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- 上海
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- 2026年01月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
TLS;ALS6;ETM4;FUS1;POMP75;HNRNPP2
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pASK-IBA5plus++FUS人源基因质粒
别称: TLS;ALS6;ETM4;FUS1;POMP75;HNRNPP2
启动子: Tet
复制子: pBR322
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pASK-IBA5plus++FUS是一个人源基因大肠表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4836 bp ds-DNA circular SYN 09-八月-2017
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4836
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 36..91
/gene="tetR"
/note="tetR/tetA promoters"
/note="overlapping promoters for bacterial tetR and tetA"
protein_bind 42..60
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O1 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 72..90
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
RBS 130..152
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
CDS 241..1821
/codon_start=1
/note="FUS"
/note="Homo sapiens FUS RNA binding protein (FUS),
transcript variant 1, mRNA
NCBI Reference Sequence: NM_004960.3"
/translation="MASNDYTQQATQSYGAYPTQPGQGYSQQSSQPYGQQSYSGYSQST
DTSGYGQSSYSSYGQSQNTGYGTQS-TPQGYGSTGGYGSSQSSQSSYGQQSSYPGYGQQP
APSSTSGSYGSSSQSSSYGQPQSGSYSQQPSYGGQQQSYGQQQSYNPPQGYGQQNQYNS
SSGGGGGGGGGGNYGQDQSSMSSGGGSGGGYGNQDQSGGGGSGGYGQQDRGGRGRGGSG
GGGGGGGGGYNRSSGGYEPRGRGGGRGGRGGMGGSDRGGFNKFGGPRDQGSRHDSEQDN
SDNNTIFVQGLGENVTIESVADYFKQIGIIKTNKKTGQPMINLYTDRETGKLKGEATVS
FDDPPSAKAAIDWFDGKEFSGNPIKVSFATRRADFNRGGGNGRGGRGRGGPMGRGGYGG
GGSGGGGRGGFPSGGGGGGGQQRAGDWKCPNPTCENMNFSWRNECNQCKAPKPDGPGGG
PGGSHMGGNYGDDRRGGRGGYDRGGYRGRGGDRGGFRGGRGGGDRGGFGPGKMDSRGEH
RQDRRERPY"
rep_origin 1947..2402
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 2429..2533
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 2534..3394
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
CDS 3401..4027
/codon_start=1
/gene="tetR"
/product="tetracycline repressor TetR"
/note="TetR"
/note="TetR binds to the tetracycline operator tetO to
inhibit transcription. This inhibition can be relieved by
adding tetracycline or doxycycline."
/translation="MMSRLDKSKVINSALELLNEVGIEGLTTRKLAQKLGVEQPTLYWH
VKNKRALLDALAIEMLDRHHTHFCPLEGESWQDFLRNNAKSFRCALLSHRDGAKVHLGT
RPTEKQYETLENQLAFLCQQGFSLENALYALSAVGHFTLGCVLEDQEHQVAKEERETPT
TDSMPPLLRQAIELFDHQGAEPAFLFGLELIICGLEKQLKCESGS"
rep_origin 4180..4768
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 ccatcgaatg gccagatgat taattcctaa tttttgttga cactctatca ttgatagagt
61 tattttacca ctccctatca gtgatagaga aaagtgaaat gaatagttcg acaaaaatct
121 agaaataatt ttgtttaact ttaagaagga gatatacaaa tggctagctg gagccacccg
181 cagttcgaaa aaggcgccga gaccgcggtc ccgaattcga gctcggtacc cggggatccg
241 atggcctcaa acgattatac ccaacaagca acccaaagct atggggccta ccccacccag
301 cccgggcagg gctattccca gcagagcagt cagccctacg gacagcagag ttacagtggt
361 tatagccagt ccacggacac ttcaggctat ggccagagca gctattcttc ttatggccag
421 agccagaaca caggctatgg aactcagtca actccccagg gatatggctc gactggcggc
481 tatggcagta gccagagctc ccaatcgtct tacgggcagc agtcctccta tcctggctat
541 ggccagcagc cagctcccag cagcacctcg ggaagttacg gtagcagttc tcagagcagc
601 agctatgggc agccccagag tgggagctac agccagcagc ctagctatgg tggacagcag
661 caaagctatg gacagcagca aagctataat ccccctcagg gctatggaca gcagaaccag
721 tacaacagca gcagtggtgg tggaggtgga ggtggaggtg gaggtaacta tggccaagat
