- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P1407
- 2025年07月11日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pET16B.Pfu
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pET16B.Pfu聚合酶基因质粒
别称: pET16B.Pfu
启动子：T7
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pET16B.Pfu质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 8033 bp ds-DNA circular SYN 26-SEP-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 8033)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sep 26, 2017 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8033
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 5..144
/label=bom
/note="basis of mobility region from pBR322"
CDS complement(246..437)
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy
number"
/label=rop
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
misc_feature complement(1749..2831)
/label=lacI
promoter complement(2832..2909)
/gene="lacI"
/label=lacI promoter
promoter 3218..3236
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
protein_bind 3237..3261
/label=lac operator
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
RBS 3276..3298
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
CDS 3311..3340
/codon_start=1
/product="10xHis affinity tag"
/label=10xHis
/translation="HHHHHHHHHH"
CDS 3353..3364
/codon_start=1
/product="Factor Xa recognition and cleavage site"
/label=Factor Xa site
/translation="IEGR"
CDS 3368..5695
/codon_start=1
/label=Pfu
/translation="MILDVDYITEEGKPVIRLFKKENGKFKIEHDRTFRPYIYALLRDD
SKIEEVKKITGERHGKIVRIVDVEKVEKKFLGKPITVWKLYLEHPQDVPTIREKVREHP
AVVDIFEYDIPFAKRYLIDKGLIPMEGEEELKILAFDIETLYHEGEEFGKGPIIMISYA
DENEAKVITWKNIDLPYVEVVSSEREMIKRFLRIIREKDPDIIVTYNGDSFDFPHLAKR
AEKLGIKLTIGRDGSEPKMQRIGDMTAVEVKGRIHFDLYHVITRTINLPTYTLEAVYEA
IFGKPKEKVYADEIAKAWESGENLERVAKYSMEDAKATYELGKEFLPMEIQLSRLVGQP
LWDVSRSSTGNLVEWFLLRKAYERNEVAPNKPSEEEYQRRLRESYTGGFVKEPEKGLWE
NIVYLDFRALYPSIIITHNVSPDTLNLEGCKNYDIAPQVGHKFCKDIPGFIPSLLGHLL
EERRKIKTKMKETQDPIEKILLDYRQKAIKLLANSFYGYYGYAKARWYCKECAESVTAW
GRKYIELVWKELEEKLGFKVLYIDTDGLYATIPGGESEEIKIKALEFVKYINSKLPGLL
ELEYEGFYKRGFFVTKKRYAVIDEEGKVITRGLEIVRRDWSEIAKETQARVLETILKHG
DVEEAVRIVKEVIQKLANYEIPPEKLAIYEQITRPLHEYKAIGPHVAAAKKLAAKGVKI
KPGMVIGYIVLRGDGPISNRAILAEEYDPKKHKYDAEYYIENQVLPAVLRILEGFGYRK
EDLRYQKTRQVGLTSWLNIKKS"
terminator 5765..5812
/label=T7 terminator
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
promoter 6128..6232
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 6233..7093
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 7264..7852
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 agcgcctgat gcggtatttt ctccttacgc atctgtgcgg tatttcacac cgcaatggtg
61 cactctcagt acaatctgct ctgatgccgc atagttaagc cagtatacac tccgctatcg
121 ctacgtgact gggtcatggc tgcgccccga cacccgccaa cacccgctga cgcgccctga
181 cgggcttgtc tgctcccggc atccgcttac agacaagctg tgaccgtctc cgggagctgc
241 atgtgtcaga ggttttcacc gtcatcaccg aaacgcgcga ggcagctgcg gtaaagctca
301 tcagcgtggt cgtgaagcga ttcacagatg tctgcctgtt catccgcgtc cagctcgttg
361 agtttctcca gaagcgttaa tgtctggctt ctgataaagc gggccatgtt aagggcggtt
421 ttttcctgtt tggtcactga tgcctccgtg taagggggat ttctgttcat gggggtaatg
481 ataccgatga aacgagagag gatgctcacg atacgggtta ctgatgatga acatgcccgg
