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JSENB丨Tris,Glycine,SDS—以基础试剂搭建蛋白质研究的坚实舞台,助力《Molecular Cell》揭示氧化应激应答新机制!

17 人阅读发布时间:2026-01-04 11:03

JSENB,始终与探索者并肩。

我们深信,前沿科学的每一次飞跃,都始于实验台上最基础的可靠性与重复性。因此,当全球科学家致力于解析细胞如何在氧化应激中通过脂滴积累实现自我保护时,JSENB 便以专业的产品,成为这项重要工作中无声却坚实的缓冲体系构建者。

在《Molecular Cell》的这项研究中,JSENB 品牌旗下的TrisGlycineSDS被用于搭建蛋白质研究中最核心的实验平台 SDS-PAGE Western Blot。它们共同确保了从果蝇幼虫脑组织到人类胶质瘤细胞中关键蛋白(如Plin2Ubr1Hsc70-4/HSPA8)的精确分离、可靠转印与清晰检测,从而使所有关于氧化应激、脂质过氧化与氨基酸感知通路的精妙数据,都建立在无可置疑的蛋白质分析基础之上。

JSENB始终以纯度高、批次稳、性能真为准则,为全球科研用户提供可靠的产品与服务,让实验从此更精准、更高效。

JSENB SCI文献引用

A regulator of amino acid sensing links lipid peroxidation and lipid droplet-dependent antioxidant response

氨基酸感应调控因子链接脂质过氧化与脂滴依赖性抗氧化反应

技术资料图片1

一、研究背景与意义:

氧化应激是细胞代谢中常见的挑战,过量活性氧(ROS)会导致脂质过氧化,损伤生物大分子,最终引发细胞生长停滞或死亡。近期研究发现,胶质细胞中的脂滴(LDs)可通过隔离易过氧化的不饱和脂肪酸,发挥重要的抗氧化防御功能。然而,氧化应激下脂滴积累的具体分子机制尚不清楚。本研究揭示了一条从氧化应激脂质过氧化产物4-HNE→Hsc70-4/HSPA8修饰失活→Ubr1氨基酸感应能力下降→Plin2蛋白稳定脂滴积累的完整信号通路,不仅在果蝇和哺乳动物中保守,更为胶质瘤等疾病的治疗提供了新的潜在靶点。

技术资料图片2

二、核心实验技术与JSENB产品的支撑作用:

本研究结论的得出,严重依赖于对关键蛋白质(如Plin2Ubr1Hsc70-4)的稳定检测与定量分析。Western blot(免疫印迹)作为贯穿全文的核心技术,其成功与否直接决定了数据的可靠性。而Western blot的基础,正是蛋白质样品的SDS-PAGE凝胶电泳分离。

1三羟甲基氨基甲烷TRIS(文献中名称Trizma base (Tris)牌号:JS0159

1产品质量标准:Ultra Pure Grade

2)产品基本描述:Tris是一种用于生物化学和分子生物学的确定基质标准品和缓冲液。它可单独用作一种缓冲液或作为混合缓冲液配方中的一种组分,如Tris-EDTATE)缓冲液、Tris-乙酸盐-EDTATAE)缓冲液、Tris-硼酸盐-EDTATBE)缓冲液等。它是纯的、基本上稳定且相对不吸湿的,并具有较高的当量。

3)文献引用背景与具体作用:Trizma base (Tris) 作为最基础的pH缓冲剂,贯穿了整个蛋白质研究的始末。从最初使用含有50 mM Tris-HClRIPA裂解缓冲液破碎果蝇幼虫脑组织或培养的细胞开始,Tris就为蛋白质的提取提供了一个稳定、温和的碱性环境(pH 8.0),有效防止了蛋白质在裂解过程中的降解或意外修饰,确保了后续所有免疫沉淀和免疫印迹分析所针对的蛋白靶点都是真实、完整的生物学样本。在最为关键的SDS-PAGE蛋白质分离步骤中,TrisGlycineSDS共同构成了经典的Tris-Glycine-SDS电泳缓冲系统,它在聚丙烯酰胺凝胶中建立并维持了一个稳定的pH梯度,这个环境是驱动不同分子量的蛋白质-SDS复合物以精确速率向前迁移,从而实现高分辨率分离的物理化学基础。最后,在将蛋白质从凝胶转印至PVDF膜的阶段,Tris再次与Glycine搭档,成为湿式转印缓冲液的核心成分,共同调节系统的离子强度和pH值,确保了无论是大分子量的Ubr1蛋白还是小分子量的修饰产物,都能被高效、均匀地转移至固相膜上,为后续的抗体识别与信号检测铺平道路。可以说,Tris是整个蛋白质分析工作流中维持反应体系稳态的无声守护者,它的稳定性直接关系到每一个蛋白条带位置和强度的可信度。

