产品介绍
pAAV-IRES-hrGFP腺相关质粒
基本信息
启动子: CMV,T7
复制子: pUC ori,f1 ori
终止子: hGH poly(A) signal
质粒分类: 病毒系列,腺病毒相关克隆载体
质粒大小: 6.1kb
原核抗性: Amp
克隆菌株: Stbl3
培养条件: 37℃,有氧 LB
表达宿主: 哺乳细胞
诱导方式: 无须诱导,瞬时表达
5'测序引物: T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物: hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA
质粒简介
该质粒pAAV-IRES-hrGFP载体含有在哺乳动物细胞中基因的高水平表达的CMV启动子和其他元素时。该载体还包含构建反向末端重复序列(ITRS),其中直接病毒复制和包装。质粒pAAV-IRES-hrGFP可容纳插入≤1.7 KB。
质粒图谱
pAAV-IRES-hrGFP腺相关质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pAAV-IRES-hrGFP腺相关质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。