541 ttactggaac gttgtgaggg taaacaactg gcggtatgga tgcggcggga ccagagaaaa
601 atcactcagg gtcaatgcca gcgcttcgtt aatacagatg taggtgttcc acagggtagc
661 cagcagcatc ctgcgatgca gatccggaac ataatggtgc agggcgctga cttccgcgtt
721 tccagacttt acgaaacacg gaaaccgaag accattcatg ttgttgctca ggtcgcagac
781 gttttgcagc agcagtcgct tcacgttcgc tcgcgtatcg gtgattcatt ctgctaacca
841 gtaaggcaac cccgccagcc tagccgggtc ctcaacgaca ggagcacgat catgcgcacc
901 cgtggccagg acccaacgct gcccgagatg cgccgcgtgc ggctgctgga gatggcggac
961 gcgatggata tgttctgcca agggttggtt tgcgcattca cagttctccg caagaattga
1021 ttggctccaa ttcttggagt ggtgaatccg ttagcgaggt gccgccggct tccattcagg
1081 tcgaggtggc ccggctccat gcaccgcgac gcaacgcggg gaggcagaca aggtataggg
1141 cggcgcctac aatccatgcc aacccgttcc atgtgctcgc cgaggcggca taaatcgccg
1201 tgacgatcag cggtccaatg atcgaagtta ggctggtaag agccgcgagc gatccttgaa
1261 gctgtccctg atggtcgtca tctacctgcc tggacagcat ggcctgcaac gcgggcatcc
1321 cgatgccgcc ggaagcgaga agaatcataa tggggaaggc catccagcct cgcgtcgcga
1381 acgccagcaa gacgtagccc agcgcgtcgg ccgccatgcc ggcgataatg gcctgcttct
1441 cgccgaaacg tttggtggcg ggaccagtga cgaaggcttg agcgagggcg tgcaagattc
1501 cgaataccgc aagcgacagg ccgatcatcg tcgcgctcca gcgaaagcgg tcctcgccga
1561 aaatgaccca gagcgctgcc ggcacctgtc ctacgagttg catgataaag aagacagtca
1621 taagtgcggc gacgatagtc atgccccgcg cccaccggaa ggagctgact gggttgaagg
1681 ctctcaaggg catcggtcga gatcccggtg cctaatgagt gagctaactt acattaattg
1741 cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa
1801 tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc gtattgggcg ccagggtggt ttttcttttc
1861 accagtgaga cgggcaacag ctgattgccc ttcaccgcct ggccctgaga gagttgcagc
1921 aagcggtcca cgctggtttg ccccagcagg cgaaaatcct gtttgatggt ggttaacggc
1981 gggatataac atgagctgtc ttcggtatcg tcgtatccca ctaccgagat atccgcacca
2041 acgcgcagcc cggactcggt aatggcgcgc attgcgccca gcgccatctg atcgttggca
2101 accagcatcg cagtgggaac gatgccctca ttcagcattt gcatggtttg ttgaaaaccg
2161 gacatggcac tccagtcgcc ttcccgttcc gctatcggct gaatttgatt gcgagtgaga
2221 tatttatgcc agccagccag acgcagacgc gccgagacag aacttaatgg gcccgctaac
2281 agcgcgattt gctggtgacc caatgcgacc agatgctcca cgcccagtcg cgtaccgtct
2341 tcatgggaga aaataatact gttgatgggt gtctggtcag agacatcaag aaataacgcc
2401 ggaacattag tgcaggcagc ttccacagca atggcatcct ggtcatccag cggatagtta
2461 atgatcagcc cactgacgcg ttgcgcgaga agattgtgca ccgccgcttt acaggcttcg
2521 acgccgcttc gttctaccat cgacaccacc acgctggcac ccagttgatc ggcgcgagat
2581 ttaatcgccg cgacaatttg cgacggcgcg tgcagggcca gactggaggt ggcaacgcca
2641 atcagcaacg actgtttgcc cgccagttgt tgtgccacgc ggttgggaat gtaattcagc
2701 tccgccatcg ccgcttccac tttttcccgc gttttcgcag aaacgtggct ggcctggttc
2761 accacgcggg aaacggtctg ataagagaca ccggcatact ctgcgacatc gtataacgtt
2821 actggtttca cattcaccac cctgaattga ctctcttccg ggcgctatca tgccataccg
2881 cgaaaggttt tgcgccattc gatggtgtcc gggatctcga cgctctccct tatgcgactc
2941 ctgcattagg aagcagccca gtagtaggtt gaggccgttg agcaccgccg ccgcaaggaa
3001 tggtgcatgc aaggagatgg cgcccaacag tcccccggcc acggggcctg ccaccatacc
3061 cacgccgaaa caagcgctca tgagcccgaa gtggcgagcc cgatcttccc catcggtgat
3121 gtcggcgata taggcgccag caaccgcacc tgtggcgccg gtgatgccgg ccacgatgcg
