标签: 小鼠 巨噬细胞 活化 精编免疫学实验指南 第六章
巨噬细胞的活化经历两个阶段:致敏阶段和激活阶段。活化巨噬细胞的方案多采用一步法(致敏并且激活),本方案则明确区分巨噬细胞活化的这两个阶段。经过一段时间诱导后(48〜72h),可检测巨噬细胞对病原体(如寄生虫或细菌;单元6.5和6.6)的杀伤作用或所合成的活性氮介质(reactivenitrogenintermediates,RNI;单元6.5)。 作者:J.E.科利根等,译者:曹雪涛等,本实验来自「精编免疫学实验指南」
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小鼠巨噬细胞,静 息 状 态(单 元 6.1)
D M E M - 10 : 含 1 0 % (V /V ) FBS (HyCloxie) 和 50 ug/1111 硫酸庆大霉素的 D M E M
培 养 基(G I B C O /B R L )
炎性巨噬细胞:促炎剂刺激后的小鼠腹腔巨嗟细胞(单 元 6.1)
2 4 孔 平 底 细胞培养板(Costar)
1 . 设置实验组和对照组(见基本方案步骤 1),在 2 4 孔板中每孔加入 0.5m l 细胞悬液。
2 . 置 37°C , 5 % C 〇 2 细胞培养箱中培养 I h 使巨噬细胞贴壁。
3 . 弃上清后,沿孔壁缓慢加入 Iml D E M E M - I O 培养基,避免破坏贴壁细胞层。重复洗涤 2 次 ,最后加入 0.5 ml D E M E M - I O 培养基。
4 . 致敏及激活巨噬细胞,参见基本方案步骤 2 和 4 。
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