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- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
cell
- 库存:
10
- 细胞形态:
上皮/成纤维/淋巴样
- 运输方式:
顺丰快递
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
T25/瓶
产品规格:复苏发货,1×10^6/T25瓶
细胞收到后处理:细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
HPAEC人肺动脉内皮细胞说明,由我公司出售的人源细胞基本都有STR,动物源细胞没有数据库所以动物细胞是没有STR的,如下图人SU-DHL-4细胞STR检测报告:

在我公司购买细胞也可以索取该细胞正常图,以下图示H69细胞和HCM3细胞为例:

培养步骤: 一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:非无血清冻存液方法,无血清冻存液方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃。
如需更多相关细胞,请咨询我们:HPAEC人肺动脉内皮细胞
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文献和实验4个样本——scRNA-seq——常规单细胞测序生信分析 。 总结 4个样本——scRNA-seq——常规单细胞测序生信分析——简单免疫组化验证。 研究目的:利用单细胞RNA测序(scRNA- seq)构建一个细胞图谱,全面描述慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)患者的肺动脉内膜切除组织的细胞组合特征; 样本信息:5个肺动脉内膜切除的组织; 测序策略:10x平台,单细胞测序(scRNA-seq) 捕获细胞数:27,140细胞; 结论:发现了17个细胞簇的特征,对应10,518
的横向分辨率达90纳米,是目前国际上同类技术的最好水平。 此次研究组与第四军医大学和德国康斯坦茨大学合作,利用该系统成功获得了牛肺动脉内皮细胞线粒体和小鼠脑神经元细胞的超分辨图像,并且实现了小鼠脑神经元细胞和植物花粉的三维光切片成像,其成像深度和成像速度比当前同类切片显微技术均提高了约10倍。 原文链接:DMD-based LED-illumination Super-resolution and optical sectioning microscopy
就如上新手进阶要点总结之后,笔者总结了一下免疫荧光需要特别关注的细节,以期作出更完美的图片效果。1、了解及预测蛋白的定位例如:下图使用肺动脉内皮细胞( BPAE)观察线粒体的显色,采用 405nm,488nm,561nm 的激光,100x NA 1.49 的物镜对细胞内线粒体的分布进行简单的观察,此图可见,单纯的 mito-tracker 并不能清晰看见线粒体内部的结构和蛋白相关关系,因此,明确蛋白定位,根据所需分辨率选择显微镜、相应的荧光蛋白和探针非常重要。比如研究者应大致预测观察目标是存在
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