781 caatcctcca tgagtagtgg tggtggcagt ggtggcggtt atggcaatca agaccagagt
841 ggtggaggtg gcagcggtgg ctatggacag caggaccgtg gaggccgcgg caggggtggc
901 agtggtggcg gcggcggcgg cggcggtggt ggttacaacc gcagcagtgg tggctatgaa
961 cccagaggtc gtggaggtgg ccgtggaggc agaggtggca tgggcggaag tgaccgtggt
1021 ggcttcaata aatttggtgg ccctcgggac caaggatcac gtcatgactc cgaacaggat
1081 aattcagaca acaacaccat ctttgtgcaa ggcctgggtg agaatgttac aattgagtct
1141 gtggctgatt acttcaagca gattggtatt attaagacaa acaagaaaac gggacagccc
1201 atgattaatt tgtacacaga cagggaaact ggcaagctga agggagaggc aacggtctct
1261 tttgatgacc caccttcagc taaagcagct attgactggt ttgatggtaa agaattctcc
1321 ggaaatccta tcaaggtctc atttgctact cgccgggcag actttaatcg gggtggtggc
1381 aatggtcgtg gaggccgagg gcgaggagga cccatgggcc gtggaggcta tggaggtggt
1441 ggcagtggtg gtggtggccg aggaggattt cccagtggag gtggtggcgg tggaggacag
1501 cagcgagctg gtgactggaa gtgtcctaat cccacctgtg agaatatgaa cttctcttgg
1561 aggaatgaat gcaaccagtg taaggcccct aaaccagatg gcccaggagg gggaccaggt
1621 ggctctcaca tggggggtaa ctacggggat gatcgtcgtg gtggcagagg aggctatgat
1681 cgaggcggct accggggccg cggcggggac cgtggaggct tccgaggggg ccggggtggt
1741 ggggacagag gtggctttgg ccctggcaag atggattcca ggggtgagca cagacaggat
1801 cgcagggaga ggccgtatta actcgacctg cagggggacc atggtctctg atatctaact
1861 aagcttgacc tgtgaagtga aaaatggcgc acattgtgcg acattttttt tgtctgccgt
1921 ttaccgctac tgcgtcacgg atctccacgc gccctgtagc ggcgcattaa gcgcggcggg
1981 tgtggtggtt acgcgcagcg tgaccgctac acttgccagc gccctagcgc ccgctccttt
2041 cgctttcttc ccttcctttc tcgccacgtt cgccggcttt ccccgtcaag ctctaaatcg
2101 ggggctccct ttagggttcc gatttagtgc tttacggcac ctcgacccca aaaaacttga
2161 ttagggtgat ggttcacgta gtgggccatc gccctgatag acggtttttc gccctttgac
2221 gttggagtcc acgttcttta atagtggact cttgttccaa actggaacaa cactcaaccc
2281 tatctcggtc tattcttttg atttataagg gattttgccg atttcggcct attggttaaa
2341 aaatgagctg atttaacaaa aatttaacgc gaattttaac aaaatattaa cgcttacaat
2401 ttcaggtggc acttttcggg gaaatgtgcg cggaacccct atttgtttat ttttctaaat
2461 acattcaaat atgtatccgc tcatgagaca ataaccctga taaatgcttc aataatattg
2521 aaaaaggaag agtatgagta ttcaacattt ccgtgtcgcc cttattccct tttttgcggc
2581 attttgcctt cctgtttttg ctcacccaga aacgctggtg aaagtaaaag atgctgaaga
2641 tcagttgggt gcacgagtgg gttacatcga actggatctc aacagcggta agatccttga
2701 gagttttcgc cccgaagaac gttttccaat gatgagcact tttaaagttc tgctatgtgg
2761 cgcggtatta tcccgtattg acgccgggca agagcaactc ggtcgccgca tacactattc
2821 tcagaatgac ttggttgagt actcaccagt cacagaaaag catcttacgg atggcatgac
2881 agtaagagaa ttatgcagtg ctgccataac catgagtgat aacactgcgg ccaacttact
2941 tctgacaacg atcggaggac cgaaggagct aaccgctttt ttgcacaaca tgggggatca
3001 tgtaactcgc cttgatcgtt gggaaccgga gctgaatgaa gccataccaa acgacgagcg
3061 tgacaccacg atgcctgtag caatggcaac aacgttgcgc aaactattaa ctggcgaact
3121 acttactcta gcttcccggc aacaattgat agactggatg gaggcggata aagttgcagg
3181 accacttctg cgctcggccc ttccggctgg ctggtttatt gctgataaat ctggagccgg
3241 tgagcgtggc tctcgcggta tcattgcagc actggggcca gatggtaagc cctcccgtat
3301 cgtagttatc tacacgacgg ggagtcaggc aactatggat gaacgaaata gacagatcgc
3361 tgagataggt gcctcactga ttaagcattg gtaggaatta atgatgtctc gtttagataa
3421 aagtaaagtg attaacagcg cattagagct gcttaatgag gtcggaatcg aaggtttaac
3481 aacccgtaaa ctcgcccaga agctaggtgt agagcagcct acattgtatt ggcatgtaaa
3541 aaataagcgg gctttgctcg acgccttagc cattgagatg ttagataggc accatactca
3601 cttttgccct ttagaagggg aaagctggca agatttttta cgtaataacg ctaaaagttt