3181 tccggcgtag aggatcgaga tctcgatccc gcgaaattaa tacgactcac tataggggaa
3241 ttgtgagcgg ataacaattc ccctctagaa ataattttgt ttaactttaa gaaggagata
3301 taccatgggc catcatcatc atcatcatca tcatcatcac agcagcggcc atatcgaagg
3361 tcgtcatatg attttagatg tggattacat aactgaagaa ggaaaacctg ttattaggct
3421 attcaaaaaa gagaacggaa aatttaagat agagcatgat agaactttta gaccatacat
3481 ttacgctctt ctcagggatg attcaaagat tgaagaagtt aagaaaataa cgggggaaag
3541 gcatggaaag attgtgagaa ttgttgatgt agagaaggtt gagaaaaagt ttctcggcaa
3601 gcctattacc gtgtggaaac tttatttgga acatccccaa gatgttccca ctattagaga
3661 aaaagttaga gaacatccag cagttgtgga catcttcgaa tacgatattc catttgcaaa
3721 gagatacctc atcgacaaag gcctaatacc aatggagggg gaagaagagc taaagattct
3781 tgccttcgat atagaaaccc tctatcacga aggagaagag tttggaaaag gcccaattat
3841 aatgattagt tatgcagatg aaaatgaagc aaaggtgatt acttggaaaa acatagatct
3901 tccatacgtt gaggttgtat caagcgagag agagatgata aagagatttc tcaggattat
3961 cagggagaag gatcctgaca ttatagttac ttataatgga gactcattcg acttcccaca
4021 tttagcgaaa agggcagaaa aacttgggat taaattaacc attggaagag atggaagcga
4081 gcccaagatg cagagaatag gcgatatgac ggctgtagaa gtcaagggaa gaatacattt
4141 cgacttgtat catgtaataa caaggacaat aaatctccca acatacacac tagaggctgt
4201 atatgaagca atttttggaa agccaaagga gaaggtatac gccgacgaga tagcaaaagc
4261 ctgggaaagt ggagagaacc ttgagagagt tgccaaatac tcgatggaag atgcaaaggc
4321 aacttatgaa ctcgggaaag aattccttcc aatggaaatt cagctttcaa gattagttgg
4381 acaaccttta tgggatgttt caaggtcaag cacagggaac cttgtagagt ggttcttact
4441 taggaaagcc tacgaaagaa acgaagtagc tccaaacaag ccaagtgaag aggagtatca
4501 aagaaggctc agggagagct acacaggtgg attcgttaaa gagccagaaa aggggttgtg
4561 ggaaaacata gtatacctag attttagagc cctatatccc tcgattataa ttacccacaa
4621 tgtttctccc gatactctaa atcttgaggg atgcaagaac tatgatatcg ctcctcaagt
4681 aggccacaag ttctgcaagg acatccctgg ttttatacca agtctcttgg gacatttgtt
4741 agaggaaaga cgaaagatta agacaaaaat gaaggaaact caagatccta tagaaaaaat
4801 actccttgac tatagacaaa aagcgataaa actcttagca aattctttct acggatatta
4861 tggctatgca aaagcaagat ggtactgtaa ggagtgtgct gagagcgtta ctgcctgggg
4921 aagaaagtac atcgagttag tatggaagga gctcgaagaa aagcttggat ttaaagtcct
4981 ctacattgac actgatggtc tctatgcaac tatcccagga ggagaaagtg aggaaataaa
5041 gataaaggct ctagaatttg taaaatacat aaattcaaag ctccctggac tgctagagct
5101 tgaatatgaa gggttttata agaggggatt cttcgttacg aagaagaggt atgcagtaat
5161 agatgaagaa ggaaaagtca ttactcgtgg tttagagata gttaggagag attggagtga
5221 aattgcaaaa gaaactcaag ctagagtttt ggagacaata ctaaaacacg gagatgttga
5281 agaagctgtg agaatagtaa aagaagtaat acaaaagctt gccaattatg aaattccacc
5341 agagaagctc gcaatatatg agcagataac aagaccatta catgagtata aggcgatagg
5401 tcctcacgta gctgctgcaa agaaactagc tgctaaagga gttaaaataa agccaggaat
5461 ggtaattgga tacatagtac ttagaggcga tggtccaatt agcaataggg caattctagc
5521 tgaggaatac gatcccaaaa agcacaagta tgacgcagaa tattacattg agaaccaggt
5581 tcttccagcg gtacttagga tattggaggg atttggatac agaaaggaag acctcagata
5641 ccaaaagaca agacaagtcg gcctaacttc ctggcttaac attaaaaaat cctagctcga
5701 ggatccggct gctaacaaag cccgaaagga agctgagttg gctgctgcca ccgctgagca
5761 ataactagca taaccccttg gggcctctaa acgggtcttg aggggttttt tgctgaaagg
5821 aggaactata tccggatatc ccgcaagagg cccggcagta ccggcataac caagcctatg
