高效液相色谱-串联质谱法检测固醇类激素

1. 取样： 称取约500 g动物肌肉、肝脏，完全切碎后，匀浆备用；取10枚鲜蛋，去壳，均质备用；取鲜牛奶500 mL，混匀备用。

2. 提取：试样5 g，置于50 mL离心管中，加入10 %碳酸钠溶液3 mL和10 mL乙酸乙酯，均质30 s，振荡10 min（4℃），6000 r/min离心10 min，将上层有机相转移至梨形瓶中。再用10 mL乙酸乙酯重复提取一次，合并上层有机相。在40℃下，旋转蒸发至干。用50 %乙腈水溶液1 mL溶解残余物，溶液冷冻30 min，16000 r/min离心5 min，取适量溶液经0.22μm滤膜过后，供LC/MS/MS法测定。

3.  进样分析

2. LC-MS接口避免进入不挥发的缓冲液，避免含磷和氯的缓冲液，含哪和钾的成分必须<1mmol/1，盐分太高会抑制离子源的信号和堵塞喷雾针及污染仪器。

3. 选择合适的电压：当DP电压（去簇电压）高时，样品在源内分解或碎裂，也会使得多电荷离子比例低，多聚体也减少。

2.  正、负离子模式的选择：一般原则为正离子适合碱性样品，可用于乙酸或甲酸对样品加以酸化，样品中含有仲氨或叔氨时可优先考虑使用正离子模式。负离子适合酸性样品，可用氨水对样品进行碱化。

3.来源于《药物色谱分析》丁黎主编。