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你了解 HE 染色吗？实用教程来了
5365 人阅读发布时间：2020-07-23 09:09
HE 染色法即苏木.精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining），是石蜡切片技术里常用的染色法之一。HE 染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。
苏木.精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
HE 染色石蜡切片制作的基本过程：
1、取材与固定：
从人或动物新鲜尸体上取下组织块（一般厚度不超过 05 厘米) 投入预先配好的固定液中 (10% 福尔马林，Bouin 氏固定液等) 使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结构。
2、脱水透明：
一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲.苯中透明，以二甲.苯替换出组织块的中酒精，才能浸蜡包埋。
3、浸蜡包埋：
将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋：先制备好容器（如折叠一小纸盒），倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬，才能在切片机上切成很薄的切片。
4、切片与贴片：
将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为 5-8 微米厚。切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放 45℃ 恒温箱中烘干。
5、脱蜡染色：
常用 HE 染色，以增加组织细胞结构各部分的色彩差异，利于观察。苏木.精（Hematoxylin，H）是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红 (Eosin，E) 是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。染色前，须用二甲.苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，最后入蒸馏水，就可染色。
HE 染色过程是：
①将已入蒸馏水后的切片放入苏木.精水溶液中染色数分钟。
②酸水及氨.水中分色，各数秒钟。
③流水冲洗 1 小时后入蒸馏水片刻。
④入 70% 和 90% 酒精中脱水各 10 分钟。
⑤入酒精伊红染色液染色 2-3 分钟。
6、脱水透明：
染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲.苯使切片透明。
7、封固：
将已透明的切片滴上加拿大树胶，盖上盖玻片封固。待树胶略干后，贴上标笺，切片标本就可使用了。
香港及斯恩贝贸易有限公司出品的 JSENB 品牌苏木.精（货号：JS0235）具有良好的口碑，成为中科院系统以及清华大学、北京大学高校的优选品牌。
JSENB 引进国际先进的 Quality Control 技术和无菌无尘包装技术，针对旗下各个产品系列的属性和标准进行了严格的质检分析，智造服务于生命科学研究、精细化学研究、分析诊断研究的最优质的产品。
苏木.精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
HE 染色石蜡切片制作的基本过程：
1、取材与固定：
从人或动物新鲜尸体上取下组织块（一般厚度不超过 05 厘米) 投入预先配好的固定液中 (10% 福尔马林，Bouin 氏固定液等) 使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结构。
2、脱水透明：
一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精，又溶于石蜡的透明剂二甲.苯中透明，以二甲.苯替换出组织块的中酒精，才能浸蜡包埋。
3、浸蜡包埋：
将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋：先制备好容器（如折叠一小纸盒），倒入已溶化的石蜡，迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中。冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬，才能在切片机上切成很薄的切片。
4、切片与贴片：
将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为 5-8 微米厚。切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放 45℃ 恒温箱中烘干。
5、脱蜡染色：
常用 HE 染色，以增加组织细胞结构各部分的色彩差异，利于观察。苏木.精（Hematoxylin，H）是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红 (Eosin，E) 是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。染色前，须用二甲.苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，最后入蒸馏水，就可染色。
HE 染色过程是：
①将已入蒸馏水后的切片放入苏木.精水溶液中染色数分钟。
②酸水及氨.水中分色，各数秒钟。
③流水冲洗 1 小时后入蒸馏水片刻。
④入 70% 和 90% 酒精中脱水各 10 分钟。
⑤入酒精伊红染色液染色 2-3 分钟。
6、脱水透明：
染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲.苯使切片透明。
7、封固：
将已透明的切片滴上加拿大树胶，盖上盖玻片封固。待树胶略干后，贴上标笺，切片标本就可使用了。
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