5881 cctacagcat ccagggtgac ggtgccgagg atgacgatga gcgcattgtt agatttcata
5941 cacggtgcct gactgcgtta gcaatttaac tgtgataaac taccgcatta aagcttatcg
6001 atgataagct gtcaaacatg agaattcttg aagacgaaag ggcctcgtga tacgcctatt
6061 tttataggtt aatgtcatga taataatggt ttcttagacg tcaggtggca cttttcgggg
6121 aaatgtgcgc ggaaccccta tttgtttatt tttctaaata cattcaaata tgtatccgct
6181 catgagacaa taaccctgat aaatgcttca ataatattga aaaaggaaga gtatgagtat
6241 tcaacatttc cgtgtcgccc ttattccctt ttttgcggca ttttgccttc ctgtttttgc
6301 tcacccagaa acgctggtga aagtaaaaga tgctgaagat cagttgggtg cacgagtggg
6361 ttacatcgaa ctggatctca acagcggtaa gatccttgag agttttcgcc ccgaagaacg
6421 ttttccaatg atgagcactt ttaaagttct gctatgtggc gcggtattat cccgtgttga
6481 cgccgggcaa gagcaactcg gtcgccgcat acactattct cagaatgact tggttgagta
6541 ctcaccagtc acagaaaagc atcttacgga tggcatgaca gtaagagaat tatgcagtgc
6601 tgccataacc atgagtgata acactgcggc caacttactt ctgacaacga tcggaggacc
6661 gaaggagcta accgcttttt tgcacaacat gggggatcat gtaactcgcc ttgatcgttg
6721 ggaaccggag ctgaatgaag ccataccaaa cgacgagcgt gacaccacga tgcctgcagc
6781 aatggcaaca acgttgcgca aactattaac tggcgaacta cttactctag cttcccggca
6841 acaattaata gactggatgg aggcggataa agttgcagga ccacttctgc gctcggccct
6901 tccggctggc tggtttattg ctgataaatc tggagccggt gagcgtgggt ctcgcggtat
6961 cattgcagca ctggggccag atggtaagcc ctcccgtatc gtagttatct acacgacggg
7021 gagtcaggca actatggatg aacgaaatag acagatcgct gagataggtg cctcactgat
7081 taagcattgg taactgtcag accaagttta ctcatatata ctttagattg atttaaaact
7141 tcatttttaa tttaaaagga tctaggtgaa gatccttttt gataatctca tgaccaaaat
7201 cccttaacgt gagttttcgt tccactgagc gtcagacccc gtagaaaaga tcaaaggatc
7261 ttcttgagat cctttttttc tgcgcgtaat ctgctgcttg caaacaaaaa aaccaccgct
7321 accagcggtg gtttgtttgc cggatcaaga gctaccaact ctttttccga aggtaactgg
7381 cttcagcaga gcgcagatac caaatactgt ccttctagtg tagccgtagt taggccacca
7441 cttcaagaac tctgtagcac cgcctacata cctcgctctg ctaatcctgt taccagtggc
7501 tgctgccagt ggcgataagt cgtgtcttac cgggttggac tcaagacgat agttaccgga
7561 taaggcgcag cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct tggagcgaac
7621 gacctacacc gaactgagat acctacagcg tgagctatga gaaagcgcca cgcttcccga
7681 agggagaaag gcggacaggt atccggtaag cggcagggtc ggaacaggag agcgcacgag
7741 ggagcttcca gggggaaacg cctggtatct ttatagtcct gtcgggtttc gccacctctg
7801 acttgagcgt cgatttttgt gatgctcgtc aggggggcgg agcctatgga aaaacgccag
7861 caacgcggcc tttttacggt tcctggcctt ttgctggcct tttgctcaca tgttctttcc
7921 tgcgttatcc cctgattctg tggataaccg tattaccgcc tttgagtgag ctgataccgc
7981 tcgccgcagc cgaacgaccg agcgcagcga gtcagtgagc gaggaagcgg aag
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pET16B.Pfu聚合酶基因质粒
别称: pET16B.Pfu
启动子：T7
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pET16B.Pfu质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 8033 bp ds-DNA circular SYN 26-SEP-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 8033)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Sep 26, 2017 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8033
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 5..144
/label=bom
/note="basis of mobility region from pBR322"
CDS complement(246..437)
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy
