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【STR鉴定】KYSE-520
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无
KYSE-520
1x10^6/瓶
继生生物
食管
食管鳞癌细胞
详询
哺乳动物
贴壁
是
顺丰快递
5年
生长良好
【STR鉴定】KYSE-520、KYSE-520细胞、KYSE-520食管鳞癌细胞
-. L-谷氨酰胺(L-Glutamine) 是什么?我的细胞培养需要加L-谷氨酰胺吗?为什么培养条件信息中没有列出?我应该加多少L谷氨酰胺?●L-谷氨酰胺是几乎所有哺乳动物和昆虫细胞在培养过程中所必需的氨基酸。它是许多细胞培养基的重要组成部分,参与蛋白质的合成和核酸代谢,是细胞培养的主要能量来源。所有ATCC配方的经典细胞培养基都含有L-谷氨酰胺。因此,如果-个细胞系按照 ATCC培养条件来培养,它是已经含有L-谷氨酰胺了。如果您购买的培养基中不含L-谷氨酰胺,则必须在使用前将其无莹添加到培养基中。在添加更多L-谷氨酰胺之前,-定要检查基础培养基的配方。哺乳动物细胞的L-谷氨酰胺浓度在0.68 mM (199培养基)到4mM (Dulbecco 改良Eagle培养基)之间变化。
取细胞冻存管一-支, 于40°C水中速融: 25ml细胞方瓶中加入含 10%6COSMIC小牛血清的DMEM-F12培养基10m1,将冻存管中细胞全部洗入瓶中,置37*C2.5%二氧化碳孵箱中静置培养。4小时后倒去全部培养基以去除冻存液,更换10m培养基,同上静置培养。经24小时培养后,生长情况为:经48小时培养后,细胞已长成致密单层: .致密单层细胞在细胞瓶上呈露状,使瓶壁呈半透明:弃去培养液,在此可先摇动细胞瓶,使老化死亡贴壁情况不好的细胞随培养液弃去。加入0.25%胰酶后,细胞逐渐皱缩变圆,细胞间隙增大不再致密:刚加入胰酶,细胞仍呈致密单层:细胞开始皱缩但不明显,仍维持细胞正常形态:细胞明显皱缩变小,细胞间隙增大不再致密,部分细胞维持正常形态,部分细胞皱缩变圆:细胞基本皱缩变园,此时细胞吹打可下:细胞完全皱缩变圆,此时应弃去胰酶,加入培养基后轻摇可将细胞从细胞瓶壁上洗下,将细胞悬液用吸管吹散后传代。有经验后,可肉眼对光观察帖壁半透明的细胞层,判断消化程度。如消化过头,会见到许多细胞脱落随弃去的胰酶溶液流失。也可以在倒数第二二、三步时弃去胰酶,用瓶中残留的胰酶继续作用至最后一步的消化程度,这样略有点过也影响不大
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