NEB末端修饰酶 --末端磷酸化、去磷酸化、末端补平、末端加A尾

NEB末端修饰酶

--末端磷酸化、去磷酸化、末端补平、末端加A尾

 

 

北京云肽生物科技代理美国进口NEB碱性磷酸酶、T4 DNA聚合酶、Klenow片段（DNA聚合酶I大片段）、快速末端平齐试剂盒、Taq DNA聚合酶等，用于DNA末端磷酸化、去磷酸化、末端补平/末端平齐化、未端加A尾等。NEB末端修饰酶提供丰富产品选择，经严格质控，性能稳定可信赖。

 

一、末端磷酸化--T4 PNK

NEB T4 多聚核苷酸激酶(T4 Polynucleotide Kinase，T4 PNK，货号M0201)，支持对DNA、RNA进行5'末端磷酸化，以进行连接反应，并同时具有3'磷酸酶活性，可去除3磷酸基团，可用于对DNA、RNA进行末端标记，作为探针和进行DNA测序。

二、末端去磷酸化--碱性磷酸酶

1、NEB虾碱性磷酸酶(rSAP)

NEB虾破性磷酸酶(Shrimp Alkaline phosphatase，rSAP，货号M0371)，是一种不耐热的重组碱性磷酸酶，用于DNA、RNA的5'未端和3末端去磷酸化。可作用于5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端，并可降解PCR反应中的游离dNTP。NEB虾碱性磷酸酶可用于线性化质粒DNA去磷酸化防止自连、用于克隆或探针末端标记、制备DNA测序和SNP分析模板等。NEB虾碱性磷酸酶rSAP在65℃下加热5min可完全且不可逆地失活，无需在连接或末端标记前去除，减少纯化步骤。

2、NEB热敏磷酸酶(AnP)

NEB热敏磷酸酶(Antarctic Phosphatase，AnP，货号M0289)，是不耐热的重组碱性磷酸酶，反应条件灵活，兼容各类限制性内切酶缓冲液，无需纯化，用于DNA、RNA的5'末端和3'末端去磷酸化，可作用于5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端，并可降解PCR反应中的游离dNTP。NEB热敏磷酸酶可用于防止线性载体自连、制备DNA测序和SNP分析模板。NEB热敏研酸酶AnP在80℃下加热2min可完全且不可逆地失活，无需在连接或末端标记前去除，减少纯化步骤。

3、NEB快速CIP

NEB快速CIP(Quick CIP，货号M0525)，是热敏重组型小牛肠碱性磷酸酶，用于DNA、RNA的5'末端和3'末端去磷酸化，可在10min内完成5'末端突出端、5'末端凹陷端、平末端的去磷酸化，也可用于降解PCR反应中的dNTP。相比小牛肠碱性磷酸酶CIP，NEB快速CIP活性更高，所需酶量更少，降低每次反应的成本;无需锌等额外添加剂，并缩短温育时间;兼容各类限制性内切酶缓冲液，无需纯化;快速且不可逆的热失活特性，减少纯化步骤;重组酶具备更高纯度、更高批次间一致性、更高性价比。NEB快速CIP在80℃下加热2min可完全且不可逆地失活，无需在连接或末端标记前去除。

	重组虾碱性磷酸酶 M0371	热敏磷酸酶 M0289	快速CIP M0525
100%热失活	5min/65°c	2min/80°c	2min/80°c
高比活性	•		•
改进稳定性	•		•
直接用于NEBbuffers	•	•	•
需额外添加		•（Zn2+）	•
省时步骤			•

 

三、末端补平/末端平齐化

1、NEB T4 DNA 聚合酶

NEB T4 DNA 聚合酶(T4 DNAPolymerase、货号M0203)。具有5’→3’方向DNA合成功能，以及很强的3’→5’核酸外切酶活性，可进行缺口填充，切除3’突出末端或补平5'突出末端，形成平末端。NEB T4 DNA 聚合酶不具有5'→3'核酸外切酶活性。

2、NEB DNA聚合酶l大片段(Klenow片段)

NEB DNA 聚合酶I大片段(DNA Polymerase l,Large Fragment,Klenow片段，货号M0210)，是大肠杆菌(E.coli)DNA聚合酶l的蛋白水解产物，保留了聚合酶活性，以及3'→5'核酸外切酶活性，但不具有5’→3核酸外切酶活性。

3、NEB快速末端平齐化试剂盒

NEB快速末端平齐化试剂盒(Quick Blunting Kit，货号E1201)，可以将不匹配的DNA5’或3'突出末端转化为5"磷酸化的平末端，可在30min内完成限制性内切酶消化的DNA末端平齐化，以便与平末端DNA克隆载体连接。NEB快速末端平齐化试剂盒作为即用型预混液，可在室温下反应，适用于剪切的、雾化的、经限制性内切酶消化的DNA进行末端平齐化，以便与质粒、粘性质粒cosmid、F黏粒fosmid、BAC载体进行连接。

	T4 DNA 聚合酶 M0203	DNA聚合酶I大片段(Klenow片段)M0210	快速末端平齐化试剂盒E1201	绿豆核酸酶 M0250
5’突出末端补平	•	•	•
3’突出末端切割	•	•	•	•
5’突出末端切割				•

 

四、末端加A尾

1、NEB Klenow片段

NEB Klenow片段 (Klenow Fragment，货号M0212)，重组来源，保留了聚合酶活性、不具有5’→3"核酸外切酶活性，经突变(D355A、E357A)去除了3'→5'核酸外切酶活性，可用于向PCR产物的平末端添加A尾。

2、NEB Taq DNA 聚合酶

NEB Taq DNA 聚合酶(Taq DNA Polymerase)在PCR反应时，可在每条PCR扩增产物末端自动添加一个3"-A突出未端，直接用于T/A连接。NEB提供多种热启动Taq DNA聚合酶，满足各类实验需求。

	Klenow片段，3'→5'exo-	Taq DNA 聚合酶
反应温度	37°C	75℃
热失活	75℃ 20min	否
核苷酸辅因子	dATP	dATP

 

北京云肽生物科技代理的末端修饰酶