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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
cell
- 库存:
10
- 细胞形态:
上皮/成纤维/淋巴样
- 运输方式:
顺丰快递
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
T25/瓶
产品规格:复苏发货,1×10^6/T25瓶
细胞收到后处理:细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
PC12-未分化PC12未分化细胞说明,由我公司出售的人源细胞基本都有STR,动物源细胞没有数据库所以动物细胞是没有STR的,如下图人SU-DHL-4细胞STR检测报告:

在我公司购买细胞也可以索取该细胞正常图,以下图示H69细胞和HCM3细胞为例:

培养步骤: 一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:非无血清冻存液方法,无血清冻存液方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃。
如需更多相关细胞,请咨询我们:PC12-未分化PC12未分化细胞
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文献和实验丁香园myl0605的观点:前几天为自己养的PC12是未分化还是分化型困扰,查了一些资料,现发上来希望能给有同样问题的战友有一点帮助!培养条件:PC12细胞培养于铺有鼠尾胶原的玻璃培养瓶中,置于CO2培养箱(37℃,95%空气5%CO2),培养基选用DMEM(pH7.4,高糖),加入10%灭活小牛血清及5%灭活马血清。分化前:PC12细胞在培养基中多呈圆形,直径15~20μm,也有椭圆或多角形的,扁平的细胞少见,倾向于聚集成小团簇状(A图)。分化后:加入NGF后的24h内细胞停止分裂,长出似
细胞大量丢失,尤其是孔中央那块。不知有没有什么好方法能解决这个问题。(注:未分化细胞吸弃培养基没有这个问题)。 另外,大家在用最近一批Hyclone Equine serum(马血清)时PC12的培养有没有聚团漂浮的问题。我最近换了四次不同公司代理的Hyclone马血清(均是在Aug/2008~Mar/2009左右到期),无论灭活还是不灭活PC12总出现这个问题。而用我以前仅剩的一瓶Aug/2008到期的马血清细胞却生长良好。现在这瓶也快用完了,而订Gibco的要一个月,真不知该怎么办了。(PC12
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株,具神经内分泌细胞的一般特征,因其具可传代特点,广泛应用于神经生理和神经药理学研究。1. PC12细胞有两种:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12细胞贴壁能力强,传代时需要胰酶消化,形状不规则。分化型PC12细胞传代时不需要胰酶,直接可以吹下来,形状规则。这两种细胞没有很大的区别,但我在实验中发现,未分化型的PC12细胞对药物的敏感性较之分化型的要差一些。2. 由于PC12细胞是一种肿瘤细胞,在传代次数较多后,它的形状和性状会发生改变。这些改变尤
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