标签: 物理显影液配制 免疫组织化学实验技术及应用 第六章
本实验介绍各种物理显影液和的配置方法。来源《免疫组织化学实验技术及应用》
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1. 1% 明胶 60 ml。
2. 柠檬酸缓冲液 10 ml,pH3.4(柠檬酸 2.55 g,柠槺酸钠 2.35 g,加水至 10 ml)。
3. 对苯二酚 1~1.7 g,加水至 30 ml。
4. 硝酸银 50~100 mg,加水至 2 ml。
5. 用前 1~3 液混合过滤,最后加入 4 液。
1. 10%~20% 阿拉伯树胶 60 ml。
2. 柠檬酸缓冲液(配法同上)。
3. 对苯二酚 0.85 g,加水至 15 ml。
4. 乳酸银 110 mg,加水至 15 ml。
5. 以上 1~3 液用前混合过滤,最后加入 4 液。
1. 100 mg 醋酸银溶解在 50 ml 三重蒸馏水中,用前 1 h 配制,并充分搅拌。
2. 10% 明胶 10 ml。
3. pH 3.5~3.8 柠檬酸盐缓冲液 40 ml(内含 600 mg 对苯二酚)。
4. 用前分别将 2、3 两液过滤混合,然后加入 50 ml 醋酸银液搅拌混匀。
A 液:二乙基对苯二胺硫酸盐(TSS)200 mg,无水碳酸钠 2 g,溴化钾 100 mg,无水亚硫酸钠 200 mg,加蒸馏水至 90 ml 搅拌溶解。
B 液:α-萘酚 200 mg,加异丙醇 10 ml,或对硝基苯乙腈(碱性品红)200 mg 溶于 10 ml 丙酮中。
临用前 A、B 两液混合,过滤后在室温下即可显色。
漂白液
在 10 ml 蒸馏水中加入 10 g 铁氰化钾和 5 g 溴化钾。
定影液
铁氰化钾 5 g、溴化钾 2.5 g、硫代硫酸钠 3 g 依次加入到 95 ml 蒸馏水中,最终加水至 100 ml。
缓冲液
缓冲液 I:0.02 mol/L(pH 7.4)TBS(内含 0~1% Triton X-100,0~1% BSA,0.01% NaN3)。
缓冲液 II:0.05 mol/L(pH 8.2)TBS(内含 0~1% BSA,0.01% NaN3)。
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