关键词: 免疫组化攻略 师兄精选 菜鸟
来源: 丁香园
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免疫组化是一门比较传统的技术,国外杂志对此还很重视,今天师兄就先跟你们简单侃侃,侃的不好,勿喷哈。想从师兄这里了解更多前沿技术的同学,加我微信:shixiongcoming,记得备注申请理由哦。
基础知识
免疫组织化学( immunohistochemistry )又称免疫细胞化学( immunocytochemistry ),是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。点这里→ 阅读全文
免疫组化SABC法
SABC (Strept Avidin-Biotin Complex) 法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法,是众多免疫组织化学方法的一种。SABC法:一抗+ 生物素标记二抗+ 滴加试剂SABC(链霉卵白素+ 辣根酶标记生物素)+ 辣根酶底物显色。目前常用的亲和素从链霉菌(streptomyces)培养物中提取,因此称为链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物技术(streptavidin biotin-peroxidase complex method,SABC法)。限于篇幅,详细的操作步骤,点这里→ 阅读全文
免疫组化 Elivison 二步法
EnVision 显色系统是将二抗和酶通过一个多聚葡聚糖骨架联接成一个多聚体(即 EnVision)直接放大信号40-50倍,把传统的二抗、三抗分别孵育合为一次孵育。特点:敏感、省时、方便、背景低(避免了内源性生物素干扰)。限于篇幅,详细的操作步骤,点这里→阅读全文
细胞免疫荧光染色法
其实免疫组化与免疫荧光的原理都是一样的,唯一不同的是,只不过前者二抗用的是辣根酶标记,后者用的是荧光素标记的。又是篇幅问题,师兄举例的三种细胞免疫荧光染色的实验步骤,点这里→ 传送门
免疫组化各步骤中应注意事项
完美的免疫组化实验,需要不断地收集前人的经验,并不断的优化细节,才能屡战屡胜,点击→ 传送门
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细胞及组织标本的要求
细胞及组织标本要经过甲醛处理吗?还是要无菌的
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中杉金桥的二步法免疫组化试剂盒要不要加封闭液
我买了中杉金桥超敏二步法免疫组化试剂盒,说明书上没写要加封闭液,可以不封闭吗,还是另外买山羊血清?
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为什么切片组织总是有横向裂纹,组织状态镜下不好
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