液态芯片的原理
编码微球:分别用不同配比的两种荧光染料将直径5.6μm的聚苯乙烯微球(Beads)染成不同的荧光色,从而获得多达100种经荧光编码的微球。交联探针、抗体或抗原:把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到特定荧光编码的微球上。 检测反应:先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码的微球混合,再加入被检测物(可以是血清中的抗原、抗体或酶等,也可以是PCR产物)。 悬液中的微球与被检测 ...
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表达谱基因芯片实验操作流程
一、试剂1. TRIzol 2. 异丙醇 3. 氯仿 4. 75%乙醇(RNase-free) 5. Milli-Q水(RNase-free) 6. 无水乙醇 7. dNTPs 8. Cy5-dCTP和Cy3-dCTP 9. 杂交试剂1 10. 标记试剂I 11. 杂交试剂2 12. 标记试剂II 13. 反转录酶 14. 标记试剂III 15. 反转录引物 16. ...
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TaqMan探针基因表达分析全面升级
TaqMan探针对于大家来说不是什么新名词了,然而你知道吗,对于部分降解的RNA,如福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)样品中的RNA,TaqMan引物探针的设计有更多的讲究,你知道这是为什么吗?FFPE样本在固定时导致核酸相互交联且片段化,RNA片段的大小在50-300 nt,大部分片段在100 nt左右,这些没有3'端的RNA不能使用oligo-dT来逆转录,如用随机引物大量非目标RNA模板(如 ...
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芯片扫描仪的选择(图)
假如你问一个研究人员选择芯片扫描仪(microarray scanner)的时候,主要考虑什么性能?他们很可能回答说:“速度和分辨率”,因此不用感到奇怪生产厂商会在这些关键性能上下大功夫。从以下列出来的芯片扫描仪产品你就可以看到,在扫描芯片的速度和分辨率性能方面总是会出现一山还比一山高的情况。然而对于许多研究人员来说,处理能力和易操作性渐渐也成为了他们挑选芯片扫描仪时的选择 ...
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