3661 tagatgtgct ttactaagtc atcgcgatgg agcaaaagta catttaggta cacggcctac
3721 agaaaaacag tatgaaactc tcgaaaatca attagccttt ttatgccaac aaggtttttc
3781 actagagaat gcattatatg cactcagcgc agtggggcat tttactttag gttgcgtatt
3841 ggaagatcaa gagcatcaag tcgctaaaga agaaagggaa acacctacta ctgatagtat
3901 gccgccatta ttacgacaag ctatcgaatt atttgatcac caaggtgcag agccagcctt
3961 cttattcggc cttgaattga tcatatgcgg attagaaaaa caacttaaat gtgaaagtgg
4021 gtcttaaaag cagcataacc tttttccgtg atggtaactt cactagttta aaaggatcta
4081 ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca
4141 ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg
4201 cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt gtttgccgga
4261 tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc agcagagcgc agataccaaa
4321 tactgtcctt ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc
4381 tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg
4441 tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt accggataag gcgcagcggt cgggctgaac
4501 ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct
4561 acagcgtgag ctatgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc
4621 ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg
4681 gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg
4741 ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct
4801 ggccttttgc tggccttttg ctcacatgac ccgaca
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pASK-IBA5plus++FUS人源基因质粒
别称: TLS;ALS6;ETM4;FUS1;POMP75;HNRNPP2
启动子: Tet
复制子: pBR322
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：ORF
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pASK-IBA5plus++FUS是一个人源基因大肠表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4836 bp ds-DNA circular SYN 09-八月-2017
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4836
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 36..91
/gene="tetR"
/note="tetR/tetA promoters"
/note="overlapping promoters for bacterial tetR and tetA"
protein_bind 42..60
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O1 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 72..90
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
RBS 130..152
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
CDS 241..1821
/codon_start=1
/note="FUS"
/note="Homo sapiens FUS RNA binding protein (FUS),
transcript variant 1, mRNA
NCBI Reference Sequence: NM_004960.3"
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DTSGYGQSSYSSYGQSQNTGYGTQS-TPQGYGSTGGYGSSQSSQSSYGQQSSYPGYGQQP
APSSTSGSYGSSSQSSSYGQPQSGSYSQQPSYGGQQQSYGQQQSYNPPQGYGQQNQYNS
SSGGGGGGGGGGNYGQDQSSMSSGGGSGGGYGNQDQSGGGGSGGYGQQDRGGRGRGGSG
GGGGGGGGGYNRSSGGYEPRGRGGGRGGRGGMGGSDRGGFNKFGGPRDQGSRHDSEQDN
SDNNTIFVQGLGENVTIESVADYFKQIGIIKTNKKTGQPMINLYTDRETGKLKGEATVS
FDDPPSAKAAIDWFDGKEFSGNPIKVSFATRRADFNRGGGNGRGGRGRGGPMGRGGYGG
GGSGGGGRGGFPSGGGGGGGQQRAGDWKCPNPTCENMNFSWRNECNQCKAPKPDGPGGG
PGGSHMGGNYGDDRRGGRGGYDRGGYRGRGGDRGGFRGGRGGGDRGGFGPGKMDSRGEH
RQDRRERPY"
rep_origin 1947..2402
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 2429..2533
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 2534..3394
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
CDS 3401..4027
/codon_start=1
/gene="tetR"
/product="tetracycline repressor TetR"
/note="TetR"
/note="TetR binds to the tetracycline operator tetO to
inhibit transcription. This inhibition can be relieved by
adding tetracycline or doxycycline."
