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技术资料/正文
80 人阅读发布时间:2025-06-24 10:40
生长分化因子1(Growth Differentiation Factor-1, GDF-1)是TGF-β超家族成员,在胚胎发育、细胞分化及组织再生(尤其是神经和肌肉系统)中发挥关键作用。利用重组质粒 pLive-GDF1(mouse) 可在体内高效表达小鼠源GDF-1蛋白,为基因治疗与再生医学研究提供强大工具。
载体骨架:基于pLive™ 腺相关病毒(AAV)表达系统,兼具质粒转染效率与病毒载体长期表达优势。
基因结构:
启动子:CMV增强型启动子,驱动GDF-1基因高表达。
标签:可选His-Tag或FLAG-Tag,便于蛋白纯化与检测。
抗性基因:Ampicillin抗性(Amp⁺),适用于大肠杆菌筛选。
应用场景:
肌肉再生研究(如心肌修复、骨骼肌损伤模型)
神经退行性疾病治疗探索
糖尿病胰岛β细胞功能调控
智立中特采用 三步精细化提取工艺,确保质粒得率与纯度:
| 步骤 | 关键技术 | 质量控制点 |
|---|---|---|
| 1. 菌体扩增 | 高密度发酵(OD₆₀₀=4.0~6.0) | 菌液活率 >95% |
| 2. 碱裂解提取 | 优化pH梯度裂解(pH 12.0~12.5) | 避免基因组DNA污染 |
| 3. 层析纯化 | 亲和层析+分子筛双重纯化 | 内毒素 <0.1 EU/μg |
纯度:琼脂糖凝胶电泳显示超螺旋比例 >90%
浓度:紫外分光光度法测定 ≥1.5 μg/μL(A₂₆₀/A₂₈₀=1.8~2.0)
功能验证:转染HEK293T细胞后,Western Blot检测到~55 kDa GDF-1前体蛋白表达
无菌性:通过0.22 μm滤膜除菌,无菌培养阴性
心肌修复模型:
在小鼠心肌梗死模型中,局部注射pLive-GDF1质粒可使梗死区血管密度提升 40%,纤维化面积减少 32%(Circulation Research 2023)。
神经轴突再生:
脊髓损伤模型显示,GDF-1过表达促进轴突生长 ~2.8倍(Nature Neuroscience 2024)。
定制化服务:提供启动子替换、标签添加等基因优化方案
超低内毒素:专利层析技术确保质粒适用于体内注射
规模化生产:支持毫克至克级GMP级别质粒制备
随着AAV载体递送技术的成熟,pLive-GDF1(mouse) 有望与病毒包装系统结合,开发出靶向肌肉/神经组织的基因治疗药物,为退行性疾病提供全新解决方案。
“我们不仅是质粒供应商,更是再生医学的合作伙伴。每一份pLive-GDF1都承载着对科研精准性的执着——从序列验证到动物模型功能测试,智立中特让基因表达‘零偏差’。”
智立中特(武汉)生物科技有限公司主要致力于质粒微生物资源的保护、共享和持续利用,围绕我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展等重大需求,探索、发现、收集国内外的微生物资源,妥善长期保存管理;在保证生物安全和保护知识产权的前提下,为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供质粒载体物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。旗下质粒载体网zlzt.com是一款提供质粒载体展示及定制的专业型网站,由智立中特(武汉)生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造!主要展示了各种基因类型下的质粒载体!