为什么称TdT末端转移酶为别具一格的DNA聚合酶?
DNA聚合酶在核酸的复制,修复和重组中起着至关重要的作用。有一种独特的DNA聚合酶称为末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)。TdT是DNA聚合酶X家族的成员,其独特的从头创造基因组材料的能力使其成为自然界中最引人入胜的DNA聚合酶之一。细胞在发生凋亡时, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。TUNEL是分子生物学与形态学相结合的研究方法,对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确的反应细胞凋亡最典型的生物化学和形态特征,可用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、培养的细胞和从组织中分离的细胞的细胞凋亡测定,并可检测出极少量的凋亡细胞,灵敏度远比一般的组织化学和生物化学测定法要高,因而在细胞凋亡的研究中已被广泛采用。其次,TdT可以在cDNA末端的快速扩增中也有重大作用。近年来,TdT作为抗癌靶点的研究进展迅速。TdT在白细胞表面的表达水平对判断预后及指导治疗有一定价值。
9555 人阅读发布时间:2024-05-28 09:26