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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
2年
- 英文名:
Plasmid#27077
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
干粉/液体
名称:pCXLE-hOCT3/4-shp53-F人源基因质粒
别称: Plasmid#27077
启动子: CAG
复制子: pUC
质粒分类: 基因文库质粒
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主:哺乳细胞
载体用途:蛋白表达
基因种属:人
基因类型:ORF
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光蛋白:
质粒简介:详询
质粒图谱
质粒序列:详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片
| P1377/pEGFP-DIS3人源基因质粒 |
| P1378/pEGFP-SAMD4A人源基因质粒 |
| P1379/pEGFP-DNMT3A人源基因质粒 |
| P1380/pEGFP-ARID5A人源基因质粒 |
| P1381/pEGFP-RC3H1人源基因质粒 |
| P1382/pEGFP-SMG6人源基因质粒 |
| P1389/pEGFP-RC3H2人源基因质粒 |
| P1392/pEGFP-SMG7人源基因质粒 |
| P1571/pEGFP-ADRB2人源基因质粒 |
| P1606/pEGFP-ADRA2A人源基因质粒 |
| P1425/pEGFP-ABCD1-T332G人源基因质粒 |
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文献和实验4-2. 如果pLexA-X虽然不会自动激活报告基因,但对酵母宿主细胞有毒性,则需要与纯化的文库DNA同时转化酵母。 5. 如果pLexA-X既不会自动激活报告基因,也不具有毒性,则可以与纯化的文库DNA同时、或顺序转化酵母细胞,并检测质粒转化效率。 转 化 质粒 SD固体培养基 LacZ表型 对照1 pLexA-Pos Gal/Raf/-His/-Ura 蓝 对照2 pLexA-53 Gal/Raf/-His/-Trp/-Ura/-Leu 蓝 +pB42
bSuKm1foWOq5wNpboNQLmlo2Fn6wS/ZjqQvb2Gy88CULhuQ5TVEaoQ2gtdU9TtPRtFgh/BbLYDrlNQtO4GHJJVoXvFg0UhwMJHFBz8InEEZPh1ZysOf82LTuunw2ReE8zcuwcvBs9FhSwx9ygL9MIXF3cE5dCHQW6tUCFBRmfdHz/iB3LBwEAHsR9N0y8571/wU9NGdk3x4RpaZL/f4OLeO2i7bi76ls+Z7gQPsYry5csjR44c9GX7BuIIRl9f
表达 体内基因表达模式方面的研究。在药物研发领域,科学家通过可发光转基因动物(例如:大鼠或小鼠基因组中整合了修饰的内源基因和BL报告基因)作为人类疾病的模式动物进行目标确认的研究。[35] 例如:目前已经建立了一个转基因小鼠模型,可以监测编码人细胞色素P450 3A4(CYP3A4)基因的体内转录调控,人细胞色素P450 3A4在药物代谢方面起着重要作用。[36] 传染性疾病 疾病的进程和治疗剂的功效可以通过对小鼠注射BL标记进行评估。例如注射经过修饰的病原微生物,然后对透过动物组织的光进行成像