number"
/label=rop
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
misc_feature complement(1749..2831)
/label=lacI
promoter complement(2832..2909)
/gene="lacI"
/label=lacI promoter
promoter 3218..3236
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
protein_bind 3237..3261
/label=lac operator
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
RBS 3276..3298
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
CDS 3311..3340
/codon_start=1
/product="10xHis affinity tag"
/label=10xHis
/translation="HHHHHHHHHH"
CDS 3353..3364
/codon_start=1
/product="Factor Xa recognition and cleavage site"
/label=Factor Xa site
/translation="IEGR"
CDS 3368..5695
/codon_start=1
/label=Pfu
/translation="MILDVDYITEEGKPVIRLFKKENGKFKIEHDRTFRPYIYALLRDD
SKIEEVKKITGERHGKIVRIVDVEKVEKKFLGKPITVWKLYLEHPQDVPTIREKVREHP
AVVDIFEYDIPFAKRYLIDKGLIPMEGEEELKILAFDIETLYHEGEEFGKGPIIMISYA
DENEAKVITWKNIDLPYVEVVSSEREMIKRFLRIIREKDPDIIVTYNGDSFDFPHLAKR
AEKLGIKLTIGRDGSEPKMQRIGDMTAVEVKGRIHFDLYHVITRTINLPTYTLEAVYEA
IFGKPKEKVYADEIAKAWESGENLERVAKYSMEDAKATYELGKEFLPMEIQLSRLVGQP
LWDVSRSSTGNLVEWFLLRKAYERNEVAPNKPSEEEYQRRLRESYTGGFVKEPEKGLWE
NIVYLDFRALYPSIIITHNVSPDTLNLEGCKNYDIAPQVGHKFCKDIPGFIPSLLGHLL
EERRKIKTKMKETQDPIEKILLDYRQKAIKLLANSFYGYYGYAKARWYCKECAESVTAW
GRKYIELVWKELEEKLGFKVLYIDTDGLYATIPGGESEEIKIKALEFVKYINSKLPGLL
ELEYEGFYKRGFFVTKKRYAVIDEEGKVITRGLEIVRRDWSEIAKETQARVLETILKHG
DVEEAVRIVKEVIQKLANYEIPPEKLAIYEQITRPLHEYKAIGPHVAAAKKLAAKGVKI
KPGMVIGYIVLRGDGPISNRAILAEEYDPKKHKYDAEYYIENQVLPAVLRILEGFGYRK
EDLRYQKTRQVGLTSWLNIKKS"
terminator 5765..5812
/label=T7 terminator
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
promoter 6128..6232
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 6233..7093
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 7264..7852
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 agcgcctgat gcggtatttt ctccttacgc atctgtgcgg tatttcacac cgcaatggtg
61 cactctcagt acaatctgct ctgatgccgc atagttaagc cagtatacac tccgctatcg
121 ctacgtgact gggtcatggc tgcgccccga cacccgccaa cacccgctga cgcgccctga
181 cgggcttgtc tgctcccggc atccgcttac agacaagctg tgaccgtctc cgggagctgc
241 atgtgtcaga ggttttcacc gtcatcaccg aaacgcgcga ggcagctgcg gtaaagctca
301 tcagcgtggt cgtgaagcga ttcacagatg tctgcctgtt catccgcgtc cagctcgttg
361 agtttctcca gaagcgttaa tgtctggctt ctgataaagc gggccatgtt aagggcggtt
421 ttttcctgtt tggtcactga tgcctccgtg taagggggat ttctgttcat gggggtaatg
481 ataccgatga aacgagagag gatgctcacg atacgggtta ctgatgatga acatgcccgg
541 ttactggaac gttgtgaggg taaacaactg gcggtatgga tgcggcggga ccagagaaaa
601 atcactcagg gtcaatgcca gcgcttcgtt aatacagatg taggtgttcc acagggtagc
661 cagcagcatc ctgcgatgca gatccggaac ataatggtgc agggcgctga cttccgcgtt
721 tccagacttt acgaaacacg gaaaccgaag accattcatg ttgttgctca ggtcgcagac
781 gttttgcagc agcagtcgct tcacgttcgc tcgcgtatcg gtgattcatt ctgctaacca
841 gtaaggcaac cccgccagcc tagccgggtc ctcaacgaca ggagcacgat catgcgcacc
901 cgtggccagg acccaacgct gcccgagatg cgccgcgtgc ggctgctgga gatggcggac
961 gcgatggata tgttctgcca agggttggtt tgcgcattca cagttctccg caagaattga
1021 ttggctccaa ttcttggagt ggtgaatccg ttagcgaggt gccgccggct tccattcagg
1081 tcgaggtggc ccggctccat gcaccgcgac gcaacgcggg gaggcagaca aggtataggg
1141 cggcgcctac aatccatgcc aacccgttcc atgtgctcgc cgaggcggca taaatcgccg
