- 移动端
普康智合（成都）生物制品有限公司
1 年
手机商铺
- NaN
- 0
- 1
- 0
- 3
推荐产品
公司新闻/正文
四川团队发现新型重组PRRSV高致病毒株：疫苗与野毒重组引发仔猪全军覆没！
163 人阅读发布时间：2025-11-12 16:23
2025年7月2日，西南民族大学动物与兽医学院张志东、周龙团队联合四川省动物科学研究院在国际期刊《Frontiers in Veterinary Science》发表新研究，报道了一株由野生型病毒与改良活病毒疫苗（MLV）杂交产生的新型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），命名为GX2024株。该毒株在中国四川省的一个猪场中分离，对仔猪表现出极强的致病性（100%死亡率）。
研究亮点
· 首次发现L1C.5 RFLP-1-4-4型PRRSV重组株在中国的强毒特征
· 该毒株由三种来源重组而成：NADC30样野毒株（L1C.5）+高致病JXA1样株（L8E）+商业活疫苗株RespPRRS MLV（L5A）
· 感染仔猪后，引发高热（40–42°C）、严重肺出血与水肿，14天内全部死亡
· 显示目前MLV疫苗在野毒流行区存在重组风险与免疫逃逸问题
2024年，科研团队在四川一养殖场发现母猪出现流产和死胎，仔猪发生急性死亡。经过细胞分离与全基因组测序分析，确认新毒株GX2024属于PRRSV-2系谱中的L1C.5类型。
进一步基因分析显示，该毒株是由NADC30样野毒株、高致病JXA1样株以及改良活病毒疫苗株（MLV）共同重组而成的新型多重重组病毒。
动物攻毒实验表明，GX2024具有极高的致病性，感染仔猪在短时间内全部死亡，伴随严重的出血性肺炎和肺水肿，淋巴结明显肿大并出血，同时体内病毒载量快速上升，血清抗体水平显著提高。
引言
猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是全球养猪业最具破坏性的病毒病之一。近年来，中国猪场中NADC30样（L1C）毒株逐渐成为优势流行株，而RFLP 1–4-4型的出现引发全球关注。
由于不同谱系毒株和活疫苗的并存，PRRSV基因重组事件频繁，导致病毒变异复杂、疫苗防控困难。
研究结果
1. 新型毒株GX2024的分离与鉴定：
· 从四川某接种RespPRRS MLV疫苗的猪场中，采集出现严重呼吸道症状的仔猪肺组织，经Marc-145细胞和猪肺泡巨噬细胞（iPAMs）分离得到PRRSV毒株GX2024，基因组全长15018nt（GenBank登录号：PV362838）。
图1. PRRSV GX2024的病毒分离
(a)将iPAM和Marc-145细胞接种PRRSV GX2024，感染后60小时进行检测；(b)使用iPAM细胞，以10⁻¹⁰稀释度的病毒原液进行GX2024分离株的噬斑试验；(c)将iPAM和Marc-145细胞用六代病毒培养物感染48小时，并用抗N PRRSV单克隆抗体进行IFA检测。细胞核用DAPI染色。比例尺=75μm。
· 该毒株NSP2基因存在与NADC30毒株一致的131个氨基酸不连续缺失（322-432位缺失111aa、483位缺失1aa、504-522位缺失19aa），且GP5蛋白存在独特氨基酸突变（P¹⁵→L¹⁵、F²³→S²³ 等），与国内外L1C毒株差异显著。
图2. NSP2和GP5的多序列氨基酸比对
(a) GX2024和NADC30样毒株的NSP2中322–432、483和504–522位氨基酸存在三个不连续缺失（蓝色区域）。浅红色区域表示中国高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV，JXA1样毒株）的氨基酸缺失。(b) GX2024毒株和来自中国及美国的17株L1C PRRSV参考毒株的GP5氨基酸序列的多序列比对。紫色方框表示信号肽区域，红色方框表示高变区（HVR1和2），黄色方框表示跨膜结构域（TM1、2和3）。
2. 基因组重组分析证实三重重组起源：
通过RDP4和SimPlot软件分析，发现GX2024基因组存在5个重组断点，分别位于ORF1a、ORF1b、ORF3 和ORF4区域：
· ORF1a（1-1868nt）、ORF1b（3565-9392nt）区域与JXA1-like（L8E）毒株同源性最高；
· ORF3（12688-13172nt）区域与RespPRRS MLV疫苗毒株同源性达90.1%，高于其亲本VR-2332毒株；
· 其余区域（1869-3564nt、9393-12687nt 等）与NADC30-like（L1C.5）毒株高度同源，证实其为三重重组毒株。
表1. GX2024与11个PRRSV参考毒株的核苷酸同一性比较
表2. 在GX2024中检测到的重组事件信息
图3. GX2024分离株的基因组重组分析
3. 致病性实验：100%致死率凸显高危险性
对9头4周龄无PRRSV抗体仔猪进行攻毒实验（5头攻毒、4头对照）：
· 攻毒组仔猪3天出现40℃以上高热，4-14天出现呼吸困难、共济失调、腹泻等症状，14天内全部死亡（死亡率100%）；对照组无任何异常。
图4. PRRSV分离株GX2024在仔猪中的致病性分析
(a)本研究的动物实验设计。(b)接种GX2024和未感染RPMI-1640培养基的仔猪的直肠温度。临床发热的临界值设定为40.0℃。(c)攻毒试验中第3、7、10和14天的临床症状评分。评分包括临床症状、呼吸系统症状和神经系统症状。(d)接种仔猪的存活曲线和死亡率曲线。(e)攻毒试验期间接种仔猪的平均每周增重。
· 病理检查显示，攻毒仔猪肺组织出现严重实变、水肿和出血，肺泡间隔增厚、上皮细胞坏死，淋巴结皮质与髓质界限模糊、淋巴细胞减少且出血；免疫组化证实肺和淋巴结中存在大量PRRSV抗原。
图5. 接种仔猪的肺和淋巴结病变观察
· 病毒载量检测显示，攻毒后7天血清病毒载量达峰值，肺组织病毒载量显著高于其他组织，且7天内所有攻毒仔猪均产生PRRSV特异性抗体（S/P>0.4）。
图6. 血清和组织中病毒载量及猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 特异性抗体的检测
总 结
本研究首次报道了一株由野毒株与疫苗株重组形成的高致病性L1C.5 RFLP-1-4-4 PRRSV，其对仔猪具有极强的致死性。该毒株的出现对当前PRRS疫苗防控策略提出严峻挑战，提示需加强病毒监测、优化疫苗设计，并重视生物安全与综合防控措施。