关键词: 纤维素刚果红 培养基 筛选 纤维素酶 产生菌
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问:我先后做了两批纤维素刚果红培养基筛选菌种,接种后,发现第一批能产生红色水解圈,而第二批能产透明圈.这两批培养基的配方完全相同,我想请教一下,到底应该产生什么效果?
答:利用纤维素刚果红培养基筛选菌种的原理是:
1、刚果红可以跟大分子多糖牢固结合。
2、纤维素是大分子多糖,跟刚果红牢固结合。
3、纤维素酶降解平板中的纤维素成小分子糖,那么刚果红无法与小分子糖结合,就被洗脱下来,呈现透明圈。
4、在通常的纤维素刚果红培养基筛选菌种的程序中,先用含有纤维素的平板培养菌,等菌长出来后,把菌体刮离,然后加入刚果红染色10-15分钟,再用NaCl冲洗2-3次,产生透明圈的就是能水解纤维素的菌。也可以把刚果红直接加到平板中,菌在生长过程中也会逐渐形成透明圈,不过前面的方法更为灵敏。
那么为什么会有红色水解圈,而第二批能产透明圈呢?实际上,这个纤维素的降解透明圈应该是淡黄色的,而如果随着多糖的分子量的变化,刚果红结合程度就会发生变化,导致颜色从深红色到淡黄色的变化。这就是为什么两批染色有不同结果。
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