2甘氨酸 GLYCINE(文献中名称Glycine牌号:JS0028

1)产品质量标准:Biotechnology Grade

2)产品基本描述:甘氨酸是一种pI6.7的分子,其类似于积层胶的pH。它具有低流动性、疏水性并不与蛋白结合的优点。甘氨酸是用于聚丙烯酰胺凝胶电泳的Tris-甘氨酸和Tris-甘氨酸-SDS(十二烷基硫酸钠)电泳缓冲液中的一种组分。甘氨酸也是用于蛋白质免疫印迹的Towbinz转膜缓冲液的一组组分。

3)文献引用背景与具体作用:甘氨酸在本研究中扮演着蛋白质电泳分离与转印过程中不可或缺的“协同离子”角色。在SDS-PAGE凝胶电泳中,甘氨酸作为缓冲体系中的前沿离子,其迁移速率介于快离子(氯离子)和慢离子(蛋白质-SDS复合物)之间。在电场作用下,甘氨酸离子形成了一个不断推进的移动边界,这个边界将蛋白质样品压缩成极其狭窄的起始区带,从而在分离开始时就赋予了蛋白质条带清晰的锐度,这是获得高分辨率电泳图谱的前提条件,使得分子量相近的蛋白(如不同修饰状态的Hsc70-4)也能被有效区分。随后,在Western blot的蛋白质转印步骤中,甘氨酸与Tris共同溶于转印缓冲液,其作用转变为提供必要的离子导电性。它协助建立稳定的电场,确保在转印过程中电流能够均匀通过,从而驱动已经分离的蛋白质带负电的SDS复合物,高效、完整地从凝胶基质中迁移出来并牢固地结合到PVDF膜上。没有甘氨酸的参与,蛋白质的转印效率会大大降低,尤其是高分子量蛋白容易滞留于凝胶中,导致关键的信号丢失。因此,甘氨酸是连接蛋白质精细分离与成功固相化检测的关键桥梁。

3十二烷基硫酸钠(SDS Sodium Dodecyl Sulfate(文献中名称SDS牌号JS0054

1)产品质量标准Biotechnology Grade

2产品基本描述十二烷基硫酸钠(SDS)是一种阴离子去污剂,适合用于对蛋白进行变性。它具有一个带有带负电荷的硫酸盐长链脂肪族基团。这使得SDS成为一种两亲性去污剂。常用于增溶和蛋白质变性,适用于PAGE变性应用。 大多数蛋白质以1.4 g SDS/g 蛋白质的比例结合SDS。 相对于结合的SDS自带的总负电荷,蛋白质固有电荷几乎可忽略不计。 每种蛋白质的质荷比基本相同,且基于分子大小在凝胶中迁移。

3文献引用背景与具体作用:SDS在本研究中是实现蛋白质标准化分离和检测的核心化学试剂,它从根本上统一了所有待测蛋白的物理性质。在样品制备阶段,当细胞或组织裂解物与含有SDSβ-巯基乙醇的样品缓冲液混合并加热后,SDS作为强阴离子去垢剂,会以其疏水尾结合蛋白质的疏水区,并以其带负电的硫酸头基包围蛋白质分子。这个过程不仅彻底破坏了蛋白质的天然高级结构,使其线性化,更重要的是,SDS与蛋白质的结合量大致与蛋白质的分子量成正比,从而给所有蛋白质披上了一层均匀的负电荷外衣。这一步骤完全掩盖了不同蛋白质自身所带电荷的差异,使得它们在后续的凝胶电泳中,其迁移速率唯一地取决于分子量大小,从而实现了基于分子量的精确分离。此外,在裂解缓冲液中添加的少量SDS0.1%),还有助于彻底破坏细胞膜和细胞器膜,确保包括膜结合蛋白在内的全部目标蛋白能被有效释放出来,从而真实反映其在细胞内的丰度。因此,SDS是使复杂蛋白质混合物变得可读可比的关键转化者。

技术资料图片3

小结 JSENB三产品TrisGlycineSDS构建蛋白质研究的“铁三角”

在本研究中,无论是验证氧化应激下Plin2蛋白的上调,还是检测Hsc70-44-HNE修饰,亦或是比较胶质瘤患者样本中PLIN2HSPA8修饰水平的关联,每一个关键数据的背后,都离不开由TrisGlycineSDS共同构建的可靠Western blot平台。这项研究不仅揭示了细胞在氧化应激下通过动态调节氨基酸感应来启动抗氧化防御的精细机制,也印证了JSENB基础试剂的价值——我们提供的远不止化学试剂,更是支撑重大科学发现的标准化实验体系。每一个清晰的蛋白条带,每一次成功的分子互作验证,都书写着JSENB产品对科研严谨性的坚守选择JSENB,就是选择从基础到前沿的全程可靠。

资料格式:

【定版】JSENB丨Tris,Glycine,SDS—以基础试剂搭建蛋白质研究的坚实舞台,助力《Molecular Cell》揭示氧化应激应答新机制!.docx

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