一文了解MHC 四聚体（MHC Tetramer）

MHC 四聚体（MHC Tetramer）

MHC 四聚体检测技术于 1996 年由美国斯坦福大学医学院的 John D. Altman 博士所开发， 它在单细胞水平上标记目标 T 细胞，并通过流式细胞术对细胞进行分析，从而成为一种快速、简便的检测抗原特异性 T 细胞（antigen-specific T cells）的定性及定量分析方法。

其中，MHC 分子在免疫应答过程中发挥着抗原识别的作用，主要功能是将抗原呈递给 T 细胞，以区分自身（我们的细胞和组织）和非己（入侵者或修饰的自身）。以人类为例，如下图所示，MHC 具有三个区域：MHC-I，MHC-II 和 MHC-III，通常，MHC 指的是 MHC- I 或 MHC-II 分子，结构如下图，包括 MHC- I 区中的经典 HLA 抗原 HLA-A，-B 和-C，非经典 HLA 抗原 HLA-E，-G 和-F，以及 MHC-II 区中的 HLA-DR，-DQ 和-DP 等。




MHC 四聚体检测抗原特异性 T 细胞原理

细胞在肿瘤、病毒、细菌、寄生虫、移植组织、过敏原、甚至自身抗原的适应性免疫应答中都发挥着重要的调节作用。大部分 T 淋巴细胞在其细胞表面表达单一的、高度特异性的抗原受体（TCR），通过抗原呈递过程与 MHC-抗原肽复合物相结合并识别其中特异的抗原肽，启动获得性/特异性免疫应答机制，比如 T 细胞介导的细胞免疫和 B 细胞介导的体液免疫，如下图所示。由于 TCR 与 MHC-抗原肽复合物之间的亲和力低，半衰期短，相互结合后容易快速脱落。而 MHC-抗原肽复合物四聚体（简称：MHC 四聚体）技术由 4 个 MHC-抗原肽单体分子及荧光染料组成的复合物，它以带有信号标记的链霉亲合素为基础，交联四个 MHC 分子单体，形成 MHC 四聚体；一个 MHC 四聚体分子可与同一 T 细胞表面的 3-4 个 TCR 相识别并结合，从而大大增强了 MHC-抗原肽复合物与 TCR 之间的结合力和检测特异性，并可通过流式细胞术成功实现对抗原特异性的 T 细胞的离体分析，因此目前深受研究者喜爱。


MHC 四聚体制备

抗原多肽片段与 MHC 单体在结合位点结合并经过折叠后形成可溶性的 MHC 多肽复合物单体，随后在生物素化和纯化后通过链霉亲和素缀合的荧光染料将单体标记，并且转化为四聚体。




MHC 四聚体应用
在肿瘤、感染、自身免疫性疾病等研究领域被越来越多地运用于：

• 细胞分选——特异性 T 细胞高效分选；
• 抗原表位研究——抗原表位短肽亲和力筛选；
• 病毒逃逸研究——病毒逃避免疫机制研究；
• 细胞治疗研究——T 细胞表面受体 TCR 亲和力研究；
• 抗体筛选研究——T-Cell Receptor-Like Antibodies 筛选研究；
• MHC 免疫功能研究——利用混合抗原表位片段鉴定 MHC 免疫功能；

   
MHC 四聚体优势
    

• 与其他应用于 T 细胞检测的方法如胞内细胞因子染色法（ICS）、酶联免疫斑点检测法（ELISPOT）等相比，MHC 四聚体技术具有：
• 高灵敏度：可检测血液中低丰度（≤ 1%）的抗原特异性 T 细胞；
• 高特异性：极大提高了 TCR 与 MHC-抗原多肽复合物结合的特异性；
• 稳定性好：检测结果一致性好，可重复性高；
• 多样化/个性化：可定制合成特异的抗原多肽片段，组合成各种 T 细胞选择性 MHC 四聚体；
• 定性/定量分析：可结合流式细胞术实现对抗原特异性 T 细胞群的定性/定量分析；

孚博生物提供的即用型 MHC 四聚体
 

• 荧光标记选择灵活： PE， APC， FITC、BV421 等
• 种属涵盖范围广泛：人、鼠、大猩猩、猕猴、猪，鸡等；
• 四聚体类别多样：人 MHC- I 类 HLA-A，-B，-C， -E，-G 和-F，以及 MHC-II 类中的 HLA-DR；小鼠、猪、大猩猩等多种物种的 MHC- I 类和 MHC-II 的四聚体；同时能为您提供四聚体阴性对照，详情请具体咨询；
• 提供空载四聚体：能够自己连接肽段和标记染料；
• 不同方式标记的 H-2Kb、HLA-A*02:01、HLA-B*07:02、HLA-A*11:01、HLA-A*02:01、HLA-A*24:02、HLA-A*03:01、mCD1d、hCD1d 等多种等位基因的空载四聚体，添加多肽段即可完成四聚体的制备，不仅四聚体更加稳定，而且能够帮助客户更加灵活的制备四聚体；
• MHC 生物素化的单体；
• 多种等位基因的生物素化单体可供选择
• HLA-A * 01：01，HLA-A * 02：01，HLA-A * 02：03，HLA-A * 03：01，HLA-A * 11：01，HLA-A * 24：02，HLA- A * 24：07，HLA-A * 25：01，HLA-A * 29：02，HLA-A * 30：02，HLA-A * 36：01，HLA-A * 68：01，HLA-A * 68:02
• HLA-B * 07：02，HLA-B * 08：01，HLA-B * 14：01，HLA-B * 15：01，HLA-B * 15：02，HLA-B * 15：09，HLA- B * 18：01，HLA-B * 35：08，HLA-B * 39：06，HLA-B * 41：01，HLA-B * 44：02，HLA-B * 46：01，HLA-B * 55：01，HLA-B * 57：02
• HLA-C * 03：04，HLA-C * 05：01，HLA-C * 06：02，HLA-C * 07：02
• H-2Kb 以及 mCD1d、hCD1d；
• 四聚体多肽置换试剂盒
• 能够实现 HLA-A*02:01、HLA-A*24：02 以及 H-2Kb 三种类型等位基因，PE、APC、BV421 三种荧光标记方式的四聚体的肽段置换，快速便捷的完成四聚体的制备。

