Ca++ Mg++-ATP 酶活性测定说明书

186 人阅读发布时间：2020-04-20 17:31

Ca⁺⁺ Mg⁺⁺-ATP 酶活性测定说明书
可见分光光度法
产品说明：
Ca⁺⁺ Mg⁺⁺-ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP水解生成ADP和无机磷。根据Ca⁺⁺ Mg⁺⁺-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP 酶活性高低。
需自备的仪器及用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体50mL ×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 5ml×1 瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×3 支，-20℃保存。用时每支加1mL 蒸馏水，现用现配。用不完的试剂-20℃可保存一周。
试剂五：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂六：粉剂×1 瓶，4℃保存。用时加入3mL 蒸馏水， 4℃保存。
试剂七：粉剂×1 瓶，4℃保存。用时加入25mL 蒸馏水，溶解后4℃保存一周。
试剂八：粉剂×1 瓶，4℃保存。用时加入25mL 蒸馏水，溶解后4℃保存一周。
试剂九：液体25mL×1 瓶，室温保存。
试剂十：10mmol/L 标准磷贮备液 10mL×1 瓶，4℃保存。
0.5μmol/mL 标准磷应用液配制：将试剂十20倍稀释，即取 0.1mL试剂十加1.9mL蒸馏水
充分混匀
定磷剂的配制：按H₂O: 试剂七:试剂八:试剂九=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
样品酶液的制备：

细菌、细胞或组织样品的制备：

细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴ 个）：提取液体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30 次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

血清（浆）样品：直接检测。

操作步骤：

分光光度计预热30min 以上，调节波长至660nm，蒸馏水调零。
酶促反应（在EP 管中加入下列试剂）
定磷（1.5mLEP 管中依次加入下列试剂）

卡那霉素快速检测试纸条

资料格式：

Ca++ Mg++- ATP 酶活性测定说明书.pdf

查看详细文档

Na+ K+-ATP 酶活性测定说明书

鸡传染性法氏囊病病毒VP2抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）说明书

我的询价

上海研谨生物科技有限公司