SNU387人肝癌细胞：复苏培养全攻略与避坑指南

一、SNU387细胞复苏流程

1. “快闪”解冻（37℃水浴）

   • 从液氮罐取出冻存管，立刻放入37℃水浴，手指捏住管盖部位（避免水浸入）。

   • 快速摇晃至冰晶消失（约1分钟），切勿超时！
     🔥 避坑：水浴超时→细胞被DMSO毒死！

2. “温柔”清洗（稀释DMSO）

   • 将细胞悬液滴入含5ml预温培养基（如RPMI-1640+10%胎牛血清）的15ml离心管。

   • 轻柔混匀，离心机设置：1000rpm（约200g），5分钟。
     ⚠️ 避坑：高速离心→细胞压成饼，活力大减！

3. “静养”复苏（关键！）

   • 弃上清，加2ml新鲜培养基，轻吹打散细胞（避免气泡）。

   • 移入培养瓶，补足培养基（如T25瓶补至5ml）。

   • 37℃、5% CO₂培养箱静置24-48小时，勿移动！
     🚫 避坑：手欠摇瓶→细胞无法贴壁，集体阵亡！

4. 首次换液 & 传代

   • 24小时后观察：贴壁则换新培养基；未贴壁需延长静养。

   • 达80%融合时消化传代（胰酶消化约2-3分钟）。

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二、SNU387保藏与冻存

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三、SNU387的三大应用方向

1. 肝癌机制研究

   • 探究肝癌增殖、转移信号通路（如Wnt/β-catenin异常激活）。

2. 药物筛选平台

   • 测试化疗药（如5-FU）、靶向药（如索拉非尼）及中药单体抗肿瘤效果。

3. 基因编辑模型

   • CRISPR敲除关键基因，验证其在肝癌发展中的作用。

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四、避坑总结（血泪经验！）

1. 解冻手速要快：DMSO常温毒性大，1分钟内完成水浴！

2. 离心力度要轻：超过200g离心就是“细胞谋杀”！

3. 静养期勿手贱：复苏后48小时内禁止观察/移动培养瓶！

4. 冻存程序要规范：跳过程序降温≈主动销毁细胞！

5. 警惕“隐形杀手”：支原体污染（定期检测）、血清批次差异（提前测试）！

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智立中特(武汉)生物科技提示：
SNU387作为经典人肝癌细胞系，是攻克肝癌研究的“黄金模型”。掌握规范操作与避坑技巧，让您的实验效率倍增！如需细胞株/技术支持，欢迎随时联系我们！

操作依据：ATCC标准指南 & 国际细胞培养手册
冻存推荐：程序降温盒（如Nalgene® Mr. Frosty™）
培养贴士：使用0.1%明胶包被培养瓶，提升贴壁效率