1201 tgacgatcag cggtccaatg atcgaagtta ggctggtaag agccgcgagc gatccttgaa
1261 gctgtccctg atggtcgtca tctacctgcc tggacagcat ggcctgcaac gcgggcatcc
1321 cgatgccgcc ggaagcgaga agaatcataa tggggaaggc catccagcct cgcgtcgcga
1381 acgccagcaa gacgtagccc agcgcgtcgg ccgccatgcc ggcgataatg gcctgcttct
1441 cgccgaaacg tttggtggcg ggaccagtga cgaaggcttg agcgagggcg tgcaagattc
1501 cgaataccgc aagcgacagg ccgatcatcg tcgcgctcca gcgaaagcgg tcctcgccga
1561 aaatgaccca gagcgctgcc ggcacctgtc ctacgagttg catgataaag aagacagtca
1621 taagtgcggc gacgatagtc atgccccgcg cccaccggaa ggagctgact gggttgaagg
1681 ctctcaaggg catcggtcga gatcccggtg cctaatgagt gagctaactt acattaattg
1741 cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa
1801 tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc gtattgggcg ccagggtggt ttttcttttc
1861 accagtgaga cgggcaacag ctgattgccc ttcaccgcct ggccctgaga gagttgcagc
1921 aagcggtcca cgctggtttg ccccagcagg cgaaaatcct gtttgatggt ggttaacggc
1981 gggatataac atgagctgtc ttcggtatcg tcgtatccca ctaccgagat atccgcacca
2041 acgcgcagcc cggactcggt aatggcgcgc attgcgccca gcgccatctg atcgttggca
2101 accagcatcg cagtgggaac gatgccctca ttcagcattt gcatggtttg ttgaaaaccg
2161 gacatggcac tccagtcgcc ttcccgttcc gctatcggct gaatttgatt gcgagtgaga
2221 tatttatgcc agccagccag acgcagacgc gccgagacag aacttaatgg gcccgctaac
2281 agcgcgattt gctggtgacc caatgcgacc agatgctcca cgcccagtcg cgtaccgtct
2341 tcatgggaga aaataatact gttgatgggt gtctggtcag agacatcaag aaataacgcc
2401 ggaacattag tgcaggcagc ttccacagca atggcatcct ggtcatccag cggatagtta
2461 atgatcagcc cactgacgcg ttgcgcgaga agattgtgca ccgccgcttt acaggcttcg
2521 acgccgcttc gttctaccat cgacaccacc acgctggcac ccagttgatc ggcgcgagat
2581 ttaatcgccg cgacaatttg cgacggcgcg tgcagggcca gactggaggt ggcaacgcca
2641 atcagcaacg actgtttgcc cgccagttgt tgtgccacgc ggttgggaat gtaattcagc
2701 tccgccatcg ccgcttccac tttttcccgc gttttcgcag aaacgtggct ggcctggttc
2761 accacgcggg aaacggtctg ataagagaca ccggcatact ctgcgacatc gtataacgtt
2821 actggtttca cattcaccac cctgaattga ctctcttccg ggcgctatca tgccataccg
2881 cgaaaggttt tgcgccattc gatggtgtcc gggatctcga cgctctccct tatgcgactc
2941 ctgcattagg aagcagccca gtagtaggtt gaggccgttg agcaccgccg ccgcaaggaa
3001 tggtgcatgc aaggagatgg cgcccaacag tcccccggcc acggggcctg ccaccatacc
3061 cacgccgaaa caagcgctca tgagcccgaa gtggcgagcc cgatcttccc catcggtgat
3121 gtcggcgata taggcgccag caaccgcacc tgtggcgccg gtgatgccgg ccacgatgcg
3181 tccggcgtag aggatcgaga tctcgatccc gcgaaattaa tacgactcac tataggggaa
3241 ttgtgagcgg ataacaattc ccctctagaa ataattttgt ttaactttaa gaaggagata
3301 taccatgggc catcatcatc atcatcatca tcatcatcac agcagcggcc atatcgaagg
3361 tcgtcatatg attttagatg tggattacat aactgaagaa ggaaaacctg ttattaggct
3421 attcaaaaaa gagaacggaa aatttaagat agagcatgat agaactttta gaccatacat
3481 ttacgctctt ctcagggatg attcaaagat tgaagaagtt aagaaaataa cgggggaaag
3541 gcatggaaag attgtgagaa ttgttgatgt agagaaggtt gagaaaaagt ttctcggcaa
3601 gcctattacc gtgtggaaac tttatttgga acatccccaa gatgttccca ctattagaga
3661 aaaagttaga gaacatccag cagttgtgga catcttcgaa tacgatattc catttgcaaa
3721 gagatacctc atcgacaaag gcctaatacc aatggagggg gaagaagagc taaagattct
3781 tgccttcgat atagaaaccc tctatcacga aggagaagag tttggaaaag gcccaattat
