智立中特(武汉)生物科技有限公司

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智立中特(武汉)生物科技有限公司

入驻年限:6

  • 联系人:

    王静

  • 所在地区:

    湖北 武汉市

  • 业务范围:

    细胞库 / 细胞培养、试剂、抗体、技术服务

  • 经营模式:

    科研机构 生产厂商

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技术资料/正文

智立中特pLive-GDF1质粒提取技术解析

80 人阅读发布时间:2025-06-24 10:40

一、GDF-1基因的生物学意义

生长分化因子1(Growth Differentiation Factor-1, GDF-1)是TGF-β超家族成员,在胚胎发育、细胞分化及组织再生(尤其是神经和肌肉系统)中发挥关键作用。利用重组质粒 pLive-GDF1(mouse) 可在体内高效表达小鼠源GDF-1蛋白,为基因治疗与再生医学研究提供强大工具。

二、pLive-GDF1(mouse) 质粒的核心特性

  1. 载体骨架:基于pLive™ 腺相关病毒(AAV)表达系统,兼具质粒转染效率与病毒载体长期表达优势。

  2. 基因结构

    • 启动子:CMV增强型启动子,驱动GDF-1基因高表达。

    • 标签:可选His-Tag或FLAG-Tag,便于蛋白纯化与检测。

    • 抗性基因:Ampicillin抗性(Amp⁺),适用于大肠杆菌筛选。

  3. 应用场景

    • 肌肉再生研究(如心肌修复、骨骼肌损伤模型)

    • 神经退行性疾病治疗探索

    • 糖尿病胰岛β细胞功能调控

三、高纯度质粒提取的标准化流程

智立中特采用 三步精细化提取工艺,确保质粒得率与纯度:

步骤 关键技术 质量控制点
1. 菌体扩增 高密度发酵(OD₆₀₀=4.0~6.0) 菌液活率 >95%
2. 碱裂解提取 优化pH梯度裂解(pH 12.0~12.5) 避免基因组DNA污染
3. 层析纯化 亲和层析+分子筛双重纯化 内毒素 <0.1 EU/μg

四、关键质量指标与验证数据

  • 纯度:琼脂糖凝胶电泳显示超螺旋比例 >90%

  • 浓度:紫外分光光度法测定 ≥1.5 μg/μL(A₂₆₀/A₂₈₀=1.8~2.0)

  • 功能验证:转染HEK293T细胞后,Western Blot检测到~55 kDa GDF-1前体蛋白表达

  • 无菌性:通过0.22 μm滤膜除菌,无菌培养阴性

五、应用案例:推动前沿研究

  • 心肌修复模型
    在小鼠心肌梗死模型中,局部注射pLive-GDF1质粒可使梗死区血管密度提升 40%,纤维化面积减少 32%Circulation Research 2023)。

  • 神经轴突再生
    脊髓损伤模型显示,GDF-1过表达促进轴突生长 ~2.8倍Nature Neuroscience 2024)。

六、智立中特的技术优势

  • 定制化服务:提供启动子替换、标签添加等基因优化方案

  • 超低内毒素:专利层析技术确保质粒适用于体内注射

  • 规模化生产:支持毫克至克级GMP级别质粒制备

七、未来展望:从实验室到临床

随着AAV载体递送技术的成熟,pLive-GDF1(mouse) 有望与病毒包装系统结合,开发出靶向肌肉/神经组织的基因治疗药物,为退行性疾病提供全新解决方案。


为什么选择智立中特的 pLive-GDF1(mouse)?

“我们不仅是质粒供应商,更是再生医学的合作伙伴。每一份pLive-GDF1都承载着对科研精准性的执着——从序列验证到动物模型功能测试,智立中特让基因表达‘零偏差’。”

  智立中特(武汉)生物科技有限公司主要致力于质粒微生物资源的保护、共享和持续利用,围绕我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展等重大需求,探索、发现、收集国内外的微生物资源,妥善长期保存管理;在保证生物安全和保护知识产权的前提下,为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供质粒载体物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。旗下质粒载体网zlzt.com是一款提供质粒载体展示及定制的专业型网站,由智立中特(武汉)生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造!主要展示了各种基因类型下的质粒载体!

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