/translation="MMSRLDKSKVINSALELLNEVGIEGLTTRKLAQKLGVEQPTLYWH
VKNKRALLDALAIEMLDRHHTHFCPLEGESWQDFLRNNAKSFRCALLSHRDGAKVHLGT
RPTEKQYETLENQLAFLCQQGFSLENALYALSAVGHFTLGCVLEDQEHQVAKEERETPT
TDSMPPLLRQAIELFDHQGAEPAFLFGLELIICGLEKQLKCESGS"
rep_origin 4180..4768
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 ccatcgaatg gccagatgat taattcctaa tttttgttga cactctatca ttgatagagt
61 tattttacca ctccctatca gtgatagaga aaagtgaaat gaatagttcg acaaaaatct
121 agaaataatt ttgtttaact ttaagaagga gatatacaaa tggctagctg gagccacccg
181 cagttcgaaa aaggcgccga gaccgcggtc ccgaattcga gctcggtacc cggggatccg
241 atggcctcaa acgattatac ccaacaagca acccaaagct atggggccta ccccacccag
301 cccgggcagg gctattccca gcagagcagt cagccctacg gacagcagag ttacagtggt
361 tatagccagt ccacggacac ttcaggctat ggccagagca gctattcttc ttatggccag
421 agccagaaca caggctatgg aactcagtca actccccagg gatatggctc gactggcggc
481 tatggcagta gccagagctc ccaatcgtct tacgggcagc agtcctccta tcctggctat
541 ggccagcagc cagctcccag cagcacctcg ggaagttacg gtagcagttc tcagagcagc
601 agctatgggc agccccagag tgggagctac agccagcagc ctagctatgg tggacagcag
661 caaagctatg gacagcagca aagctataat ccccctcagg gctatggaca gcagaaccag
721 tacaacagca gcagtggtgg tggaggtgga ggtggaggtg gaggtaacta tggccaagat
781 caatcctcca tgagtagtgg tggtggcagt ggtggcggtt atggcaatca agaccagagt
841 ggtggaggtg gcagcggtgg ctatggacag caggaccgtg gaggccgcgg caggggtggc
901 agtggtggcg gcggcggcgg cggcggtggt ggttacaacc gcagcagtgg tggctatgaa
961 cccagaggtc gtggaggtgg ccgtggaggc agaggtggca tgggcggaag tgaccgtggt
1021 ggcttcaata aatttggtgg ccctcgggac caaggatcac gtcatgactc cgaacaggat
1081 aattcagaca acaacaccat ctttgtgcaa ggcctgggtg agaatgttac aattgagtct
1141 gtggctgatt acttcaagca gattggtatt attaagacaa acaagaaaac gggacagccc
1201 atgattaatt tgtacacaga cagggaaact ggcaagctga agggagaggc aacggtctct
1261 tttgatgacc caccttcagc taaagcagct attgactggt ttgatggtaa agaattctcc
1321 ggaaatccta tcaaggtctc atttgctact cgccgggcag actttaatcg gggtggtggc
1381 aatggtcgtg gaggccgagg gcgaggagga cccatgggcc gtggaggcta tggaggtggt
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1501 cagcgagctg gtgactggaa gtgtcctaat cccacctgtg agaatatgaa cttctcttgg
1561 aggaatgaat gcaaccagtg taaggcccct aaaccagatg gcccaggagg gggaccaggt
1621 ggctctcaca tggggggtaa ctacggggat gatcgtcgtg gtggcagagg aggctatgat
1681 cgaggcggct accggggccg cggcggggac cgtggaggct tccgaggggg ccggggtggt
1741 ggggacagag gtggctttgg ccctggcaag atggattcca ggggtgagca cagacaggat
