你真的了解Ⅰ型非洲猪瘟毒株吗？（上篇）

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2021年6月，在山东，河南的两个养猪场，育肥猪出现了慢性感染症状，包括体重下降、间歇性发热、皮肤溃疡和关节炎；还观察到了零星死亡。从四头死猪中采集了包括淋巴结和脾脏在内的样本，并送至CNASFPL进行ASFV检测。

通过针对病毒p72基因的qPCR检测，确认所有样本均为ASFV阳性，进一步对p72基因的序列分析表明，这些样本中的ASFVs属于I型。随后，从山东和河南省的养猪场样本中分离出两种基因型的ASFV病毒株，分别命名为猪/山东/DY-I/2021（SD/DY-I/21）和猪/河南/ZZ-P1/2021（HeN/ZZ-P1/21）。

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#01 动物实验

每天监测每头猪的体温变化和症状，包括厌食、抑郁、发烧、皮肤变紫、步态蹒跚、腹泻和咳嗽，持续观察28 天。

#02 体温变化

肌内接种 SD/DY-I/21毒株，每天测量猪的体温。从第3天到第18天所有受攻击的猪都表现出不同程度的间歇性发热。低剂量组同居猪只有头在试验开始后的第26天出现发热高剂量组同居猪两头在试验开始后的第23天均出现发热。10组在肌注病毒后的第16天出现死猪一头。

基因型I ASFV分离株SD/DY-I/21感染猪后，所有接种组均出现间歇性发热（感染后第3至18天），其中高剂量组（10⁶ TCID₅₀）症状更明显（全身丘疹、关节炎、皮肤坏死等），但所有猪存活至28天观察期结束。低剂量组（10³ TCID₅₀）中1头猪因严重内脏病变死亡，其余存活。病毒DNA在口腔拭子（最早第5天）、直肠拭子（第7天）和血液（第7天）中持续检出超28天，表明病毒长期复制与脱落。

#03 症状

存活猪的丘疹(A,B)、皮肤坏死(B,C)和后腿关节(B,D)。10’组的一头猪(3号)在感染后第 16天发病并死亡。尸检观察到死前鼻孔出血，脾脏、肝脏和淋巴结充血肿胀。

图2  从实验开始计时出现症状的天数a无疾病迹象。b猪存活于感染。

基因型I ASFV分离株SD/DY-I/21可通过接触传播，感染猪表现为慢性症状（发热、关节炎、皮肤病变）。病毒DNA在口腔拭子中较早（感染后5-9天）且持续检出，直肠拭子和血液中脱落较晚。感染猪组织中病毒载量较高（脾、肺、骨髓等），接触传播后病毒在肺、扁桃体等组织中低水平存在，但所有接触猪均存活，提示其传播效率有限但具备持续感染能力。

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每隔一天收集猪的口腔和直肠拭子以及血液样本，通过qPCR检测病毒DNA。

图3  口腔、粪便、血液的带毒情况

口腔依然是最早排毒，但是检测的CT值均小于30。

图4  带毒情况与抗体转阳情况

A从横坐标依次是心、肝、脾、肺、肾、扁桃体、胸、肾上腺、骨髓、关节液、LN1肠淋巴结、LN2腹股沟淋巴结、LN3 领下淋巴结、LN4 支气管淋巴结、LN5胃肝淋巴结、LN6纵隔淋巴结。

基因型I ASFV毒株SD/DY-I/21感染后，接种猪和接触猪均产生针对p72蛋白的IgG抗体（高剂量组第7天检出，低剂量组第9天检出），抗体水平随时间上升。接触猪在感染后21-27天血清转化，证实病毒可通过接触传播。病毒在猪体内长期复制与排毒，口腔、直肠拭子及血液中病毒DNA持续检出超28天，且感染猪组织（脾、肺、淋巴结等）中病毒载量较高，表明慢性感染中病毒持续复制并脱落，增加传播风险。

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