标签: 离子交换层析 肌醇磷脂 精编免疫学实验指南 第三章
受体介导的磷脂酶C(PLC)的活化引起膜肌醇磷脂的水解,产生二酰甘油(DAG)和水溶性肌醇磷酸。T细胞和B细胞抗原受体均利用此信号机制,因此,该机制可能介导了受体诱导的胞外Ca2+内流过程。 作者:J.E.科利根等,译者:曹雪涛等,本实验来自「精编免疫学实验指南」
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[3 H ] InsP 样 本(见基本方案,步 骤 6) 和标准品 除 气 的 H PLC 级水 2mol/L 的甲酸铵,以磷酸调至 pH3.7
1 % (m/V ) 草酸钾/2m m ol/LED TA
溶剂: 60 : 20 : 23 : 18 : 12 (V7 V /V7 V 7 V ) 氯仿/甲醇/丙酮/乙酸/水 ,或 45 :35 : 10 氯仿/甲醇/4mol/L NH4OH
细 胞(如肿瘤细胞系、杂交瘤、克隆、凝集素刺激的细胞)
无 磷 酸 盐 的 培 养 基(如 GIBCO/BRL) 含 有 1 0 % (V /V ) 热 灭 活 的 胎 牛 血 清(FCS) , 用 HBSS 或 TBS (附录 1 ) 透析以去除磷酸盐
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