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- Xybio
- 上海
- P2015
- 2026年04月17日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
NM_205327.1
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pIRES2-FGF3-c-AcGFP1鸡源基因质粒
别称: NM_205327.1
启动子：CMV
复制子: pUC
原核抗性: Kan
筛选标记：G418
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：哺乳细胞
载体用途：蛋白表达
基因种属：鸡
基因类型：ORF
原核抗性：Kan
真核抗性：Neo/G418
荧光蛋白：绿色
质粒简介
pIRES2-FGF3-c-AcGFP1质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3809/pCMV-SPORT6-NEUROG1人源基因质粒 |
| P3810/pCMV-SPORT6-ABHD11人源基因质粒 |
| P3811/pCMV-SPORT6-PRR11人源基因质粒 |
| P3812/pCMV-SPORT6-RNF146人源基因质粒 |
| P3813/pCMV-SPORT6-NMB人源基因质粒 |
| P3814/pCMV-SPORT6-CREG1人源基因质粒 |
| P3815/pCMV-SPORT6-HLA-DQA1人源基因质粒 |
| P3816/pCMV-SPORT6-ACY3人源基因质粒 |
| P3817/pCMV-SPORT6-GDAP1L1人源基因质粒 |
| P3818/pCMV-SPORT6-ARNTL2人源基因质粒 |
| P3821/pCMV-SPORT6-FAM184A人源基因质粒 |
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文献和实验隆抗体蛋白产率的下限，即1-30μg/l08细胞/24小时。有人认为其限速步骤可嚣是在工程细胞中(对于重组蛋白来讲，常是异源的)，重组蛋白的分泌效率较低。1、表达载体（1）表达栽体的类型哺乳动物细胞表达外源重组蛋白可利用质粒转染和病毒载体的感染。利用质粒转染获得稳定的转染细胞需几周甚至几个月时间，而利用病毒表达系统则可快速感染细胞，在几天内使外源基因整合到病毒载体中，尤其适用于从大量表达产物中检测出目的蛋白。根据进入宿主细胞的方式，可将表达载体分为病毒载体与质粒载体。病毒载体是以病毒颗粒的方式，通过病毒
定好。由于表皮富含抗原提呈细胞而常被选作基因枪注入的靶位。由于基因枪技术能更好地模拟外源异物入侵机体的自然过程,使DNA疫苗更有效的发生转染和有效的抗原提呈相结合,因此成为目前广泛应用且十分高效的免疫方法,它比普通的注射法低 2～3个数量级的DNA量即可产生较高的保护作用。 Leitner等将编码疟原虫环子孢子抗原的质粒通过肌注途径和基因枪介导的表皮途径免疫BALB/C小鼠。结果表明：表皮免疫产生的抗体及保护效率都显著高于肌注途径。同时还发现,就间隔时间及免疫次数而言,表皮途径以 45天为间隔及三次
。由于基因枪技术能更好地模拟外源异物入侵机体的自然过程,使DNA疫苗更有效的发生转染和有效的抗原提呈相结合,因此成为目前广泛应用且十分高效的免疫方法,它比普通的注射法低 2～3个数量级的DNA量即可产生较高的保护作用。 Leitner等将编码疟原虫环子孢子抗原的质粒通过肌注途径和基因枪介导的表皮途径免疫BALB/C小鼠。结果表明：表皮免疫产生的抗体及保护效率都显著高于肌注途径。同时还发现,就间隔时间及免疫次数而言,表皮途径以 45天为间隔及三次免疫效果为最佳,比以28天为间隔产生的IgG效价高出近
