智立中特（武汉）生物约氏乳杆菌培养方法及注意事项

一、 菌种简介

约氏乳杆菌（Lactobacillus johnsonii）是一种革兰氏阳性菌，属于乳杆菌属。广泛存在于人体肠道中，具有调节肠道菌群、增强免疫力、抑制病原菌等多种益生功能。

二、 培养基

1. MRS培养基：

• 蛋白胨 10.0 g

• 牛肉膏 10.0 g

• 酵母提取物 5.0 g

• 葡萄糖 20.0 g

• 磷酸氢二钾 2.0 g

• 柠檬酸三铵 2.0 g

• 乙酸钠 5.0 g

• 硫酸镁 0.2 g

• 硫酸锰 0.05 g

• 吐温80 1.0 mL

• 蒸馏水 1000 mL

• pH 6.2-6.6

2. 改良MRS培养基：

在MRS培养基基础上，可根据实验需求添加以下成分：

• 半胱氨酸盐酸盐 0.5 g/L： 促进厌氧菌生长

• 维生素K1 0.01 g/L： 促进某些菌株生长

• 氯化血红素 0.005 g/L： 促进某些菌株生长

三、 培养方法

1. 厌氧培养：

• 将配制好的培养基分装至厌氧管或厌氧瓶中，121℃高压灭菌15分钟。

• 待培养基冷却至室温后，在无菌条件下接种约氏乳杆菌。

• 将接种后的培养基置于厌氧培养箱中，37℃培养24-48小时。

2. 微需氧培养：

• 将配制好的培养基分装至试管或三角瓶中，121℃高压灭菌15分钟。

• 待培养基冷却至室温后，在无菌条件下接种约氏乳杆菌。

• 将接种后的培养基置于微需氧培养箱中，37℃培养24-48小时。

四、 注意事项

• 无菌操作： 整个培养过程需在无菌条件下进行，避免杂菌污染。

• 培养基pH值： 约氏乳杆菌最适生长pH值为6.2-6.6，需严格控制培养基pH值。

• 培养温度： 约氏乳杆菌最适生长温度为37℃，需保持恒温培养。

• 厌氧环境： 约氏乳杆菌为厌氧菌，需在厌氧或微需氧条件下培养。

• 菌种保存： 约氏乳杆菌可接种于MRS斜面培养基，4℃保存，定期传代。

五、 联系我们

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