Chinese Medicine|成都中医药大学团队针刺通过 Nrf2/HO-1 通路减轻心肌缺血 / 再灌注损伤诱导的铁死亡

模型构建：采用C57BL/6雄鼠，对小鼠进行禁食、麻醉等处理后左冠状动脉结扎，30 min后再灌注，构建MIRI模型。

实验方案和穴位位置

A、 实验方案  B、 PC6（内关）穴的位置  C、 假穴的位置

EA组：建模前7天每日接受电针治疗（2 Hz，20 min）

抑制剂/激动剂组：同步腹腔给药

模型检测：

心超:左心室射血分数（EF）和短轴缩短率（FS）

心脏磁共振成像技术MRI:T2*铁沉积

生化检测：CK、CK-MB、LDH、Fe²⁺、MDA

其他：WB/qRT-PCR/HE染色检测相关指标的表达水平

主要研究结果

MIRI 诱导心肌细胞铁死亡：

A 假手术（SO）和MIRI小鼠血清中Fe2+3的含量；n=6；

B SO和MIRI小鼠心肌中Fe4+5的含量；n=6；

C SO和MIRI小鼠血清中的丙二醛（MDA）水平；n=6；

D 通过流式细胞术检测SO和MIRI小鼠心肌中的活性氧（ROS）表达，并展示了门控策略和分析程序。

针刺减轻心肌细胞铁死亡和减少心肌铁沉积：

结果显示，与 MIRI 组相比，MIRI+ 电针（EA）组血清 Fe2+水平上升，心肌 Fe2+水平下降，MDA 和心肌细胞内 ROS 水平显著降低，且 MIRI + EA 组治疗效果优于 MIRI + 假针刺（SA）组。同时，铁死亡标志物谷胱甘肽过氧化物酶 4（Gpx4）和线粒体铁蛋白（FtMt）在 MIRI+ EA组显著增加；心脏磁共振成像结果也表明，MIRI + EA 组比 MIRI 组和 MIRI + SA 组更能有效减少心肌铁沉积。

针刺可缓解MIRI，有保护心脏功能：

与MIRI组相比，MIRI+EA组血清心肌酶CK、CK-MB和LDH水平显著降低；与MIRI+SA组相比，MIRI+EA组的CK和CK-MB水平有更大的改善。

 HE染色观察心肌细胞形态，在MIRI组中，观察到心肌纤维排列紊乱，明显的炎症细胞浸润（黑色箭头）和单个心肌细胞坏死（黄色箭头），这些病理变化在EA治疗后得到明显改善，与SA相比，EA显示出更好的效果。

针灸可能通过Nrf2/HO-1通路调节铁死亡：

T-qPCR结果显示，与SO组相比，MIRI组的Nrf2和HO-1 mRNA水平显著降低，而MIRI+EA组的mRNA水平与MIRI组相比显著升高。此外，与MIRI+SA组相比，MIRI+EA组表现出更好的效果。

基于Western blotting和双免疫荧光染色，心肌组织中Nrf2和HO-1分析显示出相同的趋势，结果表明EA干预增加了Nrf2和 HO-1的表达。

Nrf2 抑制剂部分阻断针刺的抗铁死亡和心脏保护作用

结果显示，与 MIRI+ EA组相比，MIRI+ EA+ ML385 组 Nrf2和 HO-1表达降低，心肌酶和血清炎症细胞因子水平升高，EF和FS值下降，铁死亡相关指标变化表明 EA 的抗铁死亡和改善铁沉积作用被阻断。而MIRI+DMF组与MIRI+EA 组在各指标上趋势相似，说明EA治疗效果与DMF类似，针刺主要通过Nrf2/HO-1通路发挥对MIRI的保护作用。