3841 aatgattagt tatgcagatg aaaatgaagc aaaggtgatt acttggaaaa acatagatct
3901 tccatacgtt gaggttgtat caagcgagag agagatgata aagagatttc tcaggattat
3961 cagggagaag gatcctgaca ttatagttac ttataatgga gactcattcg acttcccaca
4021 tttagcgaaa agggcagaaa aacttgggat taaattaacc attggaagag atggaagcga
4081 gcccaagatg cagagaatag gcgatatgac ggctgtagaa gtcaagggaa gaatacattt
4141 cgacttgtat catgtaataa caaggacaat aaatctccca acatacacac tagaggctgt
4201 atatgaagca atttttggaa agccaaagga gaaggtatac gccgacgaga tagcaaaagc
4261 ctgggaaagt ggagagaacc ttgagagagt tgccaaatac tcgatggaag atgcaaaggc
4321 aacttatgaa ctcgggaaag aattccttcc aatggaaatt cagctttcaa gattagttgg
4381 acaaccttta tgggatgttt caaggtcaag cacagggaac cttgtagagt ggttcttact
4441 taggaaagcc tacgaaagaa acgaagtagc tccaaacaag ccaagtgaag aggagtatca
4501 aagaaggctc agggagagct acacaggtgg attcgttaaa gagccagaaa aggggttgtg
4561 ggaaaacata gtatacctag attttagagc cctatatccc tcgattataa ttacccacaa
4621 tgtttctccc gatactctaa atcttgaggg atgcaagaac tatgatatcg ctcctcaagt
4681 aggccacaag ttctgcaagg acatccctgg ttttatacca agtctcttgg gacatttgtt
4741 agaggaaaga cgaaagatta agacaaaaat gaaggaaact caagatccta tagaaaaaat
4801 actccttgac tatagacaaa aagcgataaa actcttagca aattctttct acggatatta
4861 tggctatgca aaagcaagat ggtactgtaa ggagtgtgct gagagcgtta ctgcctgggg
4921 aagaaagtac atcgagttag tatggaagga gctcgaagaa aagcttggat ttaaagtcct
4981 ctacattgac actgatggtc tctatgcaac tatcccagga ggagaaagtg aggaaataaa
5041 gataaaggct ctagaatttg taaaatacat aaattcaaag ctccctggac tgctagagct
5101 tgaatatgaa gggttttata agaggggatt cttcgttacg aagaagaggt atgcagtaat
5161 agatgaagaa ggaaaagtca ttactcgtgg tttagagata gttaggagag attggagtga
5221 aattgcaaaa gaaactcaag ctagagtttt ggagacaata ctaaaacacg gagatgttga
5281 agaagctgtg agaatagtaa aagaagtaat acaaaagctt gccaattatg aaattccacc
5341 agagaagctc gcaatatatg agcagataac aagaccatta catgagtata aggcgatagg
5401 tcctcacgta gctgctgcaa agaaactagc tgctaaagga gttaaaataa agccaggaat
5461 ggtaattgga tacatagtac ttagaggcga tggtccaatt agcaataggg caattctagc
5521 tgaggaatac gatcccaaaa agcacaagta tgacgcagaa tattacattg agaaccaggt
5581 tcttccagcg gtacttagga tattggaggg atttggatac agaaaggaag acctcagata
5641 ccaaaagaca agacaagtcg gcctaacttc ctggcttaac attaaaaaat cctagctcga
5701 ggatccggct gctaacaaag cccgaaagga agctgagttg gctgctgcca ccgctgagca
5761 ataactagca taaccccttg gggcctctaa acgggtcttg aggggttttt tgctgaaagg
5821 aggaactata tccggatatc ccgcaagagg cccggcagta ccggcataac caagcctatg
5881 cctacagcat ccagggtgac ggtgccgagg atgacgatga gcgcattgtt agatttcata
5941 cacggtgcct gactgcgtta gcaatttaac tgtgataaac taccgcatta aagcttatcg
6001 atgataagct gtcaaacatg agaattcttg aagacgaaag ggcctcgtga tacgcctatt
6061 tttataggtt aatgtcatga taataatggt ttcttagacg tcaggtggca cttttcgggg
6121 aaatgtgcgc ggaaccccta tttgtttatt tttctaaata cattcaaata tgtatccgct
6181 catgagacaa taaccctgat aaatgcttca ataatattga aaaaggaaga gtatgagtat
6241 tcaacatttc cgtgtcgccc ttattccctt ttttgcggca ttttgccttc ctgtttttgc
6301 tcacccagaa acgctggtga aagtaaaaga tgctgaagat cagttgggtg cacgagtggg
6361 ttacatcgaa ctggatctca acagcggtaa gatccttgag agttttcgcc ccgaagaacg
6421 ttttccaatg atgagcactt ttaaagttct gctatgtggc gcggtattat cccgtgttga
6481 cgccgggcaa gagcaactcg gtcgccgcat acactattct cagaatgact tggttgagta