1801 cgcagggaga ggccgtatta actcgacctg cagggggacc atggtctctg atatctaact
1861 aagcttgacc tgtgaagtga aaaatggcgc acattgtgcg acattttttt tgtctgccgt
1921 ttaccgctac tgcgtcacgg atctccacgc gccctgtagc ggcgcattaa gcgcggcggg
1981 tgtggtggtt acgcgcagcg tgaccgctac acttgccagc gccctagcgc ccgctccttt
2041 cgctttcttc ccttcctttc tcgccacgtt cgccggcttt ccccgtcaag ctctaaatcg
2101 ggggctccct ttagggttcc gatttagtgc tttacggcac ctcgacccca aaaaacttga
2161 ttagggtgat ggttcacgta gtgggccatc gccctgatag acggtttttc gccctttgac
2221 gttggagtcc acgttcttta atagtggact cttgttccaa actggaacaa cactcaaccc
2281 tatctcggtc tattcttttg atttataagg gattttgccg atttcggcct attggttaaa
2341 aaatgagctg atttaacaaa aatttaacgc gaattttaac aaaatattaa cgcttacaat
2401 ttcaggtggc acttttcggg gaaatgtgcg cggaacccct atttgtttat ttttctaaat
2461 acattcaaat atgtatccgc tcatgagaca ataaccctga taaatgcttc aataatattg
2521 aaaaaggaag agtatgagta ttcaacattt ccgtgtcgcc cttattccct tttttgcggc
2581 attttgcctt cctgtttttg ctcacccaga aacgctggtg aaagtaaaag atgctgaaga
2641 tcagttgggt gcacgagtgg gttacatcga actggatctc aacagcggta agatccttga
2701 gagttttcgc cccgaagaac gttttccaat gatgagcact tttaaagttc tgctatgtgg
2761 cgcggtatta tcccgtattg acgccgggca agagcaactc ggtcgccgca tacactattc
2821 tcagaatgac ttggttgagt actcaccagt cacagaaaag catcttacgg atggcatgac
2881 agtaagagaa ttatgcagtg ctgccataac catgagtgat aacactgcgg ccaacttact
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2760/pCDNA3.1-PINK1人源基因质粒 |
| P2828/pcDNA3 HA Arf6人源基因质粒 |
| P2829/pcDNA3 HA Arf6 DN T27N人源基因质粒 |
| P2830/pECMV-3×FLAG-GNAS人源基因质粒 |
| P2874/pECMV-3×FLAG-Fos人源基因质粒 |
| P2875/pECMV-3×FLAG-JUN人源基因质粒 |
| P2920/pECMV-3×FLAG-NAT2(1同义突变2点突变）人源基因质粒 |
| P2876/pEGFP-LHPP-FLAG人源基因质粒 |
| P2877/pcDNA3 HA Arf6 ActQ67L人源基因质粒 |
| P2878/pSLIK-IDH1-R132H-FLAG人源基因质粒 |
| P4840/pCIG-IDH1-R132H-EGFP人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
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引物，并将引物分析结果显示出来。而且进行这些操作非常简单 Oligo 6.57 引物分析著名软件，主要应用于核酸序列引物分析设计软件，同时计算核酸序列的杂交温度（Tm）和理论预测序列二级结构。 Primer D'Signer 1.1 免费的引物设计辅助软件，专门用于pASK-IBA和pPR-IBA表达载体，简化引物设计工作。 Array Designer 2.00 DNA微矩阵（microarray）软件，批量设计DNA和寡核苷酸引物工具 Beacon Designer 1.01
鼠标以扩增出相应片段所需的引物，而在手动的任何时候，下面显示各种参数的改变和可能的二聚体、异二聚体、发夹结构等。也可以给定条件，让软件自动搜索引物，并将引物分析结果显示出来。而且进行这些操作非常简单 Oligo 6.57 引物分析著名软件，主要应用于核酸序列引物分析设计软件，同时计算核酸序列的杂交温度（Tm）和理论预测序列二级结构。 Primer D＇Signer 1.1 免费的引物设计辅助软件，专门用于pASK-IBA和pPR-IBA表达载体，简化引物设计工作。
pASK-IBA5plus++FUS人源基因质粒
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