突破传统！激酶研究-实时检测！

Tarceva，EGFR的抑制剂梯度稀释到0.085nM-5000nM 之后与EGFR 野生型和突变体 （T790M/L858R）混合反应。结果证明突变体比野生型对抑制剂的敏感性降低了380倍，表明突变体具有较强的抗药性。

2、用跳跃式稀释法以及抑制剂停留时间来衡量决定抑制剂的可逆性-区分共价抑制剂以及可逆抑制剂，了解抑制作用是否与时间相关

 

用跳跃稀释法测量抑制剂停留时间。用高于IC5025x倍浓度的抑制剂和EGFR(T790M/C797S/L858R) 突变体混合反应60分钟。之后把反应混合物稀释250倍之后读取荧光。结果表明化合物B和D是不可逆抑制剂。化合物A和C是可逆的抑制剂。

3、kinact/Ki是衡量非可逆抑制剂的绝佳参数-用全球适用性分析以及反应曲线来全面诠释共价键抑制剂的作用机理

 

用kinact/Ki 结果来衡量不可逆抑制剂。Log IC50 vs. kinact/Ki 显示很多抑制剂虽然有类似的IC50，却有截然不同的kinact/Ki

此外，还可用于Phosphatase的研究。


 

上图：用Phosphosens AQT0737测量磷酸酶SHP-1以及SHP-2的活性

上图：用PhosphosensAQT0266底物获取的PTP1B梯度稀释线性数据
 

Kinetic and Endpoint

Assayquant的技术即适用于动力研究，也适用于终点测试。只需在动力反应结束后加入Eu3+，即可把反应变成红移（red shift）反应测试。