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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
cell
- 库存:
10
- 细胞形态:
上皮/成纤维/淋巴样
- 运输方式:
顺丰快递
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
T25/瓶
产品规格:复苏发货,1×10^6/T25瓶
细胞收到后处理:细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
M-7人胚胎成纤维细胞说明,由我公司出售的人源细胞基本都有STR,动物源细胞没有数据库所以动物细胞是没有STR的,如下图人SU-DHL-4细胞STR检测报告:

在我公司购买细胞也可以索取该细胞正常图,以下图示H69细胞和HCM3细胞为例:

培养步骤: 一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:非无血清冻存液方法,无血清冻存液方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃。
如需更多相关细胞,请咨询我们:M-7人胚胎成纤维细胞
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选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考:(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。(2)其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。(3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。细胞系细胞类型种组 织培养基293成纤维细胞人胚胎
人胚胎肾MEM, 10% 热灭活马血清IMR-90成纤维细胞人肺MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAAW1-38成纤维细胞人胚胎肺,3月妊娠MEM, 10% 胎牛血清A549上皮细胞人肺癌F-12K, 10%胎牛血清A431上皮型人表皮细胞癌DMEM, 10% 胎牛血清BHL-100上皮细胞人乳房McCoy'5A, 10% 胎牛血清BeWo上皮滋养层人绒毛癌F-12K, 15%胎牛血清Caco-2上皮细胞人结肠腺癌MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAAChang上皮细胞人肝脏BME, 10
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