定制服务
1：客户提供多肽和等位基因等信息进行配对拟合分析；
2：根据客户需求进行多肽和等位基因配对评估，若达到要求，与客户签订合同合成客户所需的 MHC 四聚体；若未达到要求，客户需要合成，客户需要承担无产品交付，MHC 四聚体合成失败所花的费用。


3：MHC 四聚体可提供产品检测报告；
4：不同类型的 MHC 四聚体可提供的规格： 50T、100T、150T，500T 等或 50ug，100ug，200ug，500ug 等，大包装的定制服务详情请具体咨询；

四聚体部分产品详情：
 

等位基因	多肽序列	多肽来源
HLA-A*02:01	ELAGIGILTV	MelanA / MART 26-35
	ILAKFLHWL	Telomerase 540-548
	KVAELVHFL	MAGEA3 112-120
	SLLMWITQV	NY-ESO-1 157-165
	YLSGANLNL	Carcinogenic Embryonic Antigen (CEA) 571-579
	VLDGLDVLL	PRAME 100-108
	FLWGPRALV	MAGEA3 271-279
	ALFDIESKV	PSM P2 (prostate)
	YMDGTMSQV	Tyrosinase 369-377 (371D)
	ITDQVPFSV	gp100 (pmel) 209-217
	SLLMWITQC	NY-ESO-1 157-165 (9C)
	YLSGADLNL	Carcinoembryonic antigen (CEA)-derived peptide CAP1-6D
	VLDFAPPGA	WT1(37-45)
	SLLQHLIGL	PRAME 425-433
	LLMWEAVTV	BKV VP1 108-116
	GVYDGREHTV	MAGE-A4 230–239
	RMFPNAPYL	WT-1 126-134 (Wilms tumor)
	NLTHVLYPV	Prame 435
	STAPPVHNV
	NLVPMVATV	HCMV pp65 495-504
	SLFNTIAVL	HIV-1 gag
	TIHDIILECV	HPV16 E6 29-38
	YMLDLQPET	HPV 16 E7 11-19
	PLFQVPEPV	hAFP(137-145)
	SLTECPTFL	HTNV
	FLLVLESIL	HTNV
	EAAGIGILTV	Human MART-1 26-35
	KIADYNYKL	SARS-CoV-2
	YLLPAIVHI	human helicase p148-156(negative)
	YLQPRTFLL	SARS-Cov-2 S-protein 269-277
	ALNTLVKQL	SARS-CoV-2
	AAGIGILTV	Human MART-1 27-35
	RQASIELPSMAV
	SLYSYFQKV	Human SLC45A2

 

等位基因	多肽序列	多肽来源
HLA-A*03:01	KQIYKTPPIK
HLA-A*24:02	AYACNTSTL	Survivin 80-88
	IMPKAGLLI	MAGE-A3
	VYAETKHFL	hTERT
HLA-A*31:01	ASGPGGGAPR	NY-ESO-1 53–62
HLA-B*57:03	KAFSPEVIPMF	HIV-1 gag 162–172
HLA-C*06:02	VRSRR(Abu)LRL
	ARTELYRSL
HLA-E*01:03	MMKSCLIAL
	SLTECPTFL	HTNV
	FLLVLESIL	HTNV
	YLQPRTFLL	SARS-Cov-2 S-protein 269-277
	ALNTLVKQL	SARS-CoV-2
HLA-G*01:01	RIIPRHLQL	Human H2AFX

 

等位基因	多肽序列	多肽来源
H-2Kb	SSIEFARL	HSV-1 gp B 469-476
	KILTFDRL	Rp118
	KSPWFTTL	MuLV env p15E 542- 549
	SIINFEKL	OVA 257-264
	TSYKFESV	Vaccinia virus protein B8 7-14

 

等位基因	多肽序列	多肽来源
H-2Db	VGWYRSPFSRVVHL	Human MOG
	STHVNHLHC	SPAS 1
	RAHYNIVTF	HPV 16 E749-57
	KAVYNFATC	LCMV GP1 33-41
	SGVENPGGYCL	LCMV GP 276-286
	KAVYNF ATM	gp33 (C9M)
	AIQGNVTSI	Mycobacterium tuberculosis ESAT-6 17-25

以上产品仅供科研使用

了解更多产品和定制服务信息请留言，或直接与我们销售人员取得联系~
联系方式：固话：400-780-1766；Email：info@f-biology.com
马先生，电话：18612979069