGATTT TCGCCTGCTG GGGCAAACCA GCGTGGACCG CTTGCTGCAA CTCTCTCAGG
4261 GCCAGGCGGT GAAGGGCAAT CAGCTGTTGC CCGTCTCACT GGTGAAAAGA AAAACCACCC
4321 TGGCGCCCAA TACGCAAACC GCCTCTCCCC GCGCGTTGGC CGATTCATTA ATGCAGCTGG
4381 CACGACAGGT TTCCCGACTG GAAAGCGGGC AGTGAGCGCA ACGCAATTAA TGTGAGTTAG
4441 CTCACTCATT AGGCACCCCA GGCTTTACAC TTTATGCTTC CGGCTCGTAT GTTGTGTGGA
4501 ATTGTGAGCG GATAACAATT TCACACAGGA AACAGCTATG ACCATGATTA CGGATTCACT
4561 GGCCGTCGTT TTACAACGTC GTGACTGGGA AAACCCTGGC GTTACCCAAC TTAATCGCCT
4621 TGCAGCACAT CCCCCTTTCG CCAGCTGGCG TAATAGCGAA GAGGCCCGCA CCGATCGCCC
4681 TTCCCAACAG TTGCGCAGCC TGAATGGCGA ATGGCGCTTT GCCTGGTTTC CGGCACCAGA
4741 AGCGGTGCCG GAAAGCTGGC TGGAGTGCGA TCTTCCTGAG GCCGATACTG TCGTCGTCCC
4801 CTCAAACTGG CAGATGCACG GTTACGATGC GCCCATCTAC ACCAACGTAA CCTATCCCAT
4861 TACGGTCAAT CCGCCGTTTG TTCCCACGGA GAATCCGACG GGTTGTTACT CGCTCACATT
4921 TAATGTTGAT GAAAGCTGGC TACAGGAAGG CCAGACGCGA ATTATTTTTG ATGGCGTTGG
4981 AATT
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2336/pENTR223-CCDC24人源基因质粒 |
| P2337/pENTR223-BAT2L人源基因质粒 |
| P2338/pENTR223-RSPH14人源基因质粒 |
| P2339/pENTR223-ABHD5人源基因质粒 |
| P2340/pENTR223-NONO人源基因质粒 |
| P2341/pENTR223-MYOZ1人源基因质粒 |
| P2342/pENTR223-STX5人源基因质粒 |
| P2343/pENTR223-GK5人源基因质粒 |
| P2344/pENTR223-PIGC人源基因质粒 |
| P2345/pENTR223-FCGR3A人源基因质粒 |
| P2346/pENTR223-ANXA8L1人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
-1,pBADHis, pBADHislacZ，pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒：pCDFduet-1 以及pCDNA3.1，pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta（DE3），Rasettagame（DE3），Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒： pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
Protease 是一种由人鼻病毒 14 型的 3C 蛋白酶和 GST 组成的融合蛋白。它可以特异性的将 pGEX-6P 系列等载体表达出的带有酶底物识别氨基酸序列融合蛋白的 GST 标签进行分离。由于其自身带有 GST 标签，Prescission Protease 能在单一步骤实现 GST 标签的柱上酶切和蛋白质纯化。此蛋白酶在低温条件下具有最佳活性，因此低温孵育不仅可以保证 GST 标签的高效去除，也能维持目标蛋白的活性。 Thrombin 和 Factor Xa 常温下具有较高的酶活，当选
步骤的。pGEX-6P有三种载体，以方便你从不同的酶切位点插入都不会造成移码突变。另外值得一提的是pGEX-2TK是专门为了体外标记融合产物以检测表达情况而设计的。它含有来自心肌的cAMP依赖性蛋白激酶催化亚单位的识别位点，这个位点位于GST和多克隆位点之间。表达的蛋白可以直接用蛋白激酶和[g-32P]ATP进行标记，产物可以用放射自显影技术稳定地检测。它的GST可以用凝血酶切除。总的说来，pGEX所有载体都提供了三种不同的翻译读码框选择；都是利用乳糖操纵子调控模式，启动子都是Ptac。Ptac是由trp启动
pGEX-6P-1大肠表达质粒
￥100 - 1000
