关键词: 酵母 破壁 液氮 研磨
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问:求教酵母破壁的液氮研磨方法的详细步骤,需要什么试剂?
答:取1L酵母,诱导完后,离心(centrifugation)收菌体,称湿重,用蛋白(protein)纯化buffer悬浮菌体,重量(g):buffer体积(毫升)=1:1--1:2。用注射器将菌液加入液氮中,控制加入速度,使得菌液进入液氮中后形成小颗粒,太快容易结成块。将菌体液氮颗粒转入高速打碎器(用的是打碎草药的机器,RMB600)中,注意不要将多余液氮倒入,大约2-3万转/分破碎1分钟,菌体颗粒应该成粉末状。倒出粉末,37度水浴融化后,再用注射器加入液氮中,重复上述步骤,重复3次。高速(20000rpm,4度30分)离心(centrifugation)收上清,如上清杂质较多,需要多离几遍,上清中目标蛋白(protein)纯化同E.coli.
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分不出病毒的原因
我用SPF鸡胚培养病毒,结果老是分不出来,这是什么原因?楼主能不能帮我分析一下,感激不尽。
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豆辩实验大肠菌群
我想去学但我不憧怎么快速学
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高密度发酵与目的产物之间的关系如何
如题,我认为,对于表达蛋白分子量大的,可能OD上去就相对难点,请问各位这种理解是否正确?如何设计实验?
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