高稳定性多色荧光标记冻干HPV假病毒：中和抗体检测的金标准解决方案

高稳定性多色荧光标记冻干 HPV 假病毒：中和抗体 检测的金标准解决方案

一、 产品背景介绍 中和抗体检测是 HPV 疫苗研发过程中的关键质控环节。假病毒中和试验因 其安全性和可靠性，被世界卫生组织（WHO）推荐为 HPV 疫苗评价的国际金 标准（WHO TRS No 999）[1]。 冻干 HPV 假病毒产品所含 HPV 假病毒是由 HPV 主要衣壳蛋白 L1 和次要 衣壳蛋白 L2 的表达质粒与绿色荧光蛋白（GFP）/红色荧光蛋白（RFP）/深红 色荧光蛋白（E2FP）表达质粒共转染至真核细胞而成[2]。

HPV 假病毒感染细胞后，荧光报告基因即时表达，可通过荧光斑点计数设 备识别荧光斑点数。检测样品中如含有中和抗体，假病毒进入细胞的量会变化， 从而实现对中和抗体的定量检测[3, 4]。 二、 核心优势与方法验证 稳定性突破：冻干工艺大幅提升存储稳定性（图 1-2）。

条件 冻干型滴度保留率 液体型滴度保留率

-20℃储存 12 个月 ≥90% 19%-42%

4℃储存 1 个月 ≥87% 2%-37%

                                                                 

图 1：3 个亚型（HPV16，HPV18 HPV52） -20℃储存 12 个月的滴 度变化 图 2：3 个亚型（HPV16，HPV18 HPV52） 4℃储存 1 个月的滴度 变化

批间一致性良好：相比常规液体型 HPV 假病毒，冻干 HPV 假病毒产品批间差 小，各亚型的 HPV 假病毒滴度均在 0.5～3.0×10 5TCID50/支。冻干 HPV18 组内 重复检测与同批不同支检测的滴度差异无统计学意义（P=0.132＞0.05）（图

3）。

图 3：冻干 HPV18-RFP 单支重复检测（组内）及同批不同支（组间）检测的滴度情况。

三、 产品使用场景 即用型监测体系：每个亚型的产品均由 1 支 HPV 冻干假病毒和 1 支复溶液 组成，复溶后可直接用于 96/384 孔板中和抗体检测。 基于三色荧光分组策略实现单孔多重检测：冻干 HPV 假病毒产品可覆盖 9

个亚型（6，11，16，18，31，33，45，52，58）含 3 种不同颜色的荧光蛋白 （图 4）。3 种颜色的 HPV 假病毒与血清中和抗体反应，通过荧光酶联免疫斑 点分析仪读取荧光点数，通过不同血清稀释倍数下的的荧光点数，计算获得血 清中和抗体滴度。

图 4： HPV 冻干假病毒复溶后感染细胞

四、产品规格 冻干 HPV 假病毒系列产品 产品号 亚型 规格

80147 HPV6-GFP 0.5～3.0×10 5 TCID50/支

80148 HPV11-RFP 0.5～3.0×10 5 TCID50/支

80149 HPV16-GFP 0.5～3.0×10 5 TCID50/支

80150 HPV18-RFP 0.5～3.0×10 5 TCID50/支

80151 HPV31-GFP 0.5～3.0×10 5 TCID50/支

80152 HPV33-RFP 0.5～3.0×10 5 TCID50/支

80153 HPV45-E2FP 0.5～3.0×10 5 TCID50/支

80154 HPV52-E2FP 0.5～3.0×10 5 TCID50/支

80155 HPV58-E2FP 0.5～3.0×10 5 TCID50/支 欢迎产品垂询！

参考文献

[1] WHO. Human papillomavirus vaccines ： WHO position paper ， December 2022[J]. 2022,97:645-672. [2] WHO. Recommendations to assure the quality, safety and efficacy of recombinant human papillomavirus virus-like particle vaccines, Annex 4, TRS No 999[J]. 2016. [3] Nie J, Liu Y, Huang W, et al. Development of a Triple-Color Pseudovirion-Based Assay to Detect Neutralizing Antibodies against Human Papillomavirus[J]. Viruses, 2016,8(4):107. [4] Zha R, Liao C, Lin D, et al. A Comprehensive Evaluation of the HPV Neutralizing Antibodies in Guangzhou, China: A Comparative Study on Various HPV Vaccines[J]. Vaccines (Basel), 2024,12(11).