北京云肽生物科技有限公司

IDT NGS二代测序文库构建接头
——UDI-UMI全长接头、通用短Y型接头、接头引物

北京云肽生物科技代理的美国进口IDT NGS二代测序DNA文库构建接头Adapter，提供即用型测序P5/P7全长接头（UDI-UMI接头）、通用短接头（短Y型接头）、测序接头引物（Index引物），以及定制合成长、短接头和接头引物服务，用于灵活满足Illumina二代测序基因文库建库需求。

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应用	建议接头	特点
无PCR全基因组测序（WGS）	IDT xGen UDl-UMI全长接头	无PCR的应用领域需要全长接头
无PCR宏基因组学
无PCR测序（初始量≥100ng）
低水平突变检测（低至约1%的频率）		灵敏度更高，使用UMI一致性分析去除测序错误
以全长、双链、初始cDNA开始RNA测序		更量化，去除PCR重复
甲基化测序	IDT xGen UDI-UMI 全长甲基化接头，xGen短接头加UDI引物对（甲基化接头）	亚硫酸盐转化需要甲基化胞嘧啶
全基因组测序（WGS）	IDT xGen短接头加UDI引物对	流程简单，使用通用接头制备连接预混合液，并通过PCR引入样本标签
宏基因组（初始量为1-250ng）
外显子测序
生殖细胞系靶系列测序（SNP、插入缺失）

一、IDT xGen UDI-UMI全长接头
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即用型IDT xGen UDI-UMI全长接头（完整Y型接头），DNA添加接头后无需进行PCR，可直接使用Illumina测序仪进行测序。IDT UDI-UMI全长接头序列由与Illumina Flowcell表面oligo互补的P5和P7序列、用于区分不同文库的序列特异双端标签（Unique Dual Index，UDI，即Barcode，含i5/i7 Index）、测序引物结合位点（Read 1 SP 和 Read 2 SP，即Rd1 SP 和Rd2 SP）、用于区分每一个DNA分子的唯一分子标签（Unique Molecular Identifier, UMI）组成。

IDT UDI-UMI接头整合了UDI接头和UMI接头优势，大大降低二代测序中的错配风险，更适合于灵敏检测需求。

IDT UDI序列特异双端标签（Unique Dual Index）在DNA片段两端各添加唯一Index，通过交叉验证Index，以区分不同文库，减少Illumina二代测序时的标签串扰和交叉污染问题，提高准确性。IDT Index标签序列由8或10个碱基组成，提供1536种Index，兼容2色和4色Illumina测序仪。

IDT UMI唯一分子标签（Unique Molecular Identifier）是短序列，在UDI基础上，为文库中的每个DNA片段上加入一个唯一的标记，使PCR扩增的序列具有相同的插入片段和UMI分子标签，用于识别原始样本中的等位基因突变是真实的低频突变还是文库PCR扩增或测序导致的错误，提高突变检测灵敏度。

二、IDT xGen 短接头和接头引物

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即用型IDT xGen 通用短接头，为双链体接头（通用Y型接头，短Y接头），直接连接DNA片段后，需使用测序接头引物（Index引物），如UDI双端标签引物、或CDI组合型双标签引物，通过PCR将Index序列、P5/P7序列添加到短接头上。

三、IDT接头和接头引物定制合成服务

IDT提供定制合成服务，包括可兼容Illumina TruSeq平台、Nextera平台的各类全长接头、短Y接头、Index接头引物，支持定制单标签（Single Index）、序列特异双端标签（Unique Dual Index, UDI）、组合型双标签（Combinatorial Dual Index, CDI）、含UMI的双端标签（UDI-UMI）的接头或接头引物。

同时，IDT提供定制合成甲基化接头服务，包括UDI-UMI全长甲基化接头、短甲基化接头和UDI引物对等，用于亚硫酸盐测序（甲基化测序）。

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资料格式：

IDT NGS二代测序文库构建接头 UDI-UMI全长接头、通用短Y型接头、接头引物.doc

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