6541 ctcaccagtc acagaaaagc atcttacgga tggcatgaca gtaagagaat tatgcagtgc
6601 tgccataacc atgagtgata acactgcggc caacttactt ctgacaacga tcggaggacc
6661 gaaggagcta accgcttttt tgcacaacat gggggatcat gtaactcgcc ttgatcgttg
6721 ggaaccggag ctgaatgaag ccataccaaa cgacgagcgt gacaccacga tgcctgcagc
6781 aatggcaaca acgttgcgca aactattaac tggcgaacta cttactctag cttcccggca
6841 acaattaata gactggatgg aggcggataa agttgcagga ccacttctgc gctcggccct
6901 tccggctggc tggtttattg ctgataaatc tggagccggt gagcgtgggt ctcgcggtat
6961 cattgcagca ctggggccag atggtaagcc ctcccgtatc gtagttatct acacgacggg
7021 gagtcaggca actatggatg aacgaaatag acagatcgct gagataggtg cctcactgat
7081 taagcattgg taactgtcag accaagttta ctcatatata ctttagattg atttaaaact
7141 tcatttttaa tttaaaagga tctaggtgaa gatccttttt gataatctca tgaccaaaat
7201 cccttaacgt gagttttcgt tccactgagc gtcagacccc gtagaaaaga tcaaaggatc
7261 ttcttgagat cctttttttc tgcgcgtaat ctgctgcttg caaacaaaaa aaccaccgct
7321 accagcggtg gtttgtttgc cggatcaaga gctaccaact ctttttccga aggtaactgg
7381 cttcagcaga gcgcagatac caaatactgt ccttctagtg tagccgtagt taggccacca
7441 cttcaagaac tctgtagcac cgcctacata cctcgctctg ctaatcctgt taccagtggc
7501 tgctgccagt ggcgataagt cgtgtcttac cgggttggac tcaagacgat agttaccgga
7561 taaggcgcag cggtcgggct gaacgggggg ttcgtgcaca cagcccagct tggagcgaac
7621 gacctacacc gaactgagat acctacagcg tgagctatga gaaagcgcca cgcttcccga
7681 agggagaaag gcggacaggt atccggtaag cggcagggtc ggaacaggag agcgcacgag
7741 ggagcttcca gggggaaacg cctggtatct ttatagtcct gtcgggtttc gccacctctg
7801 acttgagcgt cgatttttgt gatgctcgtc aggggggcgg agcctatgga aaaacgccag
7861 caacgcggcc tttttacggt tcctggcctt ttgctggcct tttgctcaca tgttctttcc
7921 tgcgttatcc cctgattctg tggataaccg tattaccgcc tttgagtgag ctgataccgc
7981 tcgccgcagc cgaacgaccg agcgcagcga gtcagtgagc gaggaagcgg aag
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3906/pCMV-SPORT6-TMED3（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3907/pCMV-SPORT6-TMEM184B人源基因质粒 |
| P3908/pCMV-SPORT6-CHST8人源基因质粒 |
| P3909/pCMV-SPORT6-ATP5IF1（2点突变）人源基因质粒 |
| P3910/pCMV-SPORT6-LYRM4（1点突变）人源基因质粒 |
| P3911/pCMV-SPORT6-ADIPOR1人源基因质粒 |
| P3912/pCMV-SPORT6-WSB2人源基因质粒 |
| P3913/pCMV-SPORT6-FEZ1人源基因质粒 |
| P3914/pCMV-SPORT6-SLC50A1人源基因质粒 |
| P3915/pCMV-SPORT6-GOPC人源基因质粒 |
| P3916/pCMV-SPORT6-TBRG4人源基因质粒 |
| P3917/pCMV-SPORT6-TRIM21人源基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
验对保真度要求较高，在选择 DNA 聚合酶的时候就需要使用高保真酶，如 Pfu、KOD、Primerstar、Phanta 等。前三者都属于第一代高保真酶，已在市场中广泛使用。诺唯赞科研团队的大力改造生产的 Phanta 系列的高保真酶，保真度达到了 Taq 酶的 50 倍，扩增性能、扩增长度、产量、模板适应性都显著提升。Phanta Max 保真度是 Taq 酶的 53 倍，Pfu 的 6 倍，对于质粒等简单模板有效扩增长度可达 40kb，cDNA 有效扩增长度可达 10kb，基因组有效扩增
相关，不同的载体是不一样的。一个载体可只看它的启动子到终止子那一段，其它的可以考虑少些。 pET 表达菌株的相关信息 （ DE3 ）指宿主为 λ DE3 溶原菌，其染色体上带有一拷贝由 lacUV5 启动子控制的 T7 RNA 聚合酶基因。这类菌株适用于从克隆到 pET 载体的目标基因生产蛋白。命名为 pLysS 和 pLysE 的宿主菌带有编码 T7 溶菌酶（为 T7 RNA 聚合酶的天然抑制物）的 pET 相容性质粒。带有 pLysS 的细胞
【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择！（接原原核表达研究者关心的10个问题贴）
的生产任务”——因为很难亲眼观察微观世界中表达是如何进行的，当出现问题时，我们需要经验判断问题所在。宿主细胞对原核表达可能会产生哪些影响呢？ 知其然还要知其所以然。比如，菌株内源的蛋白酶过多，可能会造成外源表达产物的不稳定，所以一些蛋白酶缺陷型菌株往往成为理想的起始表达菌株。堪称经典的BL21系列就是lon和ompT蛋白酶缺陷型，也是我们非常熟悉的表达菌株。大名鼎鼎的BL21(DE3)融源菌则是添加T7聚合酶基因，为T7表达系统而设计。 真核细胞偏爱的密码子和原核系统有不同，因此，在用原核系统
pET16B.Pfu聚合酶基因质粒
￥100 - 1000
