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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
Plasmid#66803
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:pSLIK-IDH1-R132H-FLAG人源基因质粒
别称: Plasmid#66803
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记:Hyg
克隆菌株: Stbl3
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主:哺乳细胞
载体用途:蛋白表达
基因种属:人
基因类型:ORF
原核抗性:Amp
真核抗性:Hyg
荧光蛋白:
质粒简介
pSLIK-IDH1-R132H-FLAG质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列:详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P1106/pCDNA3.1-3×HA-TERT人源基因质粒 |
| P1107/pFUPI-UbC-TRIM5-CypA人源基因质粒 |
| P1124/HA-HIF1alpha-wt-pBabe-puro人源基因质粒 |
| P2939/pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-FLAG-HIF2α人源基因质粒 |
| P1125/pECMV-3×FLAG-SET人源基因质粒 |
| P1141/pCDNA3.1-AGK人源基因质粒 |
| P1142/pDsRed2-Dusp6人源基因质粒 |
| P1143/pDsRed2-FMR1人源基因质粒 |
| P1144/pEGFP-FXR2人源基因质粒 |
| P1153/pLEGFP-WT-STAT3人源基因质粒 |
| P4833/pECMV-3×FLAG-SDC1人源基因质粒 |
| P1154/pCMV-FLAG-SIRT4人源基因质粒 |
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,发挥抗肿瘤效应。该成果以 A vaccine targeting mutant IDH1 in newly diagnosed glioma 为题发表在最新的 Nature 上 [2]。 图片来源:Nature 研究内容:这是一项靶向 IDH1R132H 的多肽疫苗治疗 III-IV 级(WHO 分级)胶质瘤的安全性、耐受性和免疫原性的多中心 I 期临床研究(NCT02454634)。研究人员筛选了 44 名患者,其中 32 名患者入组参与了临床试验并接受了 IDH-vac 治疗。在这 32 名
B.Methods Enzymol.1990,182:132-143 164.Better M,Chang C P,Robinson R R.Science.1988,240:1041-1043 165.Ko J H,Park D K.Biotechnol Lett.1995,17:1019-1024 166.Abrahmsen L,Moks T,Nilsson B.Nucleic Acids Res.1986,14;7487-7500 167.Hsiung H M,Cantrell
作物。在燕麦中,至今尚无 RNA 沉默的研究报道。RNAi 作为一种研究植物功能基因组的工具,确切地说,第一次大规模地使用是在拟南芥和玉米研究中,超过 100 个目的基因被沉默[41]。研究的关键一直集中在设计和构建可用的质粒载体,以便引发 RNAi 的外源基因能稳定地整合到染色体组中。本章将介绍目前在大麦和小麦中,下调基因表达所使用的 RNAi 和 VIGS 等多种方法。相对而言,虽然 RNA 基因沉默已是一项广泛应用的技术,但是,在植物研究中对其进行优化的报道相对较少。一段给定的序列能否产生 RNA











